1. 电场强度要合适 合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值,实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 细胞状态要好 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞(15代以内,传代后2 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与单cRGD修饰笼状siRNA的光调节研究
小干扰RNA(siRNA)是通过RNA干扰(RNAi)在体外和体内抑制特定蛋白质合成的有力工具,由于RNAi利用天然途径,即在蛋白质翻译发生之前,在转录后水平上关闭基因表达,因此,siRNA诱导下调基因表达对基础研究和应用研究有着巨大的影响。siRNA及其递送系统的化学修饰已被建议用于改善细胞内siRNA递送 …
阅读更多 »客户:做293T细胞转染,遇到了单转质粒过表达没有共转质粒过表达高是怎么回事?
回答: 1. 启动子竞争与转录因子的“稀释” 如果你在共转染中加入的是一个非表达质粒(载体骨架)或特定的辅助质粒,目标表达量反而增高,可能是因为单转染时目标质粒浓度过高,导致细胞内的转录因子被“过度征用”或者触发了细胞的应激机制。 适当的质粒比例:有时候少量的质粒反而能获得更稳定的转录效率,避免了转录机器的饱和。 2. 辅因子或辅助蛋白的协同作用(核心原因) …
阅读更多 »RNA转染与利拉鲁肽和MC3T3-E1细胞凋亡研究
近年来,对肠促胰岛素和骨的关系的兴趣不断增加。之前的研究已经表明胰高血糖素样肽-1(GLP-1)及其受体激动剂对骨骼代谢具有有益的合成代谢作用,如通过肠-骨轴促进成骨细胞的增殖和分化。然而,对于GLP-1对成骨细胞凋亡的影响及其相关机制并不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster)与利拉鲁肽和MC3T3-E1细胞凋亡研究的文献,以供参考。
阅读更多 »如何快速实现蝗虫、七鳃鳗、猪等(非小鼠)动物的体内基因敲除/表达?
如何快速实现蝗虫、七鳃鳗、猪等动物的基因敲除呢? 如果实验室研究人体疾病基因,需要稳定表达时,我们可能会选择基因工程小鼠,但如果课题组研究的是其他哺乳动物,比如猪、蝗虫、鱼之类的,基因工程的工作就相对复杂了。首先要设计基因载体,然后打入靶细胞进行同源重组,再培养细胞、筛选……一套工夫下来,要不目的基因没重组,要不模型全死了。要不找公司做?老牌的公司构建基因工 …
阅读更多 »在共转染中,怎么看质粒的表达能力?通过什么方式呢?
共转染实验中,判断质粒的表达能力通常有几种常见的方式,具体方法取决于你的实验设计和质粒中所包含的标记。以下是几种常用的检测方式: 1. 荧光标记 如果质粒中包含了荧光标记基因(如GFP、RFP等),通过显微镜直接观察荧光信号是最直观的方式。这种方法不仅可以评估质粒的转染效率,还可以间接反映出质粒的表达能力。 优势:快速、简便,能够同时评估转染效率和蛋白表达。 …
阅读更多 »TREM2缺失损害施旺细胞的能量代谢并加剧外周神经功能缺陷
文献标题: TREM2 deficiency impairs the energy metabolism of Schwann cells and exacerbates peripheral neurological deficits (TREM2缺失损害施旺细胞的能量代谢并加剧外周神经功能缺陷) 影响因子: 该论文发表于《Cell Death and D …
阅读更多 »circCCT2对头颈部鳞状细胞癌的机制研究
标题:CircCCT2/miR-146a-5p/IRAK1轴促进头颈部鳞状细胞癌的发展 期刊:BMC Cancer 采用英格恩(Engreen)产品的实验部分 体内肿瘤实验(Page 4, Methods) 产品:Entranster™ 体内转染试剂 用途:将siRNA递送至裸鼠移植瘤 方法:当肿瘤体积达60 mm³时,每3-4天瘤内注射 5 …
阅读更多 »CCK8实验,如何设定空白对照组?
在不含细胞的培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验(细胞毒性实验)时,还应考虑药物的吸收,可在不含细胞,加入药物的培养基中加定的时间,测定450 nm的吸光度作为空白对照。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与多梳抑制复合物2(PRC2)和肿瘤研究
多梳抑制复合物2(PRC2),可对H3K27三甲基化(H3K27me3),是肿瘤发生发展的一部分,和/或维持成人组织特异性。PRC2癌症中的关键作用使它成为表观遗传学癌症治疗的治疗靶点。现分享一篇DNA转染(Entranster)与多梳抑制复合物2(PRC2)和肿瘤研究的文献,以供参考。
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