文献标题:Extracellular RNAs-TLR3 signaling contributes to cognitive impairment after chronic neuropathic pain in mice 影响因子:Signal Transduction and Targeted Therapy 是Nature旗下期刊,2023年影响因 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)研究巨噬细胞和人支气管上皮细胞肿瘤转化
肺癌是发病率和死亡率增长最快,对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。肺肿瘤发生是一个复杂的过程,包括基因突变或表观遗传变化等多种因素,导致细胞失控增殖、恶性转化和肿瘤转移。其他研究表明,慢性炎症与肝脏和肠道的肿瘤发生密切相关,而许多流行病学研究表明,慢性炎症可能在肺肿瘤发生中起关键作用。现分享一篇运用体内转染(Entranster-in v …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与大鼠创伤性脊髓损伤后神经细胞凋亡和行为恢复研究
外伤性脊髓损伤(T-SCI)是世界范围内常见的一种损伤,常导致严重的神经功能缺损和渐进性退化。T-SCI的病理是原发性损伤和继发性损伤的结果。原发性损伤指的是直接导致脊髓结构损伤,包括细胞死亡、局部轴索损伤、血管破裂以及损伤部位周围的局灶性出血。继发性损伤是由原发性损伤引起的各种分子、细胞和生化反应引起的损伤。现分享一篇体内转染(Entranster)与大鼠 …
阅读更多 »siRNA转染实验的关键点
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
阅读更多 »lonza电转,同时电转DNA和RNA,其中RNA的转染效率降低很多,单独RNA,效率很高;共转的时候,RNA的总量是一样的,一个GFP的mRNA,所以可以通过荧光判断表达量,但是当加入DNA后,GFP的荧光就非常差了,用的程序是适用于mRNA的一个程序,有什么建议吗
单独电转mRNA(GFP)信号很好,但一旦同时把DNA一起电转,GFP荧光显著下降。这个往往不是“挤占表达资源”这么简单,更多是由“电转参数 + 细胞先天免疫反应 + 总核酸/盐负载”三方面共同导致。给你一个可操作、优先级排序的排障与优化清单(不需要额外设备就能尝试): 先做两件最快见效的事 把DNA量往下砍 10–100×(起始试 10 ng~100 ng …
阅读更多 »ECL发光液(Enlight)与咪康唑对早产大鼠脑白质损伤的髓鞘保护作用研究
少突胶质细胞(ODNs)是中枢神经系统(CNS)的主要细胞,对神经元功能至关重要。中枢神经系统髓鞘异常是多种神经系统疾病的特征,包括白质损伤、多发性硬化和视神经脊髓炎。脱髓鞘的原因通常包括免疫损伤、兴奋毒性、病毒感染、肌营养不良和氧化应激。现分享一篇ECL发光液(Enlight)与咪康唑对早产大鼠脑白质损伤的髓鞘保护作用研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(Entranster)与CREB1基因沉默对血管性痴呆小鼠认知功能障碍的影响研究
血管性痴呆(VD)是老年痴呆的第二大病因,仅次于阿尔茨海默病(AD),在西方国家占所有痴呆病例的17.6%,研究表明在世界东部地区,包括中国和日本人口中,认知功能障碍的人数要更多。认知功能障碍广泛被认为是痴呆患者的经典特征。VD,以各种脑血管疾病为特征的损伤综合征主要与缺血性脑血管疾病相关。目前,VD的确切发病机制仍不清楚。因此,有必要更详细地阐明该病症背后 …
阅读更多 »如何利用好慢病毒感染的原理和特点?
一、原理 慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体,与化学合成的siRNA 和基于瞬时表达载体构建的普通 siRNA 载体相比,一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用,另一方面,Lentivirus-siRNA 克隆经过慢病毒包装系统包装后,可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非 …
阅读更多 »体内转染与牛磺酸脱氧胆酸通过Akt通路激活减轻早期脑损伤研究
创伤性脑损伤(TBI)是创伤性死亡和致残的主要原因之一,新的研究表明内质网应激在TBI的病理生理过程中起着重要作用。牛磺脱氧胆酸(TUDCA)是一种亲水性胆汁酸,已被报道为ER应激抑制剂和化学伴侣,并具有抑制细胞凋亡和炎症的潜力。 现分享一篇体内转染(Entranster)与牛磺酸脱氧胆酸通过Akt通路激活减轻早期脑损伤研究的文献,以供参考。
阅读更多 »动物实验系列篇章之三——实验动物的麻醉方法
麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉,保障实验动物的安全,使动物在实验中服从操作,确保实验顺利进行。 一、常用的麻醉药 (一)常用局部麻醉剂:普鲁卡因,此药毒性小,见效快,常用于局部浸润麻醉,用时配成0.5%~1%;利多卡因,此药见效快,组织穿透性好,常用1%~2%溶液作为大动物神经干阻滞麻醉,也可用0.25%~0.5% …
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