英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
标题 Programming of Regulatory T Cells In Situ for Nerve Regeneration and Long-Term Patency of Vascular Grafts （通过原位编程调节性T细胞促进神经再生与血管移植物的长期通畅性） 影响因子 该研究发表于 Research 期刊，2022年影响因子约为 11 …
阅读更多 »DNA转染与促红细胞生成素在软刺裸鲤适应低氧中的作用研究
促红细胞生成素（Erythropoietin，EPO）是一种糖蛋白激素，在红细胞生成中起着重要的调节作用，并启动应对环境挑战的细胞稳态反应。青藏高原是缺氧适应的天然实验室。软刺裸鲤（Gymnocypris dobula）是一种高度专业化的高原裂胸鱼，隶属于青藏高原海拔大于4500米的高海拔淡水河和池塘。但EPO在裂腹鱼适应低氧中的作用尚不清楚。现分享一篇DN …
阅读更多 »DNA转染效率低的可能的原因有哪些？
1.准备不足 做细胞转染的时候，在开展正式实验前要多做预试验，优化转染条件。优化转染条件包括：转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。 2.细胞污染 细胞污染也是造成细胞死亡，转染效率低下的一大原因。首先，转染细胞用的质粒必须保证无菌。而现在市场上的一般的质粒提取试剂盒都做不到绝对无菌。分享一个小秘诀：将提完质粒后或者提的最后一步 …
阅读更多 »近红外光激活的CRISPR/Cas13d用于深层组织RNA编辑及骨科治疗
文章标题 《通过上转换纳米颗粒实现光激活CRISPR/Cas13d用于深层组织RNA工程和骨科治疗》 英文标题：*Photoactivatable CRISPR/Cas13d via upconversion nanoparticles for deep tissue RNA engineering and orthopedic therapy* 期刊与影响 …
阅读更多 »DNA转染与核受体Nur77和脂肪酸氧化及黑色素瘤细胞研究
脂肪酸氧化（FAO）是细胞获得ATP和NADPH来克服代谢应激的关键。然而，脂肪酸氧化（FAO）在肿瘤中调节的机制仍不清楚。现分享一篇DNA转染（Entranster）与核受体Nur77和脂肪酸氧化及黑色素瘤细胞研究的文献，以供参考。
阅读更多 »FoxO1调控机制揭示骨质疏松治疗靶点
文献标题 《FoxO1 Responses to Chronic Oxidative Stress to Participate in Age-Related Osteoporosis by Depriving β-Catenin From TCF7》 （FoxO1通过从TCF7中剥夺β-Catenin参与年龄相关性骨质疏松症的反应机制） 影响因子 期刊为 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与谷胱甘肽过氧化物酶4抗炎作用研究
抗氧化酶，谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4），可通过消除花生四烯酸（AA）代谢网络产生的氧化物质来解决炎症问题。上调其活性已被认为是一种有前途的炎症干预策略。现分享一篇DNA转染（Entranster）与谷胱甘肽过氧化物酶4抗炎作用研究的文献，旨在研究GPX4激活剂对AA代谢网络和炎症相关通路的影响。
阅读更多 »瞬时转染后，划痕实验的最佳时间
瞬时转染后，划痕实验的最佳时间取决于几个因素，包括转染效率、基因表达时机以及细胞状态。一般来说，常见的策略如下： 1. 24 小时后划痕（常规选择） 绝大多数瞬时转染的基因在 24 小时左右开始有较高的表达水平，因此转染 24 小时后划痕是一个常见的选择。 这个时间点可以确保大部分细胞已成功表达外源基因，同时细胞仍然具有良好的活力，不会因过度表达导致过早凋亡 …
阅读更多 »客户：做293T细胞转染，遇到了单转质粒过表达没有共转质粒过表达高是怎么回事？
回答： 1. 启动子竞争与转录因子的“稀释” 如果你在共转染中加入的是一个非表达质粒（载体骨架）或特定的辅助质粒，目标表达量反而增高，可能是因为单转染时目标质粒浓度过高，导致细胞内的转录因子被“过度征用”或者触发了细胞的应激机制。 适当的质粒比例：有时候少量的质粒反而能获得更稳定的转录效率，避免了转录机器的饱和。 2. 辅因子或辅助蛋白的协同作用（核心原因） …
阅读更多 »质粒DNA转染注意事项
1.启动子的选择启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响，但是对转染结果却有着微妙的影响。2.质粒的大小和质量线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒 …
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