英格恩生物技术博客 生物实验干货分享

1. 不合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度 2. 细胞选择错误 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞（15代以内，传代后2d）。因为处于对数生长期的细胞分裂旺盛，表面结构 …

1、巣式pcr（Nest-PCR）可增加稀有靶序列的灵敏度；降低了扩增多个靶位点的可能性；提高PCR特异性 2、递减PCR（Touch Down PCR）：前几个循环使用严谨的退火条件提高特异性；循环设在比估算的Tm高大约5的退火温度下开始，然后每个循环降低1-2，直到退火温度低于Tm 5 。适合用于AFLP、DNA指纹分析等。 3、热启动PCR：抑制一种基 …

骨骼系统稳态受免疫系统的动态影响。低密度脂蛋白受体相关蛋白5（LRP5）是Wnt信号通路的共同受体，它调节人和小鼠的骨代谢。免疫紊乱可导致骨代谢异常。目前还不清楚LRP5是否以及如何改变免疫系统的平衡来调节骨稳态。 现分享一篇RNA转染（Entranster）与小鼠LRP5基因杂合缺失改变免疫细胞形态及调控成骨细胞分化研究的文献，以供参考。

端粒的维持受端粒酶活性的调控，包括端粒酶全酶及其相关蛋白。端粒酶的活性在细胞中被精确控制，其失调是癌症的特征之一。端粒酶催化亚单位端粒酶逆转录酶（hTERT）在端粒酶活性中起重要作用。 现分享一篇ECL发光液（enlight）与Polo样激酶1（PLK1）通过影响端粒酶逆转录酶的稳定性上调端粒酶活性研究的文献，以供参考。