英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
进行2个不同基因的siRNA共转染时，确实可能需要调整核酸或者转染试剂的剂量，但和质粒共转染的情况有一些区别。 转染试剂的剂量： 当你进行siRNA共转染时，转染试剂的剂量通常依赖于转染效率。对于siRNA来说，一般情况下转染试剂的量不需要比单一siRNA转染时增加太多，因为转染试剂的作用主要是包裹和传递siRNA到细胞内，只要达到足够的转染效率就可以。如果 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与人结直肠癌细胞通路研究
瓜蒌提取物具有多种药用功能。最近，有报道称从瓜蒌中分离的一种丝氨酸蛋白酶TKP可以通过诱导细胞凋亡从而抑制人结直肠癌细胞的增殖。现分享一篇DNA转染（Entranster）与人结直肠癌细胞通路研究的文献，文献中研究了TKP对于大肠腺癌细胞上皮间质转化（EMT）的影响。
阅读更多 »树鼩CRISPR筛选发现RNF6促进寨卡病毒跨越血脑屏障
标题: Tree Shrew Genome-Wide CRISPR Screen Identifies RNF6 as a Proviral Host Factor for Zika Virus Replication in Brain Microvascular Endothelial Cells （树鼩全基因组CRISPR筛选鉴定出RNF6是寨卡病毒在脑 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与多梳抑制复合物2（PRC2）和肿瘤研究
多梳抑制复合物2（PRC2），可对H3K27三甲基化（H3K27me3），是肿瘤发生发展的一部分，和/或维持成人组织特异性。PRC2癌症中的关键作用使它成为表观遗传学癌症治疗的治疗靶点。现分享一篇DNA转染（Entranster）与多梳抑制复合物2（PRC2）和肿瘤研究的文献，以供参考。
阅读更多 »细胞DNA转染实验步骤
下面以Entranster-H4000，DNA转染试剂为例，简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞密度在60％左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释，充分混匀，制成DNA稀释液。 注意：无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …
阅读更多 »DNA转染与bom-mir-2805在上调家蚕纤维蛋白轻链基因的表达研究
家蚕是世界上最重要的经济昆虫，也是鳞翅目重要的模式生物。家蚕丝腺是一种高度特异性，具有高效合成丝蛋白能力的特殊器官。丝蛋白主要由丝素和丝氨酸组成。丝素基因的表达主要在转录水平上受到时间和空间调控，表现为表达抑制模式。研究表明家蚕miRNAs参与丝蛋白基因的表达调控。另外，家蚕丝腺特异性转录因子（Tfs）如丝腺因子（SGF，包括SGF-1、SGF- …
阅读更多 »DNA转染与RAB31沉默对骨肉瘤细胞增殖和迁徙影响研究
骨肉瘤（Osteosarcoma，OS）是人类原发性恶性骨肿瘤中最常见的一种类型，具有远距离侵袭和局部侵袭的潜在倾向。OS主要见于青少年儿童，首次发病多为15-19岁。骨肉瘤是一种侵袭性恶性肿瘤，起源于间充质（因而是肉瘤）的原始转化细胞，表现为成骨细胞分化和产生恶性骨样。现分享一篇DNA转染（entranster）与RAB31沉默对骨肉瘤细胞 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与线粒体介导的先天性免疫反应研究
宿主细胞的模式识别受体可以检测到微生物感染进而诱导先天免疫反应以激活宿主防御系统对抗入侵微生物，现分享一篇DNA转染（Entranster-H4000）与线粒体介导的先天性免疫反应研究的文献，指出果蝇zeste基因增强子同源物2（EZH2）是抗病毒天然免疫反应的负调节因子和抗病毒药物的新靶点。
阅读更多 »RNA转染实验的影响因素
1. 转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的，而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染，因RNA与DNA大小不同，转染条件不同，所需的试剂也应不同，所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster试剂. 2. &n …
阅读更多 »质粒DNA细胞转染注意事项
质粒的构建：启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响，但是对转染结果却有着微妙的影响。 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如 …
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