1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …
阅读更多 »提高RNA转染效率的几点建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与肠黏膜屏障的信号转导和细菌移位研究
肠上皮表面由一层柱状上皮细胞构成,形成一个与大多数管腔内细菌直接接触的屏障,在防止细菌易位中起着重要作用。肠上皮屏障功能在炎症性肠病(IBD)的发病机制中起着至关重要的作用,但其机制尚未完全阐明。现分享一篇RNA转染(Entranster)与肠黏膜屏障的信号转导和细菌移位研究的文献,以供参考。
阅读更多 »调控红细胞脱核机制研究
标题 The accumulation of miR-125b-5p is indispensable for efficient erythroblast enucleation 影响因子 该论文发表在《Cell Death and Disease》期刊上,2022年的影响因子为9.0,属于细胞生物学和医学领域的权威期刊。 文献概要 该研究探讨了miR-1 …
阅读更多 »RNA转染与MDSC细胞和原发性干燥综合征研究
原发性干燥综合征(PSS)是一种全身性自身免疫性疾病。以外分泌腺的淋巴细胞浸润为特征的,主要是唾液腺和泪腺,导致分泌功能的丧失。虽然PSS的病因仍不清楚,但许多研究已经证实树突状细胞(DCS)、NK细胞、B细胞和T细胞参与了SS的发病机制。最近的研究发现,Th1和Th17免疫应答在PSS的发展中起着关键性的作用。髓系来源的抑制性细胞(MDSC)是具有免疫抑制 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与肠黏膜屏障的信号转导和细菌移位研究
肠上皮表面由一层柱状上皮细胞构成,形成一个与大多数管腔内细菌直接接触的屏障,在防止细菌易位中起着重要作用。肠上皮屏障功能在炎症性肠病(IBD)的发病机制中起着至关重要的作用,但其机制尚未完全阐明。现分享一篇RNA转染(Entranster)与肠黏膜屏障的信号转导和细菌移位研究的文献,以供参考。
阅读更多 »siRNA转染与肝肺综合征有关的肺血管重构中细胞骨架蛋白研究
肝肺综合征(HPS)是肝病,肺内血管扩张(IPVD)和低氧血症的三联征,动脉低氧血症可引起肺血管重构(PVR)。在最近的研究中,与HPS有关的PVR中肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用已确定;细胞骨架蛋白的变化在细胞增殖中起着重要的作用。但与HPS有关的PVR中细胞骨架蛋白表达与分子机制相关性知之甚少。现分享一篇siRNA转染(Entranster)与细胞骨架蛋白 …
阅读更多 »RNA转染与BAFF和BCMA结合诱导多发性骨髓瘤研究
多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的血液恶性肿瘤,其特点是恶性浆细胞克隆性增殖,与大多数患者产生单克隆免疫球蛋白有关。细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10、干扰素-α和B细胞活化因子(BAFF)在促进MM细胞生长和耐药中的作用已得到明确阐述。越来越多的证据表明BAFF影响MM细胞的生长、存活、迁移和耐药性。B细胞成熟抗原(BC …
阅读更多 »siRNA转染与卫星胶质细胞中P2X7受体研究
嘌呤信号能够引起炎症和免疫反应。卫星胶纸细胞(SGCs)中的P2X嘌呤受体7(P2X7)的激活可能是促进炎症和神经性疼痛中一个必不可少的组成部分。长链非编码RNAs(lncRNAs)参与多种生理和病理过程。现分享一篇针对lncRNA BC168687的小干扰RNA(Entranster)对高糖和高游离脂肪酸环境下卫星胶纸细胞P2X7受体表达的影响的文献,以供 …
阅读更多 »体外转录法制备dsRNA中,怎么知道mRNA的靶区域在哪
在体外转录法制备dsRNA(双链RNA)的过程中,确定mRNA的靶区域是关键的一步。以下是一些常用的方法和步骤,以帮助确定mRNA的靶区域: 1. 目标基因的选择 首先,确定你想要抑制或研究的目标基因。你需要有这个基因的完整序列信息(通常从基因数据库中获得,如NCBI)。 2. 设计siRNA或shRNA序列 设计小干扰RNA(siRNA)或小发夹RNA(s …
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