英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
1. 电场强度要合适 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 细胞状态要好 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞（15代以内，传代后2 …
阅读更多 »病毒载体的基本元件
反转录病毒载体 最常用的反转录病毒载体基于Mo -MLV 。第一代载体所携带的转基因的两侧是2 个完整的LTR, 由增强子(U3) 、R 区（即转录起始区，在病毒颗粒中的载体基因组两端均存在）及U5 区构成。病毒载体的包装主要由包装信号序列（ψ）介导，而邻近的gag序列能够显著提高其包装效率。所有反转录病毒载体均携带一个ψ甲序列和部分gag 序列组成的扩展包 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与SIRT3基因和非酒精性脂肪肝病研究
作为一种正在全世界蔓延的慢性复杂性疾病，非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）发病率在全球范围内的攀升迅速，被称为“下一场即将到来的世界性疾病大流行”。NAFLD有发展为肝硬化甚至肝癌的风险，对人类健康造成严重威胁。 Sirtuins是一类NAD＋依赖的去乙酰化酶。SIRT3是该家族 …
阅读更多 »ECL发光液与重组弓形虫CDPK3接种对实验性弓形虫保护性免疫研究
弓形虫是一种普遍存在的、专性的细胞内病原体，可感染包括人在内的几乎所有的恒温动物。目前尚未有特效药物或疫苗能够防控弓形虫病。钙依赖性蛋白激酶(CDPKs)广泛的存在于植物、绿藻和顶复门原虫中,且不存在哺乳动物中。CDPKs在钙离子的调控下,主要参与入侵、胞内增值、逸出、运动和蛋白分泌等重要生物功能的调节。由于其不存在于哺乳动物中,CDPKs成为 …
阅读更多 »siRNA转染与卫星胶质细胞中P2X7受体研究
嘌呤信号能够引起炎症和免疫反应。卫星胶纸细胞（SGCs）中的P2X嘌呤受体7（P2X7）的激活可能是促进炎症和神经性疼痛中一个必不可少的组成部分。长链非编码RNAs（lncRNAs）参与多种生理和病理过程。现分享一篇针对lncRNA BC168687的小干扰RNA（Entranster）对高糖和高游离脂肪酸环境下卫星胶纸细胞P2X7受体表达的影响的文献，以供 …
阅读更多 »慢病毒感染，胶体金测出来很高，可感染效果很差的原因
慢病毒感染效率低，尽管用胶体金测试显示滴度很高，可能有以下几个原因： 病毒颗粒质量：虽然胶体金检测显示病毒滴度很高，但这并不意味着所有的病毒颗粒都是功能性的。有可能病毒颗粒已经失活或者结构受损，无法有效感染目标细胞。 病毒浓度与效价的差异：胶体金检测主要测量病毒颗粒的数量，但这些颗粒不一定都具有感染性。有效感染的病毒颗粒（感染性单位）可能比实际检测的数量要低 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与丙戊酸钠增强肝细胞脂肪变性研究
丙戊酸钠（Valproate，VPA）是一种广谱抗癫痫药物，已广泛应用于各种抽搐，双极性，或分裂情感障碍等癫痫的治疗。据报道，VPA治疗是一个长期的过程，甚至需要终身服药。然而，在整个VPA抗癫痫治疗过程中会发生药物不良反应（ADR），如肝毒性、肥胖、出血性胰腺炎、骨髓抑制和血氨过多性脑病。其中肝毒性是限制丙 …
阅读更多 »导师再也不用担心我的体内转染实验了
EntransterTM-in vivo是英格恩生物公司（Engreen Biosystem Co,Ltd.）最新研发合成的用于动物体内转染的转染试剂。 作用原理： EntransterTM-in vivo体内转染试剂，通过纳米技术合成，非脂质体，通过物理作用与核酸结合，浓缩包裹核酸，从而保护核酸免受免疫系统破坏，并通过物理作用将核酸富集在细胞表面，增强核酸 …
阅读更多 »ECL发光液（Enlight）与弓形虫疫苗研究
弓形虫是一种无处不在的原生动物寄生虫，能感染所有恒温动物，包括哺乳动物和鸟类。蛋白质二硫键异构酶（PDI）可以移位到弓形虫速殖子细胞表面，参与调解病原微生物和宿主细胞的相互作用。现分享一篇ECL发光液（Enlight）在弓形虫疫苗研究中应用的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染效率影响因素
细胞DNA转染效率的影响因素 1.细胞密度 一般来说，当细胞密度达到60%～80%时进行转染可以取得较高的转染效率，过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态 这点非常关键，很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此，为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性，应尽量使用适度传代的细胞系，并在不同次实验时保持细胞传代次数的 …
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