有以下几种方法(96 孔板): ①在显色反应后,将培养板放置4℃冰箱内。②每孔加10μl 0.1 M HCL 溶液。③每孔加10μl 的 1%(w/v)的SDS(十二烷基硫酸钠)溶液。注意:反应停止后,应在24 小时之内测定。 如需了解更多关于CCK8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »专利:一种卵巢原位注射实现RNA过表达的方法及应用
文章概要 该专利发明了一种卵巢原位注射实现RNA过表达的方法,通过体内转染技术在小鼠卵巢中特异性过表达RNA(如lncRNA),为研究RNA在卵巢中的功能提供了技术支持。该方法避免了尾静脉注射的无靶向性缺陷,显著减少了转染试剂用量,且操作微创,对小鼠生存无影响。 采用英格恩产品的实验部分 转染试剂: 使用北京英格恩生物科技有限公司的Entranster …
阅读更多 »请问蛋白半衰期30小时,siRNA转染后大约多久收样合适呢?
既然目标蛋白的半衰期是30小时,说明它在细胞中相对稳定,也就是说,蛋白不会很快降解。 在使用siRNA干扰该蛋白的表达时,有几个关键时间点需要考虑: 一般siRNA作用流程: 转染后6–12小时:siRNA开始被细胞利用,mRNA水平开始下降。 24–48小时:mRNA水平通常显著降低(具体情况因靶基因和细胞类型而异)。 48–72小时:蛋白水平逐步下降,尤 …
阅读更多 »RNA转染与BAFF和BCMA结合诱导多发性骨髓瘤研究
多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的血液恶性肿瘤,其特点是恶性浆细胞克隆性增殖,与大多数患者产生单克隆免疫球蛋白有关。细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10、干扰素-α和B细胞活化因子(BAFF)在促进MM细胞生长和耐药中的作用已得到明确阐述。越来越多的证据表明BAFF影响MM细胞的生长、存活、迁移和耐药性。B细胞成熟抗原(BC …
阅读更多 »为什么选择AAV作为基因治疗的病毒载体?
AAV,即腺相关病毒载体,属于细小病毒科依赖病毒属。野生型AAV感染人宿主细胞后,可以整合到人类19号染色体的AAVS1位点,但AAV不会引起人类疾病。实际上,我们市面常见的AAV并不是野生型AAV,而是重组AAV(rAAV)。 AAV和AAV载体的基因组结构(图片来源:Semantic Scholar) 目前来看,rAAV相比较其他病毒载体,未发现 …
阅读更多 »慢病毒感染,胶体金测出来很高,可感染效果很差的原因
慢病毒感染效率低,尽管用胶体金测试显示滴度很高,可能有以下几个原因: 病毒颗粒质量:虽然胶体金检测显示病毒滴度很高,但这并不意味着所有的病毒颗粒都是功能性的。有可能病毒颗粒已经失活或者结构受损,无法有效感染目标细胞。 病毒浓度与效价的差异:胶体金检测主要测量病毒颗粒的数量,但这些颗粒不一定都具有感染性。有效感染的病毒颗粒(感染性单位)可能比实际检测的数量要低 …
阅读更多 »如何达到更好的siRNA转染效率?
为了达到高的转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »Cell Death Discovery | 南京大学口腔医学院:牙周膜成纤维细胞铁下垂机制新发现
《Cell Death Discovery》期刊上发表的题为“Periodontitis-level butyrate-induced ferroptosis in periodontal ligament fibroblasts by activation of ferritinophagy“的文章表明牙周炎水平的丁酸盐通过激活 NCOA4 …
阅读更多 »体内转染siRNA(Entranster)与神经炎症和认知障碍研究
作为衰老过程中的主要特征,神经性炎症参与几种与衰老相关疾病的发病机制,包括阿尔茨海默氏病(AD)。触发受体表达髓系细胞(TREM)2是一种新的AD致病基因,但是关于TREM2在与衰老相关的神经炎症、认知障碍等方便研究不足。现分享一篇运用体内转染siRNA(Entranster-in vivo)敲降TREM2的方法与神经炎症和认知障碍研究的文献,文献 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与miR-155表达上调和脓毒症患者免疫抑制
脓毒症是一种主要是由于感染而导致的全身炎症反应,可导致多器官功能障碍综合征,死亡率高。虽然在过去十年中脓毒症的预防和控制取得了进展,但脓毒症仍然是ICU(ICU)患者死亡的主要原因,早期诊断和评估是脓毒症患者预后的关键。因此,开发一种生物标志物用于早期诊断和准确的预后评估是必要的。先分享一篇体内转染(En …
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