1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
阅读更多 »Am J Cancer Res | 北京大学附属医院报道:软骨肉瘤治疗研究新进展
该团队在《Am J Cancer Res》期刊发表了题为“BMPR2-pSMAD1/5 signaling pathway regulates RUNX2 expression and impacts the progression of dedifferentiated chondrosarcoma”的研究论文。论文实验使用了RNA体内 …
阅读更多 »CCK8试剂盒工作原理是什么?
CCK8基于水溶性四唑盐WST8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),WST8在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的脱氢酶还原生成橙黄色的甲臜染料(formazan)。甲臜染料能够溶解在组织培养基中,与活细胞数量成正比。通过比色,可以动态地量化活细胞的数量,从而对细胞增 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与糖尿病神经痛大鼠脊髓CGRP释放研究
糖尿病是一种以慢性高血糖为特征的代谢性疾病。2013,全球糖尿病患者超过3亿8200万人,预计到2035年底人数将达到5亿9200万人。糖尿病患者经常会出现并发症,例如心血管疾病、视网膜病变、神经病变等。糖尿病神经病理性疼痛(DNP)是糖尿病神经病变的主要临床症状之一,常表现在远端肢 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制研究
丹参酮 IIA(Tanshinone IIA,Tan IIA)是一种从丹参干根中提取的生物活性物质,具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。然而,Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制仍有待进一步阐明。现分享一篇运用RNA转染(Entranster)的方法的文献,通过阐明Tan IIA在p53基因缺陷的H1299细胞中的抗肿瘤作用机制,以确定丹参酮IIA …
阅读更多 »体内转染(entranster)与冠状动脉微栓塞问题研究
冠状动脉微栓塞(CME)是一种常见的和重要的临床现象,急性冠状综合征(ACS),和那些接受溶栓治疗、经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的患者都会出现冠状动脉微栓塞现象。现分享一篇运用体内转染(Entranster)方法研究细胞死亡因子4/NF-κB在猪冠状动脉微栓塞引起的心脏功能障碍中的发生机制的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(entranster)与GSDMD在I/R损伤中的作用及可能的潜在机制研究
尽管缺血性中风是全世界死亡的主要原因之一,但缺血再灌注(I/R)脑损伤的致病机制仍不清楚。消皮素D(Gasdermin D,GSDMD)是caspase-11(非异常炎症体)和caspase-1(典型炎症体)下游的热致死亡执行的重要因素,可能与I/R损伤有关。现分享一篇体内转染(entranster)与GSDMD在I/R损伤中的作用及可能的潜在机制研究的文献 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与小胶质细胞M2极化和脑炎性保护作用
小胶质细胞介导的炎症会导致脑出血(ICH)继发性损伤。活化的小胶质细胞在脑损伤和修复中具有促炎症(M1)和抗炎(M2)的双重功能。miR-124是一种有效的在脑损伤后抗小胶质细胞的抗炎药。然而,ICH后小胶质细胞的M1/M2极化的调节作用还未见报道。现分享一篇体内转染(Entranster)与小胶质细胞M2 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与大鼠创伤性脊髓损伤后神经细胞凋亡和行为恢复研究
外伤性脊髓损伤(T-SCI)是世界范围内常见的一种损伤,常导致严重的神经功能缺损和渐进性退化。T-SCI的病理是原发性损伤和继发性损伤的结果。原发性损伤指的是直接导致脊髓结构损伤,包括细胞死亡、局部轴索损伤、血管破裂以及损伤部位周围的局灶性出血。继发性损伤是由原发性损伤引起的各种分子、细胞和生化反应引起的损伤。现分享一篇体内转染(Entranster)与大鼠 …
阅读更多 »体内转染与RIP3和大鼠实验性蛛网膜下腔出血后早期脑损伤研究
程序性坏死是由多种蛋白介导的一种调节性坏死形式,包括肿瘤坏死因子α(TNF-α)和受体相互作用蛋白(RIPS)。TNF-α是一种重要的炎症分子,是程序性坏死通路中的起始信号,而RIP3可作为一种促使细胞程序性坏死的开关。蛛网膜下腔出血(SAH)是一种常见的出血性卒中类型,死亡率和致残率高。RIP3在许多中枢神经系统疾病中都有研究,但其在蛛网膜下 …
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