英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是世界范围内最常见的肝脏疾病之一，它由单纯性脂肪变性发展为炎性非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，在某些情况下甚至发展为肝硬化或肝细胞癌。NAFLD与2型糖尿病（T2DM）相关。在NAFLD中，肝脏发生过量脂质合成（ELS），主要包括新的脂肪生成和三酰甘油（TG）以及极低密度脂 …
阅读更多 »DNA转染效率低的可能的原因有哪些？
1.准备不足 做细胞转染的时候，在开展正式实验前要多做预试验，优化转染条件。优化转染条件包括：转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。 2.细胞污染 细胞污染也是造成细胞死亡，转染效率低下的一大原因。首先，转染细胞用的质粒必须保证无菌。而现在市场上的一般的质粒提取试剂盒都做不到绝对无菌。分享一个小秘诀：将提完质粒后或者提的最后一步 …
阅读更多 »DNA转染实验中的关键点
1）优化条件：质粒不同，所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外，可选用更合适的转染试剂，如Entranster试剂。 2）抑制剂：不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素，EDTA，柠檬酸盐，磷酸盐，RPMI，硫酸软骨素，透明质酸，硫酸葡聚糖或其他硫酸 …
阅读更多 »DNA转染与基于de novo设计蛋白DS119的TNFa结合蛋白合理设计研究
蛋白质-蛋白质相互作用的合理设计是创造新型蛋白质药物、诊断探针或调节细胞信号通路的有力工具。SH3和PDZ结构域等小型模块化支架在调节蛋白质相互作用中起着重要作用，因此这些结构域在蛋白质设计中的应用已被广泛研究。De novo蛋白质设计为工程定制蛋白质功能提供模板，为合成生物学研究提供正交蛋白质相互作用网络。已经开发出各种计算方法来引入已知蛋白 …
阅读更多 »细胞DNA转染实验步骤
下面以Entranster-H4000，DNA转染试剂为例，简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞密度在60％左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释，充分混匀，制成DNA稀释液。 注意：无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …
阅读更多 »DNA转染与RAB31沉默对骨肉瘤细胞增殖和迁徙影响研究
骨肉瘤（Osteosarcoma，OS）是人类原发性恶性骨肿瘤中最常见的一种类型，具有远距离侵袭和局部侵袭的潜在倾向。OS主要见于青少年儿童，首次发病多为15-19岁。骨肉瘤是一种侵袭性恶性肿瘤，起源于间充质（因而是肉瘤）的原始转化细胞，表现为成骨细胞分化和产生恶性骨样。现分享一篇DNA转染（entranster）与RAB31沉默对骨肉瘤细胞 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与5-羟色胺和非酒精性脂肪性肝病研究
非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是世界范围内最常见的肝脏疾病之一，它由单纯性脂肪变性发展为炎性非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，在某些情况下甚至发展为肝硬化或肝细胞癌。NAFLD与2型糖尿病（T2DM）相关。在NAFLD中，肝脏发生过量脂质合成（ELS），主要包括新的脂肪生成和三酰甘油（TG）以及极低密度脂蛋白（VLDL）的合成，导致脂质积聚 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与抗病毒天然免疫研究
天然免疫是保护宿主细胞免受微生物感染的第一道屏障。TANK结合激酶1（TBK1）介导的I型干扰素（IFN）诱导在宿主抗病毒反应及免疫平衡方面起着至关重要的作用。现分享一篇运用DNA转染（Entranster-H4000）研究抗病毒天然免疫的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与三疣梭子蟹CacyBP基因的克隆研究
三疣梭子蟹是一种重要的商业蟹类，广泛分布于韩国、日本、中国、南洋和印度洋。虽然这种海蟹能够在不同的盐度条件下生存，但不同的盐度条件可能影响其分布和迁移途径。盐度也是影响梭子蟹人工繁殖的一个重要因素，特别是在幼虫发育和蜕皮阶段。因此，研究三疣梭子蟹耐受环境盐度变化的遗传机制，有利于蟹类的人工繁殖。现分享一篇DNA转染（Entranster）与三疣梭子蟹钙中周期 …
阅读更多 »DNA转染（entranster）与基因载体的膜亲和力研究
在基因治疗中，核酸的有效转染依赖于基因载体的作用。这些载体保护核酸免受人体循环系统中核酸酶的降解，并将遗传物质作为治疗疾病的基因药物导入靶细胞。 一个有效的基因载体应该能够压缩目标基因，将其导入所需的宿主细胞，释放遗传物质，并使其与基因组结合。在基因转染过程中，基因载体对细胞膜的亲和力是与其转染效率密切相关的一个关键参数。 现分享一篇DNA转 …
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