由此可见,Entranster-H4000具有更好的转染效果。
阅读更多 »DNA转染与干细胞自我更新和多能性维持的研究
干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的原始细胞,包括胚胎干细胞、成体干细胞和诱导多能干细胞(IPS)。干细胞具有非常重要的理论研究意义和临床应用价值。利用胚胎干细胞建立多种细胞类型的体外分化系统,使人们能够在细胞和分子水平上研究哺乳动物的发育过程;不同发育阶段的细胞可确定胚胎发育和细胞分化的分子机制 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与菱形蛋白酶RHBDD1诱导蛋白水解靶点研究
在过去的几十年中,研究发现,调节性膜内蛋白水解(RIP)在各种细胞过程中起着重要的作用,包括细胞信号转导、基因转录和凋亡。调节性膜内蛋白水解是蛋白酶在其跨膜区域内切割底物的过程。已鉴定出三种主要的膜内蛋白酶家族,包括金属蛋白酶型S2P家族、C-分泌酶和信号肽肽酶家族和菱形蛋白酶。现分享一篇DNA转染(Entranster)与菱形蛋白酶RHBDD1诱导蛋白水解 …
阅读更多 »细胞DNA转染实验步骤
下面以Entranster-H4000,DNA转染试剂为例,简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞密度在60%左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。 注意:无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …
阅读更多 »RNA转染实验的影响因素
1. 转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大小不同,转染条件不同,所需的试剂也应不同,所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster试剂. 2. &n …
阅读更多 »DNA转染与核受体Nur77和脂肪酸氧化及黑色素瘤细胞研究
脂肪酸氧化(FAO)是细胞获得ATP和NADPH来克服代谢应激的关键。然而,脂肪酸氧化(FAO)在肿瘤中调节的机制仍不清楚。现分享一篇DNA转染(Entranster)与核受体Nur77和脂肪酸氧化及黑色素瘤细胞研究的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染(entranster)与MYC相互作用蛋白-锌指因子ZNF121和上皮细胞增殖研究
MYC是一种强有力的癌基因蛋白,调节多种细胞过程,包括增殖、凋亡、分化、干细胞特性、衰老和迁移。MYC主要作为转录因子发挥作用,与大量蛋白质相互作用,MYC相互作用蛋白的鉴定和对于理解MYC功能是非常重要的。现分享一篇DNA转染(entranster)与MYC相互作用蛋白-锌指因子ZNF121和上皮细胞增殖研究的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染效率影响因素
细胞DNA转染效率的影响因素 1.细胞密度 一般来说,当细胞密度达到60%~80%时进行转染可以取得较高的转染效率,过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态 这点非常关键,很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此,为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性,应尽量使用适度传代的细胞系,并在不同次实验时保持细胞传代次数的 …
阅读更多 »DNA转染效率低的可能的原因有哪些?
1.准备不足 做细胞转染的时候,在开展正式实验前要多做预试验,优化转染条件。优化转染条件包括:转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。 2.细胞污染 细胞污染也是造成细胞死亡,转染效率低下的一大原因。首先,转染细胞用的质粒必须保证无菌。而现在市场上的一般的质粒提取试剂盒都做不到绝对无菌。分享一个小秘诀:将提完质粒后或者提的最后一步 …
阅读更多 »如何做好DNA细胞转染实验?
我认为,要想做好质粒DNA细胞转染实验,应注意以下几点: 1, 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多,特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟,相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大,又没有经验,选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功 …
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