英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
动脉粥样硬化（AS）是各种心脑血管疾病的主要病因，发病率和死亡率都很高。氧化应激诱导内皮细胞功能障碍是动脉粥样硬化的病理基础。此外，鞘磷脂和Wnt/β-连环素信号通路被认为与AS密切相关，但具体机制尚不清楚。 现分享一篇DNA转染（Entranster）与鞘磷脂合成酶2和H2O2诱导的内皮功能障碍研究的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染效率影响因素
细胞DNA转染效率的影响因素 1.细胞密度 一般来说，当细胞密度达到60%～80%时进行转染可以取得较高的转染效率，过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态 这点非常关键，很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此，为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性，应尽量使用适度传代的细胞系，并在不同次实验时保持细胞传代次数的 …
阅读更多 »DNA转染效率低的可能的原因有哪些？
1.准备不足 做细胞转染的时候，在开展正式实验前要多做预试验，优化转染条件。优化转染条件包括：转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。 2.细胞污染 细胞污染也是造成细胞死亡，转染效率低下的一大原因。首先，转染细胞用的质粒必须保证无菌。而现在市场上的一般的质粒提取试剂盒都做不到绝对无菌。分享一个小秘诀：将提完质粒后或者提的最后一步 …
阅读更多 »细胞DNA转染注意事项
1）优化条件：质粒不同，所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外，可选用更合适的转染试剂，如Entranster试剂。 2）抑制剂：不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素，EDTA，柠檬酸盐，磷酸盐，RPMI，硫酸软骨素，透明质酸，硫酸葡聚糖或其他硫酸 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与微管蛋白多翻译后修饰的蛋白质组学分析和功能表征研究
微管蛋白已知会有独特的翻译后修饰（PTMS），如脱酪氨酸和聚谷氨酰化，特别是在非结构化羧基末端尾（CTTS）中。然而，更多传统的微管蛋白的PTMS及其在微管性质和功能的调节中的作用仍然不明确。现分享一篇DNA转染（Entranster）与微管蛋白多翻译后修饰的蛋白质组学分析和功能表征研究的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与线粒体介导的先天性免疫反应研究
宿主细胞的模式识别受体可以检测到微生物感染进而诱导先天免疫反应以激活宿主防御系统对抗入侵微生物，现分享一篇DNA转染（Entranster-H4000）与线粒体介导的先天性免疫反应研究的文献，指出果蝇zeste基因增强子同源物2（EZH2）是抗病毒天然免疫反应的负调节因子和抗病毒药物的新靶点。
阅读更多 »DNA转染与Cep70与γ-微管蛋白和有丝分裂纺锤体组装研究
有丝分裂纺锤体的解除与基因组不稳定性有关，这是肿瘤发生和恶性转化的一个重要方面。为了保证染色体传递的准确性，有丝分裂纺锤体由精细的机制组装，并由动物细胞中的着丝粒组织配制。尤其是，中心体蛋白被认为协同作用以确保准确的纺锤体形成，但分子细节仍有待研究。现分享一篇DNA转染（Entranster）与Cep70与γ-微管蛋白相互作用在有丝分裂纺锤体组装中作用的研究 …
阅读更多 »如何做好DNA细胞转染实验？
我认为，要想做好质粒DNA细胞转染实验，应注意以下几点： 1， 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大，又没有经验，选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功 …
阅读更多 »细胞DNA转染效率低的原因
DNA转染效率低的原因可从以下几方面找： 1.质粒DNA或混和液中含有血清。 对策：用无血清培养基或Opti-MEM培养基。 2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优 对策：对大多数细胞而言，质粒DNA和转染试剂的比例为1:2-1:3，一般要做优化实验，比例从1:0.5-1:5 逐一检测。 3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好 对策：用好的质粒纯化试剂确保质 …
阅读更多 »DNA转染（entranster）与基因载体的膜亲和力研究
在基因治疗中，核酸的有效转染依赖于基因载体的作用。这些载体保护核酸免受人体循环系统中核酸酶的降解，并将遗传物质作为治疗疾病的基因药物导入靶细胞。 一个有效的基因载体应该能够压缩目标基因，将其导入所需的宿主细胞，释放遗传物质，并使其与基因组结合。在基因转染过程中，基因载体对细胞膜的亲和力是与其转染效率密切相关的一个关键参数。 现分享一篇DNA转 …
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