2026年 3 月 18日, 星期三
新闻

病毒感染增强

AAV载体中启动子和特殊原件的含义是什么?

hsyn:神经元特异启动子; GFAP:星形胶质细胞特异启动子; Ubiquitin:一种常用的组成型启动子。 IRES:内部核酶进入位点,起到连接两个基因,在一个启动子驱动下转录的作用。IRES连接的两个基因不会融合表达,IRES的RNA可以招募核糖体,翻译下游基因,但是IRES是一种再招募的过程,其后基因的mRNA的翻译量低于自身mRNA的数量,所以表达 …

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什么是腺病毒载体?

腺病毒属于腺病毒科,分为两个属:禽腺病毒属(鸟腺病毒)和哺乳动物腺病毒属(人、猴、牛、马、猪、羊、犬和负鼠腺病毒)。这些病毒均携带一个线性双链DNA 基因组,由直径为70~100mm 的二十面体衣壳蛋白包裹。约36kb 的基因组包括4 个提供调控和复制功能的早期转录单位(El 、E2 、E3 、E4) 、2 个延迟早期单位(IX 和IVa2)和1 个指导包括 …

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慢病毒感染后72小时,效率低,细胞已经长满,有什么办法补救?

在慢病毒感染后72小时感染效率较低、细胞已经长满的情况下,可以尝试以下几个措施来提高感染效率并优化实验条件: 细胞传代或重新播种:如果细胞已经长满(汇合度较高),可能会影响慢病毒的感染效率。可以将细胞进行传代,重新播种在新的培养板上,使其达到较低的汇合度(例如30-50%),然后再进行感染。 优化感染时的MOI(Multiplicity of Infecti …

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慢病毒感染后,细胞不生长怎么办

慢病毒感染后,细胞不生长可能有多种原因。以下是一些常见的原因和解决方法: 病毒滴度过高: 原因:高滴度的慢病毒可能导致细胞毒性,使细胞无法正常生长。 解决方法:降低病毒的滴度,进行一系列稀释实验,找到一个既能有效转染又不影响细胞生长的滴度。 细胞状态不佳: 原因:感染前细胞的健康状态可能影响感染后的生长。 解决方法:确保细胞在最佳状态下进行感染,例如在感染前 …

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AAV 载体

腺相关病毒(AAV) 是第一个也是唯一的改造用于基因递送的ssDNA 病毒,无包膜,直径20~26nm 的二十面体核衣壳包裹着一条4.7kb 线性ssDNA 基因组。腺相关病毒是已知最小的哺乳动物病毒,因最早发现为腺病毒样本中的一个病毒污染成分而得名。没有辅助病毒,如腺病毒共感染时,它的天然复制能力缺失,与任何人类疾病不相关(Daya and Berns 2 …

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病毒载体的基本元件

反转录病毒载体 最常用的反转录病毒载体基于Mo -MLV 。第一代载体所携带的转基因的两侧是2 个完整的LTR, 由增强子(U3) 、R 区(即转录起始区,在病毒颗粒中的载体基因组两端均存在)及U5 区构成。病毒载体的包装主要由包装信号序列(ψ)介导,而邻近的gag序列能够显著提高其包装效率。所有反转录病毒载体均携带一个ψ甲序列和部分gag 序列组成的扩展包 …

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做嘌呤霉素筛选滴定时,感染两天,puro杀3天,5天细胞长得很密原因和解决方法,另外镜下数整个孔的克隆数感觉困难,能换成镜下视野面积与孔面积比换算吗?

问题1:“感染两天,puro杀3天,5天细胞都长很密” 原因: 细胞分裂快(比如 293T)→ 在5天内即使有筛选,还是会长满。 感染率高 → 很多细胞表达抗性,嘌呤霉素筛选不够“稀释” 建议: 缩短时间:感染 24h 后就加 puromycin,第 2 天开始杀,杀 2–3 天就足够。 更稀释的病毒梯度:推荐加大稀释倍数:1:1000,1:5000,甚至 …

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Stem Cells International | 南京大学口腔医学院:与众不同的牙周膜细胞促生机制

    研究团队通过病毒感染增强实验(EnvirusTM ,Engreen )发现通过细胞内琥珀酸盐诱导的 HIF-1α 稳定和细胞外琥珀酸盐引起的 GPR91 激活能促进牙周膜细胞增殖、迁移和成骨分化。这项成果发表在了《Stem Cells International》期刊上(“Succinate Supplement Elicited “Pseudohy …

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