DNA转染

质粒的构建：启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响，但是对转染结果却有着微妙的影响。 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如 …

1）优化条件：质粒不同，所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外，可选用更合适的转染试剂，如Entranster试剂。 2）抑制剂：不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素，EDTA，柠檬酸盐，磷酸盐，RPMI，硫酸软骨素，透明质酸，硫酸葡聚糖或其他硫酸 …

我认为，要想做好质粒DNA细胞转染实验，应注意以下几点： 1， 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大，又没有经验，选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功几 …

DNA转染效率低的原因可从以下几方面找： 1.质粒DNA或混和液中含有血清。 对策：用无血清培养基或Opti-MEM培养基。 2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优 对策：对大多数细胞而言，质粒DNA和转染试剂的比例为1:2-1:3，一般要做优化实验，比例从1:0.5-1:5 逐一检测。 3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好 对策：用好的质粒纯化试剂确保质 …

     天然免疫是保护宿主细胞免受微生物感染的第一道屏障。TANK结合激酶1（TBK1）介导的I型干扰素（IFN）诱导在宿主抗病毒反应及免疫平衡方面起着至关重要的作用。现分享一篇运用DNA转染（Entranster-H4000）研究抗病毒天然免疫的文献，以供参考。

下面以Entranster-H4000，DNA转染试剂为例，简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞密度在60％左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释，充分混匀，制成DNA稀释液。 注意：无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …

脂肪酸氧化（FAO）是细胞获得ATP和NADPH来克服代谢应激的关键。然而，脂肪酸氧化（FAO）在肿瘤中调节的机制仍不清楚。现分享一篇DNA转染（Entranster）与核受体Nur77和脂肪酸氧化及黑色素瘤细胞研究的文献，以供参考。

促红细胞生成素（Erythropoietin，EPO）是一种糖蛋白激素，在红细胞生成中起着重要的调节作用，并启动应对环境挑战的细胞稳态反应。青藏高原是缺氧适应的天然实验室。软刺裸鲤（Gymnocypris dobula）是一种高度专业化的高原裂胸鱼，隶属于青藏高原海拔大于4500米的高海拔淡水河和池塘。但EPO在裂腹鱼适应低氧中的作用尚不清楚。现分享一篇DN …

首先siRNA由于只有二十几个碱基对，相比DNA几千上万对碱基，小了许多。目前大多数转染试剂都针对比较大的质粒DNA，而非小的RNA分子。用于转染DNA的转染试剂和方法并不完全适用于转染siRNA。其次，siRNA转染比DNA转染对转染试剂细胞毒性的要求严格。由于转染试剂对细胞的毒性往往是对众多基因直接地或间接地上调或下调的结果，这对于过量表达的DNA转染来 …

肺癌是最常见的恶性肿瘤，血管生成-2（Ang-2）升高，具有高转移率。然而，关于Ang-2促进肺癌细胞增殖和转移的机制仍不清楚。现分享一篇DNA转染（Entranster）与血管生成素-2和肺癌转移研究的文献，以供参考。