英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下siRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与糖尿病心血管自主神经病变研究
糖尿病是一种以高血糖为主要症状的慢性流行病，其并发症多样，严重影响着全球人类的健康。糖尿病心血管自主神经病变（DCAN）是1型糖尿病和2型糖尿病的常见并发症，发病率和死亡率都很高。然而，DCAN的潜在机制尚不清楚。现分享一篇体内转染（Entranster）与糖尿病心血管自主神经病变研究的文献，以供参考。
阅读更多 »在慢病毒滴度测定的倍比稀释实验中，为什么计算滴度时好像没用上复孔？
通常，在计算滴度时，我们会选取某个稀释度的特定数据（如阳性细胞数），但这个数据往往是复孔的平均值，或者用于确认某个稀释度的数据是否可靠。因此，虽然计算公式中可能未直接体现复孔的作用，但复孔实际上已经在前期数据处理中起到了关键作用。 总结：复孔的作用是提高数据的稳定性和准确性，即使计算滴度时没有直接体现，实际上已经通过平均值计算、异常值排除等方式间接影响了最终 …
阅读更多 »DNA转染与人IL-37b 基因真核表达载体的构建与表达研究
ＩＬ-３７基因位于人类第二号染色体上，共有五种不同的剪切亚型，即ＩＬ-３７ａ ～ｅ，其中ＩＬ-３７ｂ 是五种亚型中分子量最大的一个 。ＩＬ-３７ 具有广泛的炎症抑制作用，可抑制外周血单个核细胞、树突状细胞、巨噬细胞及上皮细胞等细胞炎症因子的产生 ，另外在感染性休克、系统性红斑狼疮、炎症性肠病、肝损伤、肝癌等疾 …
阅读更多 »慢病毒感染后，细胞不生长原因？
慢病毒感染后，细胞不生长可能有多种原因。 以下是一些常见的原因和解决方法： 1) 病毒滴度过高: 原因：高滴度的慢病毒可能导致细胞毒性，使细胞无法正常生长。 解决方法：降低病毒的滴度，进行一系列稀释实验，找到一个既能有效转染又不影响细胞生长的滴度。 2) 细胞状态不佳： 原因：感染前细胞的健康状态可能影响感染后的生长。 解决方法：确保细胞在最佳状态下进行感染 …
阅读更多 »CCK8实验时，必须预培养细胞吗？
不一定。如果要向保持细胞的最好状态，建议预培养细胞。如果不做细胞预培养，细胞内的脱氢酶可能会不稳定。也有人不做细胞预培养，但在做标准曲线和检测时需要统一检测条件。 如需了解更多关于cck8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »两个shRNA在转录水平和蛋白水平都有效抑制了基因表达，但是表型做出来却不一致，是为什么？
这种情况可能是由多种因素引起的，以下是一些可能的原因： 转录水平和蛋白水平的不同调控机制：虽然shRNA能够有效地降低目标基因的mRNA和蛋白表达，但有时候蛋白质的功能并不完全依赖于其表达量。有可能是基因表达抑制后，细胞通过一些补偿机制（比如其他途径的上调或活化）来恢复其功能，导致表型不一致。 shRNA的特异性和脱靶效应：shRNA可能会靶向与目标基因相似 …
阅读更多 »体内转染（engreen）与miRNA和睾丸生殖细胞肿瘤研究
肿瘤生长受肿瘤细胞与肿瘤微环境之间的串扰的调节。最近的研究表明，肿瘤细胞中的miRNA功能障碍可以调节肿瘤微环境，间接决定肿瘤的进展。然而，这一过程在睾丸生殖细胞瘤（TGCTs）中还没有得到很好的阐述。现分享一篇体内转染（engreen）与miRNA和睾丸生殖细胞肿瘤研究的文献， 以 …
阅读更多 »电转感受态细胞的制备
1、 -80℃冰箱保存的菌种在SOB 固体平板上划单菌落； 2、次晨，挑选单克隆感至内含1ml SOB 液体培养基的试管中，37℃，300rpm，6 hr； 3、然后转接到含400ml SOB 液体培养基的2L 摇瓶中（按1:500 的量转接），300rpm，4hr，然后每隔2 min 测一次OD ，至OD =0.76； 4、立刻置冰水浴中骤冷，可以选择在一 …
阅读更多 »体内转染与CLU4A的抑制缺氧/复氧损伤中的心脏保护作用研究
CLU4A在各种人类癌症中被鉴定为原癌基因。CLU4A在心肌缺血/再灌注损伤中表达上调，但CLU4A在心肌缺血/再灌注损伤中的确切作用尚不清楚，需要研究CLU4A在心肌缺血/再灌注损伤中的潜在机制。现分享一篇体内转染（engreen）与CLU4A的抑制缺氧/复氧损伤中的心脏保护作用研究的文献，以供参考。 文 …
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