肝癌是全球第二大癌症死亡原因,每年新增78.25万例,死亡74.55万人。东亚地区肝癌发病率最高,仅中国就占世界总病例和死亡人数的50%左右。肝细胞癌(HCC)占原发性肝癌绝大多数。根据巴塞罗纳临床肝癌分期分类,肿瘤大小、血管浸润和转移是决定肝癌患者临床分期和预后的关键因素。因此,识别与肿瘤生长、侵袭和转移相关的关键分子和信号通路有助于我们了解 …
阅读更多 »Experimental Neurology | circle RNA重庆医科大学钟建军教授团队报道:调控疾病的新方向
钟建军教授团队在《Experimental Neurology》期刊上发表的“Significant changes in circular RNA in the mouse cerebral cortex around an injury site after traumatic brain injury”文章通过携带siRNA的体内转染试 …
阅读更多 »使用带有GFP荧光标记的慢病毒感染细胞,想要检测GFP阳性率,通常用什么方法?
如果您使用的是带有GFP荧光标记的慢病毒感染细胞,想要检测GFP阳性率,通常情况下可以通过流式细胞仪来实现,步骤如下: 收集细胞:首先收集感染后的细胞,并用适当的缓冲液进行重悬。 去除死细胞:可以通过加PI(碘化丙啶)或7-AAD等染料来排除死细胞,这样有助于提高检测的准确性。 流式检测:使用流式细胞仪时,选择FITC通道(通常是FL1通道),因为GFP的荧 …
阅读更多 »细胞DNA转染效率影响因素
1.组织培养试剂 优化细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂,并经可能减少所用试剂的变更。 基础培养基—目前所使用的各种市售培养基(如,RPMI 1640和DMEM)。培养基的成分包括营养物质(氨基酸,葡萄糖),维生素,无机盐,和缓冲物质。有些成分非常不稳定,因此如果不在使用时新鲜加入就可能会产生问题。务必要使培养基避光保存。因为已知有一些组分和缓冲物 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与ADAM2沉默对异氟醚诱导的认知功能障碍的影响研究
认知功能障碍包括学习、注意力和记忆力方面的缺陷,通常被认为是系统性红斑狼疮最常见和最不易理解的神经精神症状。帕金森病(PD)和阿尔茨海默病(AD)是由认知功能障碍引起的一类广为人知的疾病。轻度认知障碍通常在早期AD中表现出来。有报告表明,诸如颜色辨别缺陷等症状能够部分反映认知功能障碍。据报道,包括异氟醚在内的挥发性麻醉剂对以麻醉后认知缺陷为特征的认知功能障碍 …
阅读更多 »慢病毒适用于哪些细胞?
慢病毒(Lentivirus)载体是以 HIV-1 (人类免疫缺陷1型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。具有感染谱广泛、可以有效感染分裂期和静止期细胞、长期稳定表达外源基因等优点,因此成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、RNA干扰、microRNA研究以及活体动物实验中。 慢病毒有如下特点: ● 感染范围广 …
阅读更多 »CCK8检测溶液对细胞是否有毒性?
CCK8溶液自身因为高浓度的PMS的存在而具有一点毒性。但是,加到培养基中的CCK8是没有毒性的,因为被稀释了10倍。因此,长时间的培养,如过夜或者培养数天是可以的。同一个细胞培养液在CCK8检测后还可以用于其他细胞增殖检测,如结晶紫检测,中性红检测或者DNA荧光检测等。由于每种细胞对于CCK8的耐受力都不同,因此在需要进行长时间培养时,先检测 …
阅读更多 »慢病毒感染后,细胞不生长怎么办
慢病毒感染后,细胞不生长可能有多种原因。以下是一些常见的原因和解决方法: 病毒滴度过高: 原因:高滴度的慢病毒可能导致细胞毒性,使细胞无法正常生长。 解决方法:降低病毒的滴度,进行一系列稀释实验,找到一个既能有效转染又不影响细胞生长的滴度。 细胞状态不佳: 原因:感染前细胞的健康状态可能影响感染后的生长。 解决方法:确保细胞在最佳状态下进行感染,例如在感染前 …
阅读更多 »siRNA转染效率低的原因有哪些?
1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这 …
阅读更多 »ECL发光液(Enlight)与五味子醇乙促进肝再生研究
肝再生是肝损伤后恢复的重要过程,是肝部分切除术(PHx)后的一种很有前景的临床策略。五味子醇乙(Schisandrol B,SOLB)是从华中五味子提取的一种生物活性成分,对小鼠药物性肝损伤具有明显的肝保护作用。然而,SOLB对PHx肝再生的影响尚不清楚。现分享一篇ECL发光液(Enlight)与五味子醇乙促进肝再生研究的文献,以供参考。
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享