英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
缝隙连接蛋白（Cx）构成脊椎动物的缝隙连接（GJ），可调节重要的细胞过程，包括电耦合，增殖，分化和凋亡。与最初在上世纪60年代提出的“接触增长抑制”概念一致，GJ和CX被公认为肿瘤抑制；恶性肿瘤的特点是GJ的缺失。在恶性肿瘤细胞中，转染Cx以GJ依赖的方式提高放疗/化疗诱导的细胞凋亡（有毒的“旁观者效应”）。Cx在宫颈癌中的作用尚不清楚。现分享一篇RNA转染 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与镰刀菌细胞毒性研究
在自然界中，微生物镰刀菌病原体普遍侵入宿主植物、动物和人类，并且共生次生代谢物真菌毒素。除农业经济损失外，以脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）为例，这些物质通常是对食品安全、动物和人类健康带来严重威胁。虽然全世界对食品中DON阈值的许多规定都是严格立法的，但DON对婴儿、青年和老年人群的毒性和安全限度仍存在相当大的争议，这实际上是由于对DON毒性的准确和广泛接受的 …
阅读更多 »电转染实验时，DNA有什么要求？
使用Entranster-E电转染试剂进行电转染实验时，应使用高纯度、无菌和无污染的DNA进行电穿孔实验。质粒DNA要求无内毒素，OD值为1.8-2.0。不建议使用微型试剂盒制备DNA，因为它可能含有高水平的内毒素。 不要使用仅用乙醇沉淀法纯化的DNA …
阅读更多 »电转效率受哪些因素影响？
电穿孔效率受以下几种因素的影响： 外加电场的强度。电压过低，培养细胞质膜的改变不足以允许DNA 通过； 电压过高，细胞会受到不可逆的损伤。对于大多数哺乳动物细胞系， 电压250~ 500V/cm时可达到最高瞬时表达水平。通常经过电穿孔， 20% ～ 50％的细胞能够存活（根据台盼蓝拒染法的检测结果） ( Patterson 1979; Baum et al. …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与核受体Nur77和脂肪酸氧化及黑色素瘤细胞研究
脂肪酸氧化（FAO）是细胞获得ATP和NADPH来克服代谢应激的关键。然而，脂肪酸氧化（FAO）在肿瘤中调节的机制仍不清楚。现分享一篇DNA转染（Entranster）与核受体Nur77和脂肪酸氧化及黑色素瘤细胞研究的文献，以供参考。
阅读更多 »Crispr/Cas9腺病毒构建流程
Crispr/Cas9 简介 CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫机制。目前，来自Streptococcus pyogenes 的CRISPR-Cas9系统应用最为广泛。Cas9 蛋白（含有两个核 …
阅读更多 »RNA转染（entranster）与SASH1引起病理性色素沉着研究
p53转录调节蛋白与大量细胞内其他信号转导途径相互作用，并且有很多正负自我反馈调节作用于p53反应。p53直接控制由紫外线（UV）导致的POMC /αMSH产物并和非紫外线因素导致的的病理性色素沉着相关。现分享一篇RNA转染（entranster）与SASH1引起病理性色素沉着研究的文献，以供参考。
阅读更多 »请问蛋白半衰期30小时，siRNA转染后大约多久收样合适呢？
既然目标蛋白的半衰期是30小时，说明它在细胞中相对稳定，也就是说，蛋白不会很快降解。 在使用siRNA干扰该蛋白的表达时，有几个关键时间点需要考虑： 一般siRNA作用流程： 转染后6–12小时：siRNA开始被细胞利用，mRNA水平开始下降。 24–48小时：mRNA水平通常显著降低（具体情况因靶基因和细胞类型而异）。 48–72小时：蛋白水平逐步下降，尤 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与杜鹃花中总黄酮对心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究
杜鹃花总黄酮是从杜鹃花的花朵中提取的有效成分，对家兔和大鼠脑缺血或者心肌损伤具有明显的保护作用。然而，其心肌保护作用机制仍不清楚。现分享一篇体内转染（Entranster）与杜鹃花中总黄酮对心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究的文献，以供参考。
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与结直肠癌中硼替佐米抗癌活性研究
多种化疗药物通过激活内源性凋亡信号通路促进肿瘤细胞死亡。这条通路是由线粒体功能障碍调节，这是通过一个复杂的过程，受B细胞淋巴瘤2‑（Bcl‑2）家庭成员和其他细胞蛋白之间复杂的相互作用所控制。Bcl‑2相关X蛋白（Bax）是一种促凋亡蛋白，是内在的细胞凋亡信号通路的重要组成部分。缺乏bax的患者可能由于内源性凋亡信号通路受损而对化疗不那么敏感。现分 …
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