原发性干燥综合征(PSS)是一种全身性自身免疫性疾病。以外分泌腺的淋巴细胞浸润为特征的,主要是唾液腺和泪腺,导致分泌功能的丧失。虽然PSS的病因仍不清楚,但许多研究已经证实树突状细胞(DCS)、NK细胞、B细胞和T细胞参与了SS的发病机制。最近的研究发现,Th1和Th17免疫应答在PSS的发展中起着关键性的作用。髓系来源的抑制性细胞(MDSC)是具有免疫抑制 …
阅读更多 »RNA转染与丹参酮IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用研究
丹参酮 IIA(Tanshinone IIA,Tan IIA)是一种从丹参干根中提取的生物活性物质,具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。然而,Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制仍有待进一步阐明。现分享一篇运用RNA转染(Entranster)的方法的文献,通过阐明Tan IIA在p53基因缺陷的H1299细胞中的抗肿瘤作用机制,以确定丹参酮IIA …
阅读更多 »如何提高siRNA细胞转染效率
为了达到高的siRNA转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RN …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与B淋巴细胞刺激因子和多发性骨髓瘤研究
B淋巴细胞刺激因子(BLyS),一种肿瘤坏死因子超家族成员,是一种有效的体内外B细胞共活化剂,可诱导B细胞增殖和分泌免疫球蛋白。多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的晚期分化B细胞恶性肿瘤(浆细胞)。先分享一篇RNA转染(Entranster-R4000)与B淋巴细胞刺激因子(BLyS)和多发性骨髓瘤(MM)研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染效率低的原因是什么?
RNA转染效率低,可能的原因: · 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂,如Entranster试剂。 · 转染试剂和RNA的量不够,或者比例不对。优化实验条件,调整试剂和RNA用量,优化二者比例。 · 检测时间有问题。适当调整检测时间。 · RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 · 细胞状态不佳。调整细胞状态,调整细胞融合度。
阅读更多 »siRNA转染(Entranster)与YWK-II蛋白/APLP2稳定性研究
YWK-II蛋白/APLP2是一种进化上保守的蛋白家族的成员,包括淀粉样前体蛋白(APP)和淀粉样蛋白前体蛋白(APLP1)。已经表明YWK-II /APLP2在细胞存活方面可作为Müllerian抑制物(MIS)的一种新的G蛋白偶联受体。然而,调节YWK-II /APLP2蛋白的折叠和稳定性的因素尚未确定。现分享一篇siRNA转染(Entran …
阅读更多 »siRNA转染常见问题及解答
问:siRNA导入细胞有哪些方法,哪种最好? 答:siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素:细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术是最为常用的方法,而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好。 问:哪种转染试剂效果好? …
阅读更多 »siRNA细胞转染实验效率低的原因
1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这 …
阅读更多 »siRNA转染(Entranster)与细胞骨架蛋白和肝肺综合征研究
肝肺综合征(HPS)是肝病,肺内血管扩张(IPVD)和低氧血症的三联征,动脉低氧血症可引起肺血管重构(PVR)。在最近的研究中,与HPS有关的PVR中肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用已确定;细胞骨架蛋白的变化在细胞增殖中起着重要的作用。但与HPS有关的PVR中细胞骨架蛋白表达与分子机制相关性知之甚少。现分享一篇siRNA转染(Entranster- …
阅读更多 »RNA转染与Cav3通过Wnt信号通路与骨质疏松大鼠模型骨形成研究
骨质疏松症是一种以骨密度和骨强度降低为特征的疾病,常见于老年人。Caveolin-3(Cav3)是caveolae膜结构域的主要结构蛋白,已被报道可参与细胞信号传导和维持细胞结构。现分享一篇RNA转染(entranster)与Cav3通过Wnt信号通路对骨质疏松大鼠模型骨形成的影响研究的文献,以供参考。 文献地址:https://link.spr …
阅读更多 »
英格恩生物技术博客 生物实验干货分享