RNA转染效率低,可能的原因: 1. 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂,如Entranster。 2. 转染试剂和RNA的量不够,或者比例不对。优化实验条件,调整试剂和RNA用量,优化二者比例。 3.检测时间有问题。适当调整检测时间。 4. RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 5. 细胞状态不佳。调整细胞状态,调整细胞融合度。
阅读更多 »体内转染(entranster)与ADAM2沉默对异氟醚诱导的认知功能障碍的影响研究
认知功能障碍包括学习、注意力和记忆力方面的缺陷,通常被认为是系统性红斑狼疮最常见和最不易理解的神经精神症状。帕金森病(PD)和阿尔茨海默病(AD)是由认知功能障碍引起的一类广为人知的疾病。轻度认知障碍通常在早期AD中表现出来。有报告表明,诸如颜色辨别缺陷等症状能够部分反映认知功能障碍。据报道,包括异氟醚在内的挥发性麻醉剂对以麻醉后认知缺陷为特征的认知功能障碍 …
阅读更多 »电转染实验时,siRNA有什么要求?
使用高纯度、无菌的siRNA。确定电转染的最佳siRNA浓度。建议在250-750nM最终浓度范围内的进行siRNA不同浓度的梯度实验。建议设置一个非靶向或无意义的siRNA对照序列,以验证实验siRNA的特异性。同时也验证,针对单个基因用多个siRNA序列实验产生的表型是否是由于脱靶 …
阅读更多 »体内转染与血红素氧合酶-1和中性粒细胞气道炎症研究
过敏性哮喘通常被认为是以嗜酸性炎症为特征的Th2免疫应答。最近的研究表明,Th17细胞在非嗜酸性粒细胞哮喘(NEA)的发病机制中起重要作用,可导致类固醇耐药的中性粒细胞气道炎症。血红素氧合酶-1(HO-1)具有抗炎、抗氧化和抗凋亡作用。然而,其在NEA中的作用尚不清楚。 现分享一篇体内转染(Entranster)与血红素氧合酶-1对卵清蛋白诱导的中性粒细胞气 …
阅读更多 »如何选择腺病毒、慢病毒、腺相关病毒?
病毒表达系统 腺病毒(Adenovirus) 慢病毒(Lentivirus) 腺相关病毒(Adeno-As sociate virus) 病毒基因组 双链DNA病毒 RNA病毒 单链DNA病毒 复制 条件复制 不可复制 条件复制 滴度 最高可达1012pfu/ml 最高可达109TU/ml 最高可达1012-13v.g/ml 感染细胞类型 感染分裂和不分裂细 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与JMJD6和p53及结肠癌发生之间关系研究
umonji域包含6(JMJD6)是JumonjiC结构域蛋白家族的一个成员。相比于其他的家庭成员,JMJD6细胞活性仍不明确,其生物学功能仍然是很大的未开发。现分享一篇文献,文献中我报道JMJD6与肿瘤抑制基因p53相关,文献中用RNA转染(Entranster)研究JMJD6和p53及结肠癌发生之间的关系,以供参考。
阅读更多 »siRNA细胞转染操作步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例,说一下siRNA转染步骤(24孔板) 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞汇合度(Confluence)在30%左右为宜,转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与大鼠脑外伤后大脑皮层环状RNA变化研究
创伤性脑损伤(TBI)可分为初始损伤和继发损伤两个阶段。继发性损伤可使初始损伤恶化,导致炎症反应增强和细胞死亡增加,导致神经功能缺陷。初始损伤不能改变,但通过有效的治疗可以减轻继发损伤。虽然在过去几十年里已经做出了许多努力,但脑外伤仍然是一种严重的疾病,死亡率和发病率都很高,而且现有的治疗策略也很有限,这给社会和家庭带来了严重的经济负担。脑损伤的复杂生物学机 …
阅读更多 »体内转染与NIX/BNIP3L通路在大鼠创伤性脑损伤中潜在作用研究
NIX/BNIP3L被称为促凋亡蛋白,也与有丝分裂有关。以往的研究表明,NIX可能参与脑出血后的神经元凋亡,但在缺血性脑损伤的二尖瓣病变中也起到保护作用。NIX在治疗创伤性脑损伤中的作用尚不清楚。现分享一篇体内转染(engreen)与NIX/BNIP3L通路在大鼠创伤性脑损伤中的潜在作用研究的文献,以供参考。 文献地址:https://journ …
阅读更多 »siRNA细胞转染操作步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例,说一下siRNA转染步骤(24孔板) 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞汇合度(Confluence)在30%左右为宜,转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那 …
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