为了达到高的转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »细胞转染siRNA后,目标基因的表达反而升高的原因是什么?
siRNA转染后目标基因不降反升的现象可能由多种原因引起,常见的因素包括: siRNA设计不合理: siRNA的靶点选择不佳,未能有效靶向目标基因的mRNA,导致抑制效果差或反而激活了基因表达。可以尝试设计不同的siRNA靶点或使用更为优化的siRNA工具进行设计。 转染效率问题: 低转染效率可能导致siRNA无法进入足够多的细胞,从而未能有效抑制目标基因。 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与启动子相关的小双链RNA激活研究
最近的一些报道表明,与启动子区互补的小激活dsRNA [双链RNA;SaRNA(小激活dsRNA)]可以上调哺乳动物细胞中的基因表达,这种现象被称为RNAa(RNA激活)。然而,关于什么是启动子靶向SARNA的靶分子,以及参与该过程的蛋白质是什么等RNAa的分子机制并不清楚。现分享一篇RNA转染(Entra …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与二氢杨梅素抑制NLRP3炎性体依赖的细胞焦亡研究
越来越多的证据表明,细胞焦亡和炎性细胞程序性死亡与动脉粥样硬化有关;然而,其潜在的机制仍有待澄清。二氢杨梅素(Dihydromyricetin,DHM),一种天然的黄酮类化合物,据报道有抗氧化和抗炎的生物活性。然而,DHM对于动脉粥样硬化相关细胞焦亡的影响尚不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster)与二氢杨梅素抑制 NLRP3炎性体依赖的细胞焦亡研 …
阅读更多 »RNA转染与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱整合研究
暴露与辐射中会引起细胞反应,这可能受到基因表达网络的调控。miRNA是一种小的非编码RNA,通过促进mRNA的降解或抑制蛋白质的翻译来调节基因的表达。在放射性肺损伤中miRNA和mRNA的表达模式还不是很清楚,并且miRNA在这个过程中的作用还未有研究。现分享一篇RNA转染(Entranster)与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱 …
阅读更多 »RNA转染与B淋巴细胞刺激因子和多发性骨髓瘤研究
B淋巴细胞刺激因子(BLyS),一种肿瘤坏死因子超家族成员,是一种有效的体内外B细胞共活化剂,可诱导B细胞增殖和分泌免疫球蛋白。多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的晚期分化B细胞恶性肿瘤(浆细胞)。先分享一篇RNA转染(Entranster)与B淋巴细胞刺激因子(BLyS)和多发性骨髓瘤(MM)研究的文献,以供参考。
阅读更多 »都说RNAi很容易降解,转染效率很低,是真的吗?
RNAi就是利用降解双链RNA的酶系统,人工引入一段和目标RNA互补的序列,这样,在细胞内形成双链RNA,诱发降解机制,使目标RNA降解,无法被进一步翻译。 在转染过程中,有人就在担心,dsRNA的稳定性是相对于单链RNA而言的!RNA怎么办? RNAi中,标准的非修饰的siRNA确实容易降解,这不仅在保存过程中,而且在转染过程中。对siRNA的降解,可以合 …
阅读更多 »RNA转染与LncRNA LINC00511和肝癌细胞增殖和转移研究
长链非编码RNA在人肝癌(HCC)中异常表达,并与HCC的进展有关。lncRNA linc0511(linc0511)已被证实在一些肿瘤中作为肿瘤启动子。然而,作为一中新颖的LncRNA,linc00511的具体功能仍然不是很清楚。现分享一篇RNA转染(engreen)与LncRNA LINC00511和肝癌细胞增殖和转移研究的文献,旨在评估 …
阅读更多 »siRNA转染实验需要知道的关键点
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
阅读更多 »如何能够做好siRNA转染实验?
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
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