体外研究骨是困难的,因为它包含参干扰的各种细胞类型。骨生物连接各种器官,因此,骨骼生理学必须以完整的方式在完整的动物中进行研究。现分享一篇体内转染(Entranster)与siRNA沉默和骨骼基因功能评估研究的文献,以供参考。
阅读更多 »动物实验系列篇章之五——实验动物的采血法
实验研究中,经常要采集实验动物的血液进行常规质量检测、细胞学实验或进行生物化学分析,故必须掌握正确的采集血液的技术。采血方法的选择,主要决定于实验的目的和所需血量以及动物种类。 一、大鼠、小鼠的采血方法 (一)剪尾采血:需血量很少时常用本法,如作红、白细胞计数、血红蛋白测定、制作血涂片等可与此法。动物麻醉后,将尾尖剪去约5mm,从尾部向尾尖部按摩,血即从断端 …
阅读更多 »CCK8实验,如何设定空白对照组?
在不含细胞的培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验(细胞毒性实验)时,还应考虑药物的吸收,可在不含细胞,加入药物的培养基中加定的时间,测定450 nm的吸光度作为空白对照。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »瞬时转染后,划痕实验的最佳时间
瞬时转染后,划痕实验的最佳时间取决于几个因素,包括转染效率、基因表达时机以及细胞状态。一般来说,常见的策略如下: 1. 24 小时后划痕(常规选择) 绝大多数瞬时转染的基因在 24 小时左右开始有较高的表达水平,因此转染 24 小时后划痕是一个常见的选择。 这个时间点可以确保大部分细胞已成功表达外源基因,同时细胞仍然具有良好的活力,不会因过度表达导致过早凋亡 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与小鼠急性肝衰竭研究
过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARα)被激活以改善急性肝衰竭患者肝损伤(ALF)。然而,其内在的保护分子机制在很大程度上尚未确定。C/EBP同源蛋白(CHOP)是脂多糖(LPS)的重要介质引起的炎症。现分享一篇体内转染(Entranster-in vivo)与小鼠急性肝衰竭研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染效率低的原因是什么?
RNA转染效率低,可能的原因: · 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂,如Entranster试剂。 · 转染试剂和RNA的量不够,或者比例不对。优化实验条件,调整试剂和RNA用量,优化二者比例。 · 检测时间有问题。适当调整检测时间。 · RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 · 细胞状态不佳。调整细胞状态,调整细胞融合度。
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与睾丸生殖细胞肿瘤研究
睾丸生殖细胞瘤(Testic..cell tumors,TGCTs)是青少年和青年男性最常见的实体瘤之一,约占2012年全世界20~39岁男性肿瘤的8.9%。肿瘤生长受癌细胞与肿瘤微环境的串扰调制。最近的进展表明,肿瘤细胞中的miRNA功能障碍可以调节肿瘤微环境以间接决定其进展。然而,这一过程在睾丸生殖细胞肿瘤(TGCTs)中知之甚少。现分享一篇RNA转染( …
阅读更多 »英格恩产品在一些常见肺部疾病研究中的应用
文献分析:肺部疾病实验及英格恩产品的作用 文献1: 标题:Divergent Roles of miR-3162-3p in Pulmonary Inflammation in Normal and Asthmatic Mice as well as Antagonism of miR-3162-3p in Asthma Treatment 期刊:Inter …
阅读更多 »ECL发光液常见问题及解答2
4:Western Blot化学发光(ECL)时,胶片上条带很浓怎么办? 对ECL发光来说,可以减少发光时间和显影时间。对英格恩Enlight发光液来说,可以将压过的膜重新用TBST洗涤10min×3次后重新曝光操作。 5:Western blot化学发光(ECL)时,胶片上条带很弱怎么办? 对ECL发光来说,可适当延长曝光时间。如果还是不行,增加蛋白的上样 …
阅读更多 »做好siRNA转染的要点
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享