在过去的几十年中,研究发现,调节性膜内蛋白水解(RIP)在各种细胞过程中起着重要的作用,包括细胞信号转导、基因转录和凋亡。调节性膜内蛋白水解是蛋白酶在其跨膜区域内切割底物的过程。已鉴定出三种主要的膜内蛋白酶家族,包括金属蛋白酶型S2P家族、C-分泌酶和信号肽肽酶家族和菱形蛋白酶。现分享一篇DNA转染(En …
阅读更多 »细胞DNA转染效率低的原因
DNA转染效率低的原因可从以下几方面找: 1.质粒DNA或混和液中含有血清。 对策:用无血清培养基或Opti-MEM培养基。 2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优 对策:对大多数细胞而言,质粒DNA和转染试剂的比例为1:2-1:3,一般要做优化实验,比例从1:0.5-1:5 逐一检测。 3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好 对策:用好的质粒纯化试剂确保质 …
阅读更多 »细胞DNA转染实验影响因素
1.细胞密度 一般来说,当细胞密度达到60%~80%时进行转染可以取得较高的转染效率,过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态 这点非常关键,很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此,为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性,应尽量使用适度传代的细胞系,并在不同次实验时保持细胞传代次数的一致性。 还有,尽量选择无 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与多梳抑制复合物2(PRC2)和肿瘤研究
多梳抑制复合物2(PRC2),可对H3K27三甲基化(H3K27me3),是肿瘤发生发展的一部分,和/或维持成人组织特异性。PRC2癌症中的关键作用使它成为表观遗传学癌症治疗的治疗靶点。现分享一篇DNA转染(Entranster-H4000)与多梳抑制复合物2(PRC2)和肿瘤研究的文献,以供参考。 文献地址:https://www.engre …
阅读更多 »DNA转染效率影响因素
细胞DNA转染效率的影响因素 1.细胞密度 一般来说,当细胞密度达到60%~80%时进行转染可以取得较高的转染效率,过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态 这点非常关键,很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此,为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性,应尽量使用适度传代的细胞系,并在不同次实验时保持细胞传代次数的 …
阅读更多 »细胞DNA转染实验步骤
下面以Entranster-H4000,DNA转染试剂为例,简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞密度在60%左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。 注意:无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与ZNF121和乳腺上皮细胞的靶基因调控研究
新型锌指蛋白121(ZNF121)已被证明在物理和功能上与MYC癌蛋白相关联,以调节细胞增殖和可能的乳腺癌发展。为了进一步了解ZnF121在细胞增殖和癌变过程中的作用,现分享一篇DNA转染(Entranster)与ZNF121和乳腺上皮细胞的靶基因调控研究的文献,以供参考。
阅读更多 »细胞DNA转染注意事项
1)优化条件:质粒不同,所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外,可选用更合适的转染试剂,如Entranster试剂。 2)抑制剂:不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素,EDTA,柠檬酸盐,磷酸盐,RPMI,硫酸软骨素,透明质酸,硫酸葡聚糖或其他硫酸 …
阅读更多 »体内DNA转染(Entranster)与实验性脑出血大鼠继发性脑损伤神经保护作用研究
脑内出血(Intracerebral hemorrhage,ICH)是一种常见的致命型的,具有高发病率和死亡率的中风,这往往会导致长期的神经功能障碍。除了通过直接机械损伤引起的出血性原发性脑损伤,脑出血还会导致继发性脑损伤(SBI),这已被证明会导致神经功能恶化。现分享一篇体内DNA转染(Entranster)与实验性脑出血大鼠继发性脑损伤神经保护作用研究的 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与巨噬细胞抗炎作用研究
巨噬细胞(macrophage)活化是宿主防御病原微生物的关键过程,可引起炎症级联反应和炎症介质的释放,如TNF-α、IL-6和NO。反过来这些介质会引起炎症反应以及对邻近组织和巨噬细胞本身产生伤害。现分享一篇DNA转染(Entranster)与巨噬细胞抗炎作用研究的文献,以供参考。
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