在慢病毒感染细胞过程中,会遇到哪些问题呢? 1.在细胞感染时, MOI是一个非常重要的指标,如何确定MOI值呢? MOI:复感染指数,是指病毒对细胞的感染能力,MOI越高,细胞越难被感染。通常把某株细胞有80%被感染时所用的病毒颗粒数和细胞数目的比值作为该株细胞的MOI。 MOI=(病毒滴度×病毒体积)/细胞数目 感染条件及MOI的选择原则: 1. 在细胞形 …
阅读更多 »siRNA细胞转染操作步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例,说一下siRNA转染步骤(24孔板) 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞汇合度(Confluence)在30%左右为宜,转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与丹参酮ii-磺酸钠和BKca通道研究
丹参酮ii-磺酸钠(ds-201)是丹参酮ii-a的水溶性衍生物,可诱导血管舒张并激活BKca通道。为了探讨ds-201在BKca通道上的作用机制,现分享一篇ECL发光液(enlight)与丹参酮ii-磺酸钠和BKca通道研究的文献,以供参考。 文献地址:https://www.nature.com/articles/aps201485
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与BMP9通过下调PI3K/Akt信号通路抑制乳腺癌细胞生长研究
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,起源于乳腺上皮组织。近年来,乳腺癌的发病率逐年增加,已成为世界第二大常见癌症。骨形态发生蛋白9(BMP9)是BMP家族成员,参与肿瘤发生、发展和转移的调控,为了探讨BMP9是否通过PI3K/Akt信号通路抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞的生长,现分享一篇ECL发光液(enlight)与BMP9通过下调PI3K/Akt信号通路抑 …
阅读更多 »做嘌呤霉素筛选滴定时,感染两天,puro杀3天,5天细胞长得很密原因和解决方法,另外镜下数整个孔的克隆数感觉困难,能换成镜下视野面积与孔面积比换算吗?
问题1:“感染两天,puro杀3天,5天细胞都长很密” 原因: 细胞分裂快(比如 293T)→ 在5天内即使有筛选,还是会长满。 感染率高 → 很多细胞表达抗性,嘌呤霉素筛选不够“稀释” 建议: 缩短时间:感染 24h 后就加 puromycin,第 2 天开始杀,杀 2–3 天就足够。 更稀释的病毒梯度:推荐加大稀释倍数:1:1000,1:5000,甚至 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与冠状动脉微栓塞问题研究
冠状动脉微栓塞(CME)是一种常见的和重要的临床现象,急性冠状综合征(ACS),和那些接受溶栓治疗、经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的患者都会出现冠状动脉微栓塞现象。现分享一篇运用体内转染(Entranster)方法研究细胞死亡因子4/NF-κB在猪冠状动脉微栓塞引起的心脏功能障碍中的发生机制的文献,以供参考。
阅读更多 »ECL发光液多长时间失效
早期的ECL发光液很容易失效,一般质量较差的发光液,1个月以后,发光能力就逐步减弱了,有的发光液3个月以后就完全失效了。这样会出现,用同一瓶发光液,结果有差异,影响实验结论的现象。一定要选择至少3个月-6个月质量稳定的发光液,比如英格恩的Enlight发光液。
阅读更多 »动物体内转染试剂entranster-invivo的主要特点
●最快3天可以得到结果,核酸+转染试剂,注射动物,完成转染。 ● 肝、肾、心、肺,血液系统,神经系统,生殖系统,皮肤…成功应用。 ● 可方便、快捷更换不同的小片断RNA进行动物试验。 ● 方法先进,抛弃病毒,众多实验室应用,稳定可靠。 ● 比使用病毒节省90%以上费用,时间缩短到3天!
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与雷公藤红素增强肿瘤细胞中缺氧诱导因子-1活性研究
雷公藤红素,是从传统中药雷公藤中提取的一种三萜类化合物,具有抗炎、抑制肿瘤血管生成、抑制肿瘤生长、诱导细胞凋亡以及对人类神经退行性疾病的细胞保护作用等多种作用。然而,这些功能的基础机制并不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster)与雷公藤红素增强肿瘤细胞中缺氧诱导因子-1活性研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(Entranster)与缺氧诱导因子和肾再生研究
虽然哺乳动物的肾再生发生在在整个生命期中,但哺乳动物的成熟的肾脏并不能充分再生,尤其是肾小球。以往的研究表明,肾部分切除术后的脱细胞肾支架可增强肾的再生。现分享一篇体内转染(Entranster)与缺氧诱导因子和肾再生研究的文献,以供参考。
阅读更多 »
英格恩生物技术博客 生物实验干货分享