siRNA细胞转染应注意的事项
为了达到高的转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »RNA转染与LncRNA Pvt1调控骨髓源抑制细胞的免疫抑制活性研究
骨髓源抑制细胞(MDSC)通过显著阻断T细胞诱导的抗肿瘤反应参与肿瘤诱导的免疫抑制,从而影响肿瘤免疫治疗的效果。改变MDSC分化和功能的治疗可以部分恢复抗肿瘤免疫反应。长非编码RNA浆细胞瘤变异体易位1(lncrna-pvt1)是多种癌症类型的潜在癌基因。然而,目前还没有完全阐明lncrna-pvt1是否参与MDSCs的调节。 现分享一篇RNA …
阅读更多 »提高RNA转染效率的几点建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与乙型脑炎病毒和细胞凋亡研究
流行性乙型脑炎病毒(JEV)感染是一种以神经元死亡为特征的脑组织疾病。然而,人们对其基本机制知之甚少。现分享一篇RNA转染(Entranster)与乙型脑炎病毒和细胞凋亡研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染与BAFF和BCMA结合诱导多发性骨髓瘤研究
多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的血液恶性肿瘤,其特点是恶性浆细胞克隆性增殖,与大多数患者产生单克隆免疫球蛋白有关。细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10、干扰素-α和B细胞活化因子(BAFF)在促进MM细胞生长和耐药中的作用已得到明确阐述。越来越多的证据表明BAFF影响MM细胞的生长、存活、迁移和耐药性。B细胞成熟抗原(BC …
阅读更多 »悬浮细胞的siRNA转染实验步骤
悬浮细胞的siRNA转染操作步骤,以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA,加入一定量无血清稀释液,充分混匀,制成RNA稀释液,终体积为25μ …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与JMJD6和p53及结肠癌发生之间关系研究
umonji域包含6(JMJD6)是JumonjiC结构域蛋白家族的一个成员。相比于其他的家庭成员,JMJD6细胞活性仍不明确,其生物学功能仍然是很大的未开发。现分享一篇文献,文献中我报道JMJD6与肿瘤抑制基因p53相关,文献中用RNA转染(Entranster)研究JMJD6和p53及结肠癌发生之间的关系,以供参考。
阅读更多 »做好siRNA转染的要点
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
阅读更多 »如何优化RNA转染条件?
可从以下几方面进行优化: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如 …
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