2025年 12 月 5日, 星期五
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瞬时转染后,划痕实验的最佳时间

瞬时转染后,划痕实验的最佳时间取决于几个因素,包括转染效率、基因表达时机以及细胞状态。一般来说,常见的策略如下: 1. 24 小时后划痕(常规选择) 绝大多数瞬时转染的基因在 24 小时左右开始有较高的表达水平,因此转染 24 小时后划痕是一个常见的选择。 这个时间点可以确保大部分细胞已成功表达外源基因,同时细胞仍然具有良好的活力,不会因过度表达导致过早凋亡 …

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siRNA转染效率不理想怎么办?

siRNA转染效率不理想,常见的原因有: 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率 …

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DNA转染(Entranster)与微管蛋白多翻译后修饰的蛋白质组学分析和功能表征研究

微管蛋白已知会有独特的翻译后修饰(PTMS),如脱酪氨酸和聚谷氨酰化,特别是在非结构化羧基末端尾(CTTS)中。然而,更多传统的微管蛋白的PTMS及其在微管性质和功能的调节中的作用仍然不明确。现分享一篇DNA转染(Entranster)与微管蛋白多翻译后修饰的蛋白质组学分析和功能表征研究的文献,以供参考。

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体内转染与巨噬细胞和人支气管上皮细胞肿瘤转化研究

      肺癌是发病率和死亡率增长最快,对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。肺肿瘤发生是一个复杂的过程,包括基因突变或表观遗传变化等多种因素,导致细胞失控增殖、恶性转化和肿瘤转移。其他研究表明,慢性炎症与肝脏和肠道的肿瘤发生密切相关,而许多流行病学研究表明,慢性炎症可能在肺肿瘤发生中起关键作用。现分享一篇运用体内 …

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如何优化RNA转染条件?

可从以下几方面进行优化: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如 …

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体内转染(Entranster)研究巨噬细胞和人支气管上皮细胞肿瘤转化

        肺癌是发病率和死亡率增长最快,对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。肺肿瘤发生是一个复杂的过程,包括基因突变或表观遗传变化等多种因素,导致细胞失控增殖、恶性转化和肿瘤转移。其他研究表明,慢性炎症与肝脏和肠道的肿瘤发生密切相关,而许多流行病学研究表明,慢性炎症可能在肺肿瘤发生中起关键作用。现分享一篇运用体内转染(Entranster-in v …

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siRNA转染(entranster)与成纤维细胞瘤细胞(l929-a)研究

L929成纤维细胞瘤细胞(l929-a)和L929纤维肉瘤细胞(l929-n)是不同的细胞系,常用于肿瘤坏死的细胞毒性因子α(TNFα)的研究,TNFa已被报道可诱导两种细胞系的坏死。然而,当比较TNFα诱导的在这两个细胞系的细胞死亡时,l929-n表现出典型的RIP3依赖性细胞坏死,在l929-a中却不是。现分享一篇运用siRNA转染(entranster …

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siRNA转染效率不理想的原因

siRNA转染效率不理想,常见的原因有: 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率 …

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