英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
小GTP酶Rab5可以控制囊泡接到的质膜蛋白运输，其在血管内皮（VE）-钙黏蛋白的内化作用功能仍然未知，血管内皮（VE）-钙黏蛋白是一种内皮特异性跨膜元件，可以调节内皮细胞的极性和屏障功能。现分享一篇应用体内转染siRNA （Entranster-in vivo）的方法研究肺微血管内皮功能的文献，以供参考。
阅读更多 »siRNA转染效率不理想的原因有哪些？
siRNA转染效率不理想，常见的原因有： 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率 …
阅读更多 »体外转录法制备dsRNA中，怎么知道mRNA的靶区域在哪
在体外转录法制备dsRNA（双链RNA）的过程中，确定mRNA的靶区域是关键的一步。以下是一些常用的方法和步骤，以帮助确定mRNA的靶区域： 1. 目标基因的选择 首先，确定你想要抑制或研究的目标基因。你需要有这个基因的完整序列信息（通常从基因数据库中获得，如NCBI）。 2. 设计siRNA或shRNA序列 设计小干扰RNA（siRNA）或小发夹RNA（s …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与咪康唑对早产大鼠脑白质损伤髓鞘保护作用研究
少突胶质细胞（ODNs）是中枢神经系统（CNS）的主要细胞，对神经元功能至关重要。中枢神经系统髓鞘异常是多种神经系统疾病的特征，包括白质损伤、多发性硬化和视神经脊髓炎。脱髓鞘的原因通常包括免疫损伤、兴奋毒性、病毒感染、肌营养不良和氧化应激。现分享一篇ECL发光液（Enlight）与咪康唑对早产大鼠脑白质损伤的髓鞘保护作用研究的文献，以供参考。
阅读更多 »CCK8检测溶液对细胞是否有毒性？
CCK8溶液自身因为高浓度的PMS的存在而具有一点毒性。但是，加到培养基中的CCK8是没有毒性的，因为被稀释了10倍。因此，长时间的培养，如过夜或者培养数天是可以的。同一个细胞培养液在CCK8检测后还可以用于其他细胞增殖检测，如结晶紫检测，中性红检测或者DNA荧光检测等。由于每种细胞对于CCK8的耐受力都不同，因此在需要进行长时间培养时，先检测 …
阅读更多 »慢病毒感染细胞常见问题分析
1.用于慢病毒感染的细胞接种量是多少？ 根据细胞增殖的速度调整细胞接种量，以保证在感染后4天左右细胞刚好快长满培养皿底部为宜。 针对大部分细胞系：传代周期在2-3天，感染时细胞铺板的密度保持在20-30%左右，则72h后细胞增殖后铺板密度约在90%左右； 针对某些原代细胞： 由于细胞增长缓慢，可以在接种时提高汇合度到50%～60%，但要确保在感染后4天时细胞 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与小胶质细胞活化防止脑缺血损伤研究
缺血性中风是导致全球范围内死亡和残疾的主要原因之一，是一个重大的公共卫生问题。为了阐明了缺血性脑损伤的病理机制，科研人员付出了巨大的努力。为此，针对中风引起的神经炎症是治疗中风的一个有吸引力的策略。现分享一篇体内转染（Entranster）与小胶质细胞活化防止脑缺血损伤研究的文献，以供参考。
阅读更多 »上皮间质转化在抑制肝癌方面的机制研究
文献概要 标题: MicroRNA-125b Attenuates Epithelial-Mesenchymal Transitions and Targets Stem-Like Liver Cancer Cells Through Small Mothers Against Decapentaplegic 2 and 4 期刊: Hepatology 影 …
阅读更多 »电转染实验影响因素
1 电场参数 电场是电转染的重要因素，细胞在电场的作用下，膜通透性增加或是形成小孔，以完成转染过程。因此电场强度是应该被优化的主要参数。电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。因此，一个适宜的电场强度至关重要。 不同细胞系具有不同的最佳场强值，其确定方法除了实验直接测定比较不同场强下转染率的高低外，还可以 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与骨形态发生蛋白和人软骨肉瘤研究
软骨肉瘤，源自于软骨细胞的恶性肿瘤，是第二最常见的原发性骨肿瘤。对于大多数患者，手术切除仍是首选的治疗方法，但也有很多不能手术的软骨肉瘤位于骨盆和脊柱区。而且，通常的辅助治疗，如化疗和质子束辐射也不能改善治疗结果。因此，例软骨肉瘤继续预后差。因此，迫切需要探索一种新疗法可以应对软骨肉瘤。骨形态发生蛋白是一类生长因子，是肿瘤生长因子β超家族的一个大家族。它们在 …
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