英格恩技术博客 专注转染等实验

RNA转染影响因素

1.转染试剂

转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用—即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大小不同,转染条件不同,所需的试剂也应不同,所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster试剂.

2.RNA转染时RNA的用量

RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明,因为RNA和转染试剂的比例决定了转染复合物的结构和净电荷,以及是否容易被细胞膜吸附和内吞。RNA少了固然表达不好,太多也会有毒性的问题。

3.RNA本身的结构

除了操作,RNA本身的结构也对转染有一定的影响。哺乳动物的mRNA分子带有5’端帽子结构和3’端PolyA尾巴,此外还有成为IRES(internalribosomal entry site)的核糖体结合区,这些结构或者有助于提高mRNA的稳定性,或者有助于核糖体结合到mRNA上进行翻译。

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