英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
胃癌是一种常见的上皮性癌，是世界范围内最常见的第五种恶性肿瘤。近年来胃癌的发病率一直呈上升趋势。每年约有一百万例胃癌发生，其中东亚地区占到50%，尤其是中国，严重危害人民健康和生命。中国胃癌的年发病率约为400000，占全世界病例总数的42%，并且总死亡率逐年上升。因此，寻找可靠的胃癌标志物和靶点是至关重要 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)和HIF-1α与肾再生研究
哺乳动物的肾再生已被报道贯穿其一生。损伤后，存活的成熟肾细胞或肾干细胞迁移到受损区域，增殖并重新分化为新的体细胞。然而，实现临床意义的再生已被证明是极具挑战性的，因为肾再生修复是不完整的，不能完全恢复肾脏自己功能。现分享一篇体内转染(Entranster)和HIF-1α与肾再生研究的文献，以供参考。
阅读更多 »病毒感染增强剂Envirus使用时出现细胞毒性怎么办？
出现细胞毒性的原因有： 1.增强剂用量过大。建议适当减少增强剂用量。 2.病毒量过大。适当减少病毒用量。 3.适当减少病毒用量。增加培养基量或更换培养基。
阅读更多 »动物体内转染，局部注射后应如何取样？
使用动物体内转染试剂Entranster-in vivo进行体内转染实验时，由于局部注射容易造成药液分布不均，在注射的近端，药液浓度高，效果明细；远端，药液浓度低，效果低一些。所以，一方面，需要尽量将药液均匀覆盖全部靶组织，另一方面，后续实验取样时，在保证实验的 …
阅读更多 »动物体内转染实验时，不同组织的核酸分布情况是怎样的？
使用Entranster体内试剂转染核酸时，如果通过尾静脉注射，确实不同组织的分布有差异。一般来说，肝、肺、肾的分布最高。一般分布高的地方转染效率也相对较高。但不是其他的组织器官效果就不好，相反，对绝大多数的器官组织来说，采用体内转染技术，效果也很好。比如一般认为神经细胞难以转染，而且尾静脉动物给药，通过血 …
阅读更多 »病毒包装过程中，细胞大量死亡，还有必要收集病毒吗
在病毒包装过程中，如果观察到细胞大量死亡，是否还要收集病毒需要根据具体情况判断。以下是一些可能的考虑因素： 病毒滴度：尽管细胞大量死亡，仍然有可能产生高滴度的病毒。如果病毒滴度足够高，可以继续收集病毒用于后续实验。 污染：细胞大量死亡可能是由于污染引起的。如果怀疑有细菌、真菌或支原体污染，收集病毒可能不是一个好主意，因为污染会影响后续实验的准确性。 病毒本身 …
阅读更多 »电转染实验影响因素
1 电场参数 电场是电转染的重要因素，细胞在电场的作用下，膜通透性增加或是形成小孔，以完成转染过程。因此电场强度是应该被优化的主要参数。电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。因此，一个适宜的电场强度至关重要。 不同细胞系具有不同的最佳场强值，其确定方法除了实验直接测定比较不同场强下转染率的高低外，还可以 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与MST1介导的大鼠脑出血继发性脑损伤研究
脑出血（ICH）是一个严重的公共卫生问题，可导致成人的高致残率和死亡率。细胞凋亡是ICH后继发性脑损伤（SBI）的标志。哺乳动物不育系20样激酶-1（MST1）是一种细胞凋亡促进激酶，是Hippo信号通路的一部分，参与细胞死亡、氧化应激和炎症反应。然而，MST1在ICH诱导的SBI中的作用和潜在机制尚未完全清楚。现分享一篇体内转染（entranster）与M …
阅读更多 »siRNA转染（Entranster）与YWK-II蛋白/APLP2稳定性研究
YWK-II蛋白/APLP2是一种进化上保守的蛋白家族的成员，包括淀粉样前体蛋白（APP）和淀粉样蛋白前体蛋白（APLP1）。已经表明YWK-II /APLP2在细胞存活方面可作为Müllerian抑制物（MIS）的一种新的G蛋白偶联受体。然而，调节YWK-II /APLP2蛋白的折叠和稳定性的因素尚未确定。现分享一篇siRNA转染（Entra …
阅读更多 »shRNA转染后，什么时候做RT-PCR最好?
shRNA转染后，进行RT-PCR的最佳时间取决于多种因素，包括细胞类型、转染效率、shRNA的表达和目标基因的降解速度。一般来说，在转染后的24到72小时内进行RT-PCR是比较常见的时间点。具体来说： 24小时后：在这个时间点，可以开始检测到shRNA的表达以及目标基因的初步下调情况。对于一些高效的shRNA，这个时间点可能已经有显著的基因沉默效果。 4 …
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