可从以下几方面进行优化: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如 …
阅读更多 »英格恩产品在一些常见肺部疾病研究中的应用
文献分析:肺部疾病实验及英格恩产品的作用 文献1: 标题:Divergent Roles of miR-3162-3p in Pulmonary Inflammation in Normal and Asthmatic Mice as well as Antagonism of miR-3162-3p in Asthma Treatment 期刊:Inter …
阅读更多 »CCK8试剂盒能否对活细胞进行染色?
不能。因为CCK8 的主要成分是一种水溶性的四唑盐 (WST8),并通过电子载体PMS 将活细胞中的电子交换到培养基中的WST8 上。由于生成的甲臜也是高度水溶性的,因此CCK8 不能对细胞进行染色。 如需了解更多关于CCK8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »客户问:你好,如果电转以后抗性板子上一个没长,无抗的都长满了,这种情况是没电进去,需要增加次数吗,还是其他原因呢?
回答:“无抗的都长满”,说明细胞活性和数量没问题,基本排除培养条件问题。那么核心矛盾集中在质粒是否成功进入细胞并表达抗性基因。这里有几个关键排查点:质粒浓度是否足够(建议>100ng/μL)、抗性基因是否匹配(如氨苄不能用于表达AmpR的质粒)、抗性板浓度是否正确(过高会杀死阳性克隆)。 特别注意的是检查质粒纯度。实验室常用乙醇沉淀法提质粒,但残留的盐 …
阅读更多 »ECL发光液与香烟烟雾提取物接触和平滑肌细胞增殖研究
动脉粥样硬化是发病率和死亡率的主要原因。动脉粥样硬化的特点是血管平滑肌细胞(SMCs)过度增殖,是多种因素联合作用的结果。流行病学调查表明,吸烟与动脉粥样硬化密切相关,在血管平滑肌细胞(SMC)的过度增殖起着关键性作用。现分享一篇ECL发光液(enlight)与香烟烟雾提取物接触后平滑肌细胞的增殖研究的文献,以供参考。 文献地址:http:// …
阅读更多 »CCK8检测溶液对细胞是否有毒性?
CCK8溶液自身因为高浓度的PMS的存在而具有一点毒性。但是,加到培养基中的CCK8是没有毒性的,因为被稀释了10倍。因此,长时间的培养,如过夜或者培养数天是可以的。同一个细胞培养液在CCK8检测后还可以用于其他细胞增殖检测,如结晶紫检测,中性红检测或者DNA荧光检测等。由于每种细胞对于CCK8的耐受力都不同,因此在需要进行长时间培养时,先检测 …
阅读更多 »细胞DNA转染实验步骤
下面以Entranster-H4000,DNA转染试剂为例,简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞密度在60%左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。 注意:无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …
阅读更多 »RNA转染与mir-155调节胶质瘤细胞增殖和侵袭研究
胶质瘤是成人最常见的原发性恶性脑肿瘤,尽管治疗有所改善,脑胶质瘤患者的预后和生存率仍然非常差。特别是,根据目前WHO脑肿瘤分类,多形性胶质母细胞瘤是最恶性的胶质瘤。探索胶质瘤发生、发展的分子机制,已成为发展胶质瘤新的治疗策略的迫切需求。最近的研究已经报道了脑肿瘤细胞中miRNAs的改变,表明它们在癌基因或抑癌基因中的作用。 现分享一篇RNA转染(Entran …
阅读更多 »动物体内转染实验给药剂量
动物体内转染试剂Entranster-in vivo进行实验时的推荐给药剂量和体积如下: 给药途径 …
阅读更多 »动物体内转染实验,局部注射,应如何取样观察结果?
运用动物体内转染试剂Entranster-in vivo进行动物体内转染实验时,由于局部注射容易造成药液分布不均,在注射的近端,药液浓度高,效果明细;远端,药液浓度低,效果低一些。所以,一方面,需要尽量将药液均匀覆盖全部靶组织,另一方面,后续实验取样时,在保证实验的情况下,尽量取注射区域附近的组织,不取或者少取药液覆盖差的组织,以增加实验效果。
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享