英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
动物体内转染试剂entranser-in vivo专用于动物体内转染，可直接转染DNA或者RNA到动物体内进行： ● 基因治疗的动物体内研究 ● RNA干扰的动物体内研究 ● 蛋白功能的动物体内研究
阅读更多 »RNA转染与髓源性抑制细胞的抑制潜能研究
髓系来源的抑制性细胞（MDSC）介导了广泛而深刻的免疫抑制，特别是对T细胞功能的影响。在小鼠中，MDSC的特征是细胞表面分子Gr1(包括巨噬细胞和中性粒细胞标志物Ly6C和Ly6G)和CD11b的表达；在人类中，MDSC通常是CD11b+CD33+HLA-DR2。小鼠CD11b+Gr1+细胞群由两个亚群组 …
阅读更多 »体内转染与HO-1在过敏性哮喘模型小鼠中的作用研究
过敏性哮喘通常被认为是一种以嗜酸细胞炎症为特征的Th2免疫反应。最近的调查显示，Th17细胞在非嗜酸细胞性哮喘（NEA）的发病机制中起重要作用，可导致激素抵抗中性粒细胞性气道炎症。血红素氧合酶-1（HO-1）具有抗炎、抗氧化和抗凋亡作用。然而，它的作用在NEA仍不清楚。先分享一篇运用体内转染siRNA方法（Entranster）研究HO-1在过敏性哮喘模型小 …
阅读更多 »慢病毒倍比稀释测定活性的实验中，DAY2天时，把稀释好的病毒和细胞孵育过夜时，用把细胞原培养基吸取出去吗，还是直接把病毒液添加进去？
好问题！在进行 慢病毒倍比稀释测定病毒滴度（titer） 的时候，DAY2 加入病毒时是否更换培养基，确实是一个关键点，对感染效率有一定影响。下面是两种常见操作方式，以及推荐做法： 推荐操作：先吸掉培养基，再加病毒（常规做法） 流程简述（以DAY2为节点）： DAY1：铺板细胞（如293T、HEK293，常用于测滴度）； DAY2：感染操作 吸掉旧培养基； …
阅读更多 »慢病毒浓缩纯化的方法有哪些？
慢病毒纯化工艺，依据其纯化原理主要分为超速离心、密度梯度离心、PEG离心、超滤、切向流、离子交换层析等方法。当前主要的慢病毒纯化均是由上述中的一种或几种方法组合在一起完成。 对于大部分的细胞感染以及普通的动物实验来说，推荐使用超速离心方法对慢病毒进行浓缩。超滤过程中留下的细胞碎片会导致细胞毒性，直接影响病毒的应用。 病毒上清/粗纯病毒 科研级慢病毒 科研 …
阅读更多 »怎样提高悬浮细胞的siRNA转染效率？
悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。 目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成 …
阅读更多 »Journal of Cellular Physiology | 西北工业大学生命科学院报道：治疗骨质疏松症新机制
该团队在《Journal of Cellular Physiology 》期刊上发表了题为“A novel long noncoding RNA AK016739 inhibits osteoblast differentiation and bone formation”论文。文章通过RNA体内转染（EntransterTM-in vivo, …
阅读更多 »CCK8能否检测细菌细胞？
CCK8试剂盒可以检测E.coli，但不能检测酵母细胞。向100μl E.coli 培养液中加入10μl CCK8 溶液，并培养1-4 个小时或过夜。 如需了解更多关于CCK8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »如何优化细胞RNA转染实验条件？
可从以下几方面进行优化： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与SIRT3基因和非酒精性脂肪肝病研究
作为一种正在全世界蔓延的慢性复杂性疾病，非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）发病率在全球范围内的攀升迅速，被称为“下一场即将到来的世界性疾病大流行”。NAFLD有发展为肝硬化甚至肝癌的风险，对人类健康造成严重威胁。 Sirtuins是一类NAD＋依赖的去乙酰化酶。SIRT3是该家族 …
阅读更多 »