2025年 12 月 14日, 星期日
新闻

病毒感染增强

什么是腺病毒载体?

腺病毒属于腺病毒科,分为两个属:禽腺病毒属(鸟腺病毒)和哺乳动物腺病毒属(人、猴、牛、马、猪、羊、犬和负鼠腺病毒)。这些病毒均携带一个线性双链DNA 基因组,由直径为70~100mm 的二十面体衣壳蛋白包裹。约36kb 的基因组包括4 个提供调控和复制功能的早期转录单位(El 、E2 、E3 、E4) 、2 个延迟早期单位(IX 和IVa2)和1 个指导包括 …

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提高慢病毒感染细胞效率的方法

可使用病毒感染增强剂envirus提高病毒的感染效率,下面以慢病毒为例,说一下实验过程。 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 2.感染 ⑴将2ul的Envirus-LV用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成Envirus-LV稀释液。4℃静置5分钟。 …

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在慢病毒滴度测定的倍比稀释实验中,为什么计算滴度时好像没用上复孔?

通常,在计算滴度时,我们会选取某个稀释度的特定数据(如阳性细胞数),但这个数据往往是复孔的平均值,或者用于确认某个稀释度的数据是否可靠。因此,虽然计算公式中可能未直接体现复孔的作用,但复孔实际上已经在前期数据处理中起到了关键作用。 总结:复孔的作用是提高数据的稳定性和准确性,即使计算滴度时没有直接体现,实际上已经通过平均值计算、异常值排除等方式间接影响了最终 …

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用AAV进行大脑转染的需要知道的问题

使用腺相关病毒(AAV)进行大脑转染是一种常用的基因传递方法,具有较高的特异性和安全性,但在实际操作中也会面临一些问题。以下是一些常见的问题及其解决方案: 转染效率问题: 选择合适的AAV血清型:不同的AAV血清型对不同类型的神经元和大脑区域具有不同的亲和力。选择合适的血清型可以显著提高转染效率。 病毒滴度:确保使用足够高滴度的AAV病毒,但要避免过高的滴度 …

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病毒转染原理及步骤

病毒转染原理及步骤   在细胞相关的实验操作中,对于一些按常规方法难以转染甚至无法转染的细胞,通过病毒介导的实验能够大大提高基因的转导效率,以达到目的基因的高效瞬时表达。   病毒转染包括以下步骤:1构建载体 2包装提纯病毒 3感染靶细胞。以慢病毒为例。 慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础发展起 …

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如何使动物体内病毒感染效率提高20-50倍

由于动物体内环境的复杂性,我们在选择动物体内病毒感染试剂时,会区别于细胞实验。通常为避免动物产生过激的免疫反应或者死亡,这类病毒感染试剂纯度会更高些,并且适配体液环境。因此,争对动物体内病毒感染实验,则需要适配特定的动物体内病毒感染增强试剂。 发表在《aging》上的一篇题为“Ubenimex induces autophagy inhibition and …

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慢病毒感染贴壁细胞实验方法

1.提前一天细胞铺板 提前一天种植细胞,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 感染实验 ⑴将EnvirusTM-LV用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成增强剂稀释液。 ⑵将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成病毒稀释液。 注:由于病毒浓度情况不同,具体病毒浓缩液用量酌情依据 …

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如何选择慢病毒和腺病毒系统?

慢病毒载体系统和腺病毒载体系统比较 病毒表达系统 慢病毒表达系统(Lentivirus) 腺病毒表达系统(Adenovirus) 病毒基因组 RNA病毒 双链DNA病毒 复制 自主复制 自主复制 是否整合 病毒基因组整合于宿主基因组,长时间、稳定表达外源基因 病毒基因组游离于宿主基因组外,瞬时表达外源基因 感染细胞类型 感染分裂和不分裂细胞,适用于难转染的原 …

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