英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
树突状细胞（DCS）是抗原（Ag）呈递细胞，具有独特的刺激幼T细胞和启动原发性免疫应答的能力。然而，DCs在中枢和外周免疫耐受的诱导和T细胞免疫应答的类型的调节中也具有关键性的作用。依赖于环境，树突状细胞（DCS）可能变得活跃或耐受性，但很少知道是否遗传的表观遗传修饰涉及这些过程。现分享一篇RNA转染（Entranster）与人单核细胞来源的树突状细胞的染色 …
阅读更多 »动物实验系列篇章之七—— 实验动物的处死
当实验中途停止或结束时，实验者应站在实验动物的立场上以人道的原则去处置动物，原则上不给实验动物任何恐怖和痛苦，也就是要施行安乐死。安乐死是指实验动物在没有痛苦感觉的情况下死去。实验动物安乐死方法的选择取决于动物的种类与研究的课题。 一、蛙 类 常用金属探针插入枕骨大孔,破坏脑脊髓的方法处死。将蛙用湿布包住，露出头部,左手执蛙，并用食指按压其头部前端，拇指按压 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与单cRGD修饰笼状siRNA的光调节研究
小干扰RNA（siRNA）是通过RNA干扰（RNAi）在体外和体内抑制特定蛋白质合成的有力工具，由于RNAi利用天然途径，即在蛋白质翻译发生之前，在转录后水平上关闭基因表达，因此，siRNA诱导下调基因表达对基础研究和应用研究有着巨大的影响。siRNA及其递送系统的化学修饰已被建议用于改善细胞内siRNA递送 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与肺癌细胞凋亡研究
肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，是全世界范围内恶性肿瘤死亡原因的首位，非小细胞肺癌约占肺癌病例的80%。肺癌被认为是一种遗传疾病，内源性致病基因的异常表达导致基因组的不稳定性，从而增加癌细胞的运动性和侵袭性。尽管可以成功治疗原发性恶性肿瘤，但仍有四分之一以上的患者在术后复发和远处转移。现分享一篇运用体内转染（Entranster-in vivo）的方 …
阅读更多 »体内转染与神经元损伤和血脑屏障破坏研究
脑内出血（Intracerebral hemorrhage，ICH），占中风原因的10% – 15%，是以脑内一条或多条血管破裂和血液进入脑实质为特点。脑出血后血肿导致脑组织受压，导致机械性损伤和继发性脑损伤，以及炎症反应、神经细胞死亡和神经功能缺损。ICH发病率上升，住院率增加18%。大约20 …
阅读更多 »体内转染与mir‐208b通过靶向cdkn1a调节细胞周期并促进骨骼肌细胞增殖研究
骨骼肌是人体内最丰富的组织。骨骼肌细胞发育复杂，受多种因素影响。大量的mirRNA（micrornas）被认为是肌发生的关键调节因子。MIR-208b是一种肌肉特异性的mirRNA，据报道与纤维类型测定有关。然而，MIR-208b是否对肌肉细胞增殖有影响尚不清楚。现分享一篇体内转染（entranster）与mir‐208b通过靶向cdkn1a调节细胞周期并促 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与Egr-1表达下调和氯胺酮抗抑郁作用研究
氯胺酮是N-甲基-D-天门冬氨酸受体（NMDA）的非竞争性拮抗剂。越来越多的证据表明，单剂量氯胺酮会产生一系列快速而显著的抗抑郁作用。然而，其机制尚不清楚。现分享一篇体内转染（Entranster）与Egr-1表达下调和氯胺酮抗抑郁作用研究的文献，以供参考。
阅读更多 »如何提高siRNA细胞转染效率
为了达到高的siRNA转染效率，在转染实验过程中，需要注意以下几点： 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RN …
阅读更多 »细胞铺板密度对于siRNA转染为什么很重要？
RNA转染试剂Entranster-R4000成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率和总的细胞数量就很重要，一般细胞数量较少时转染效率高，一些试剂由于本身毒性的影响，太低的细胞数量时毒性明显，所以会要求较高的细胞密度（汇合度），顺便说一句，看一个转染试剂 …
阅读更多 »是否有嘌呤霉素筛选标记的病毒的病毒滴定protocol，看了好多好多不一样的?这个有比较权威又大众的滴度操作流程吗？
关于使用嘌呤霉素筛选标记（puromycin resistance marker）的慢病毒（lentivirus）或逆转录病毒（retrovirus）进行病毒滴定（virus titration）的 protocol，确实有不少不同的做法，这是因为不同实验室根据自己的系统和需求进行了优化。但是，有一些权威且广泛应用的标准流程可以作为通用参考，下面是整理的一个 …
阅读更多 »