2025年 12 月 5日, 星期五
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测定蛋白质浓度前需要知道什么?

因为蛋白质是细胞结构与功能的主要分了成分,因此常常需要测定样品中蛋白质的含量,鉴定混合物中的特殊蛋白质,以及分析蛋白质的组成和序列。此外,蛋白质分析对合成用于诱导抗体生成的多肽,设计供克隆用的寡核苷酸探针以及证实序列数据的正确性是十分必要的。 为确保蛋白质通过电泳技术获得最好的分离,首先有必要估计待测样品中蛋白质的浓度。如果不做分析,蛋白质总量不足就可能妨碍 …

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抗体标记的步骤

下列步骤描述了使用Cy3作为代表性标记试剂, 用荧光succinimidy l 活性酶标记羊抗体。其他水溶性荧光标记物的使用与此类似(Mujumdar et al. 1993) 抗体分离与纯化 来源于血清,腹水或培养基的抗体,在标记反应开始以前,需纯化以除去蛋白质和其他含有氨基团的分子。在与标记反应混合以前,抗体不应进行强缓冲处理,不然标记混合物会降低,所有 …

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TUNEL分析

TUNEL方法(末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP-地高辛配基切口标记)源自完整固定的细胞核DNA 裂解部位标记(如Gavrieli et al. 1992)。 该法可用于组织切片、玻片上细胞生长、流式细胞计量术分析,用于组织切片的改进程序由Naik 及其合作者提出(Naik et al. 1996) ,叙述如下 1、组织切片的TUNEL 染色1)取下组织, …

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JAM分析

此分析方法基于用[3H] -胸腺嘧啶脱氧核苷标记核DNA, 用玻璃纤维滤器获得样品。 凋亡产生的DNA 片段小到可以通过玻璃纤维滤器,因此特定样品的放射活性减少。很显然,这种分析对循环的细胞是必需的。 实验前一天,将细胞接种于新鲜培养基。对数生长期细胞可更好地掺入[3H]-胸腺嘧啶脱氧核苷。 收获细胞,在新鲜培养基中以1×106细胞/ml重悬,用5 …

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