DNA转染效率低的原因可从以下几方面找: 1.质粒DNA或混和液中含有血清。 对策:用无血清培养基或Opti-MEM培养基。 2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优 对策:对大多数细胞而言,质粒DNA和转染试剂的比例为1:2-1:3,一般要做优化实验,比例从1:0.5-1:5 逐一检测。 3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好 对策:用好的质粒纯化试剂确保质 …
阅读更多 »DNA转染与促红细胞生成素在软刺裸鲤适应低氧中的作用研究
促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)是一种糖蛋白激素,在红细胞生成中起着重要的调节作用,并启动应对环境挑战的细胞稳态反应。青藏高原是缺氧适应的天然实验室。软刺裸鲤(Gymnocypris dobula)是一种高度专业化的高原裂胸鱼,隶属于青藏高原海拔大于4500米的高海拔淡水河和池塘。但EPO在裂腹鱼适应低氧中的作用尚不清楚。现分享一篇DN …
阅读更多 »细胞DNA转染实验步骤
下面以Entranster-H4000,DNA转染试剂为例,简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞密度在60%左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。 注意:无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …
阅读更多 »DNA转染(entranster)与MYC相互作用蛋白-锌指因子ZNF121和上皮细胞增殖研究
MYC是一种强有力的癌基因蛋白,调节多种细胞过程,包括增殖、凋亡、分化、干细胞特性、衰老和迁移。MYC主要作为转录因子发挥作用,与大量蛋白质相互作用,MYC相互作用蛋白的鉴定和对于理解MYC功能是非常重要的。现分享一篇DNA转染(entranster)与MYC相互作用蛋白-锌指因子ZNF121和上皮细胞增殖研究的文献,以供参考。
阅读更多 »质粒DNA转染实验效率影响因素
1, 质粒的构建:启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响,但是对转染结果却有着微妙的影响。 2, 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与微管蛋白多翻译后修饰的蛋白质组学分析和功能表征研究
微管蛋白已知会有独特的翻译后修饰(PTMS),如脱酪氨酸和聚谷氨酰化,特别是在非结构化羧基末端尾(CTTS)中。然而,更多传统的微管蛋白的PTMS及其在微管性质和功能的调节中的作用仍然不明确。现分享一篇DNA转染(Entranster)与微管蛋白多翻译后修饰的蛋白质组学分析和功能表征研究的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染与中国冠鸭冠垫胚胎形态观察及hoxc8基因表达研究
中国冠鸭(凤头鸭)最近又出现在中国。除了白色的羽毛和黑色的嘴和脚之外,凤头鸭还有很高的羽毛冠。该品种可用于观赏或作为模式生物;然而,对其独特形态特征的遗传基础和发育知之甚少。现分享一篇DNA转染(entranster)与中国冠鸭冠垫胚胎形态观察及hoxc8基因表达研究的文献,以供参考 …
阅读更多 »细胞DNA转染实验影响因素
1.细胞密度 一般来说,当细胞密度达到60%~80%时进行转染可以取得较高的转染效率,过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态 这点非常关键,很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此,为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性,应尽量使用适度传代的细胞系,并在不同次实验时保持细胞传代次数的一致性。 还有,尽量选择无 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与镰刀菌细胞毒性研究
在自然界中,微生物镰刀菌病原体普遍侵入宿主植物、动物和人类,并且共生次生代谢物真菌毒素。除农业经济损失外,以脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)为例,这些物质通常是对食品安全、动物和人类健康带来严重威胁。虽然全世界对食品中DON阈值的许多规定都是严格立法的,但DON对婴儿、青年和老年人群的毒性和安全限度仍存在相当大的争议,这实际上是由于对DON毒 …
阅读更多 »调节性T细胞编程促进神经再生
标题 Programming of Regulatory T Cells In Situ for Nerve Regeneration and Long-Term Patency of Vascular Grafts (通过原位编程调节性T细胞促进神经再生与血管移植物的长期通畅性) 影响因子 该研究发表于 Research 期刊,2022年影响因子约为 11 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享