英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
病毒感染增强剂envirus使用中常出现的问题及解决方案如下：
阅读更多 »嘌呤霉素筛选标记的病毒滴定 Protocol
关于使用嘌呤霉素筛选标记的慢病毒或逆转录病毒进行病毒滴定的 protocol，整理了一个常用且较为权威适用于慢病毒系统： 【嘌呤霉素筛选法的病毒滴定 Protocol】 原理简述： 将病毒感染宿主细胞，使用嘌呤霉素筛选，仅有成功整合了抗性基因的细胞能存活。最后通过计数存活细胞（克隆或整体密度）来估算病毒滴度。 实验材料： 病毒上清； HEK293T 或其他易 …
阅读更多 »电转染实验时，细胞密度是多少合适？
进行电穿孔实验时.，需确定每种细胞类型的最佳细胞密度，以使电穿孔效率最大化。对于Entranster-E电转染试剂来说，在含电转试剂的终体系中，电穿孔时的细胞密度一般在1-10×106细胞/ml范围内。对于悬浮细胞，最好是接近10×106细胞/ml的高细胞密度。对于贴壁细胞，建议的细胞密度为1-5×106 …
阅读更多 »体内转染与巨噬细胞和人支气管上皮细胞肿瘤转化研究
肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。肺肿瘤发生是一个复杂的过程，包括基因突变或表观遗传变化等多种因素，导致细胞失控增殖、恶性转化和肿瘤转移。其他研究表明，慢性炎症与肝脏和肠道的肿瘤发生密切相关，而许多流行病学研究表明，慢性炎症可能在肺肿瘤发生中起关键作用。现分享一篇运用体内转染（Entranster）方法研究巨噬细胞和人支气 …
阅读更多 »如何快速实现蝗虫、七鳃鳗、猪等（非小鼠）动物的体内基因敲除/表达？
如何快速实现蝗虫、七鳃鳗、猪等动物的基因敲除呢？ 如果实验室研究人体疾病基因，需要稳定表达时，我们可能会选择基因工程小鼠，但如果课题组研究的是其他哺乳动物，比如猪、蝗虫、鱼之类的，基因工程的工作就相对复杂了。首先要设计基因载体，然后打入靶细胞进行同源重组，再培养细胞、筛选……一套工夫下来，要不目的基因没重组，要不模型全死了。要不找公司做？老牌的公司构建基因工 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与髓源性抑制细胞的抑制潜能研究
髓系来源的抑制性细胞（MDSC）介导了广泛而深刻的免疫抑制，特别是对T细胞功能的影响。在小鼠中，MDSC的特征是细胞表面分子Gr1(包括巨噬细胞和中性粒细胞标志物Ly6C和Ly6G)和CD11b的表达；在人类中，MDSC通常是CD11b+CD33+HLA-DR2。小鼠CD11b+Gr1+细胞群由两个亚群组 …
阅读更多 »CCK8实验中，设定参比波长的目的是什么？必须设定吗？
不一定要设定。CCK8试剂在参比波长没有吸光度。设定参比波长的目的是为了取出由于样品混浊所带来的吸收。 如需了解更多关于cck8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与羟基氯喹和自噬体及宫颈癌SiHa细胞研究
羟基氯喹（Hydroxychloroquine，HCQ），氯喹的羟基化类似物，是一种抗疟原虫溶酶体抑制剂，它抑制溶酶体酸化引起的自噬，并随后阻断自噬体与溶酶体的融合，从而导致自噬体的积累，从而加速肿瘤细胞的死亡。现分享一篇ECL发光液（enlight）与羟基氯喹和自噬体及宫颈癌SiHa细胞研究的文献，以供参考。
阅读更多 »通过转染双链siRNA 在哺乳动物细胞中进行RNA 干扰
长链dsRNA 不能用于多数哺乳动物细胞中，这是由于它能诱导干扰素反应而引发基因表达和细胞凋亡的变化。本方案介绍了一种向哺乳动物细胞中转入短的双链siRNA 的方法，双链siRNA 因其长度过短而不能引起与dsRNA 相关的序列非特异性反应。本方案适用于24 孔板中生长的细胞。如果使用了其他规格的多孔板、培养瓶或者培养皿，则需要根据培养孔的表面积换算细胞密度 …
阅读更多 »DNA转染与干细胞自我更新和多能性维持的研究
干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的原始细胞，包括胚胎干细胞、成体干细胞和诱导多能干细胞（IPS）。干细胞具有非常重要的理论研究意义和临床应用价值。利用胚胎干细胞建立多种细胞类型的体外分化系统，使人们能够在细胞和分子水平上研究哺乳动物的发育过程；不同发育阶段的细胞可确定胚胎发 …
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