英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
活化的小胶质细胞介导的神经炎症被认为是蛛网膜下腔出血（SAH）诱发的早期脑损伤（EBI）发病机制中的一个潜在关键因素。骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植的治疗潜力已在多个脑损伤模型中得到证实，并被认为涉及炎症反应的调节。现分享一篇体内转染（entranster）与间充质干细胞减轻蛛网膜下腔出血早期脑损伤研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与肠黏膜屏障的信号转导和细菌移位研究
肠上皮表面由一层柱状上皮细胞构成，形成一个与大多数管腔内细菌直接接触的屏障，在防止细菌易位中起着重要作用。肠上皮屏障功能在炎症性肠病（IBD）的发病机制中起着至关重要的作用，但其机制尚未完全阐明。现分享一篇RNA转染（Entranster）与肠黏膜屏障的信号转导和细菌移位研究的文献，以供参考。
阅读更多 »Bio Factors | 浙江大学医学院陈高教授团队报道：创伤性脊髓损伤的潜在治疗剂
陈高教授团队在《Bio Factors》期刊上发表了题为“MANF attenuates neuronal apoptosis and promotes behavioral recovery via Akt/MDM-2/p53 pathway after traumatic spinal cord injury in rats“的论文。文章通 …
阅读更多 »Rab5a在脂多糖（LPS）诱导的肺微血管内皮屏障功能障碍中的作用及其机制
标题：Rab5-mediated VE-cadherin internalization regulates the barrier function of the lung microvascular endothelium 影响因子：5.808（Cellular and Molecular Life Sciences, 2015年） 文献概要 该研究探讨 …
阅读更多 »体内转染与血红素氧合酶-1和中性粒细胞气道炎症研究
过敏性哮喘通常被认为是以嗜酸性炎症为特征的Th2免疫应答。最近的研究表明，Th17细胞在非嗜酸性粒细胞哮喘（NEA）的发病机制中起重要作用，可导致类固醇耐药的中性粒细胞气道炎症。血红素氧合酶-1（HO-1）具有抗炎、抗氧化和抗凋亡作用。然而，其在NEA中的作用尚不清楚。 现分享一篇体内转染（Entranster）与血红素氧合酶-1对卵清蛋白诱导的中性粒细胞气 …
阅读更多 »问：现在是将构建好的质粒电转入到自制的感受态细胞里，质粒有10000bp，是90μL感受态细胞中加3.5μ质粒。我之前有电转过6000多bp的质粒，过夜培养可以长菌的。但是这个10000bp的质粒过夜培养没有单菌落，延长培养时间后有个别单菌落，但是挑单菌落到LB中并不浑浊。这种情况我是应该调整一下电转程序还是改一下加入质粒的量呢？
以下是详细的优化建议： 优化质粒用量（首要调整）： 问题： 你目前使用的是3.5µL质粒加入90µL感受态细胞。关键在于质粒的浓度（ng/µL），而不是体积。 3.5µL 对于90µL感受态细胞来说体积不小，如果质粒浓度较高，实际DNA量可能大大超过电转最优范围。 原理： 过量的DNA会导致电击时产生过多的热量和离子效应，严重降低转化效率，尤其对大质粒（&g …
阅读更多 »siRNA转染和DNA转染有什么不同？
首先siRNA由于只有二十几个碱基对，相比DNA几千上万对碱基，小了许多。目前大多数转染试剂都针对比较大的质粒DNA，而非小的RNA分子。用于转染DNA的转染试剂和方法并不完全适用于转染siRNA。 其次，siRNA转染比DNA转染对转染试剂细胞毒性的要求严格。由于转染试剂对细胞的毒性往往是对众多基因直接地或间接地上调或下调的结果，这对于过量表达的DNA转染 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与针灸抑制TXNIP相关氧化应激和炎症以减轻血管性痴呆大鼠认知功能障碍研究
氧化应激和炎症与血管性痴呆（VD）的发病机制有关。硫氧还蛋白相互作用蛋白（TXNIP）在氧化应激和NOD样受体蛋白（NLRP3）炎性体激活中起重要作用。有证据表明针灸在VD中具有抗氧化和神经保护作用。现分享一篇体内转染（Entranster）与针灸抑制TXNIP相关氧化应激和炎症以减轻血管性痴呆大鼠认知功能障碍研究的文献，以供参考。
阅读更多 »ECL发光液与重组弓形虫CDPK3接种对实验性弓形虫保护性免疫研究
弓形虫是一种普遍存在的、专性的细胞内病原体，可感染包括人在内的几乎所有的恒温动物。目前尚未有特效药物或疫苗能够防控弓形虫病。钙依赖性蛋白激酶(CDPKs)广泛的存在于植物、绿藻和顶复门原虫中,且不存在哺乳动物中。CDPKs在钙离子的调控下,主要参与入侵、胞内增值、逸出、运动和蛋白分泌等重要生物功能的调节。由于其不存在于哺乳动物中,CDPKs成为 …
阅读更多 »RNA转染实验效率低的原因
RNA转染效率低，可能的原因： 1. 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂，如Entranster。 2. 转染试剂和RNA的量不够，或者比例不对。优化实验条件，调整试剂和RNA用量，优化二者比例。 3.检测时间有问题。适当调整检测时间。 4. RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 5. 细胞状态不佳。调整细胞状态，调整细胞融合度。
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