2025年 12 月 5日, 星期五
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英格恩技术资料

siRNA转染效率不理想的原因

siRNA转染效率不理想,常见的原因有: 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率 …

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shRNA转染后,什么时候做RT-PCR最好?

shRNA转染后,进行RT-PCR的最佳时间取决于多种因素,包括细胞类型、转染效率、shRNA的表达和目标基因的降解速度。一般来说,在转染后的24到72小时内进行RT-PCR是比较常见的时间点。具体来说: 24小时后:在这个时间点,可以开始检测到shRNA的表达以及目标基因的初步下调情况。对于一些高效的shRNA,这个时间点可能已经有显著的基因沉默效果。 4 …

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ECL发光液(Enlight)与弓形虫疫苗研究

      弓形虫是一种无处不在的原生动物寄生虫,能感染所有恒温动物,包括哺乳动物和鸟类。蛋白质二硫键异构酶(PDI)可以移位到弓形虫速殖子细胞表面,参与调解病原微生物和宿主细胞的相互作用。现分享一篇ECL发光液(Enlight)在弓形虫疫苗研究中应用的文献,以供参考。

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做好RNA转染的几点建议

1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …

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体内转染与单cRGD修饰笼状siRNA的光调节研究

       小干扰RNA(siRNA)是通过RNA干扰(RNAi)在体外和体内抑制特定蛋白质合成的有力工具,由于RNAi利用天然途径,即在蛋白质翻译发生之前,在转录后水平上关闭基因表达,因此,siRNA诱导下调基因表达对基础研究和应用研究有着巨大的影响。siRNA及其递送系统的化学修饰已被建议用于改善细胞内siRNA …

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体内转染与异甘草素和大鼠早期脑损伤研究

脑内出血(Intracerebralhemorrhage,ICH)可引起有效的氧化应激反应和炎症过程,异甘草素(Isoliquiritigenin)是一种类黄酮物质,可以激活核因子E2相关因子2(Nrf2)介导的抗氧化系统,负调控核因子B(NF-κBκκ)和NOD受体家族。现分享一篇体内转染(Entranster)与异甘草素和大鼠早期脑损伤研究的文献,以供参 …

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如何优化细胞RNA转染实验条件?

可从以下几方面进行优化: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如 …

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RNA转染(Entranster)与膝关节骨性关节炎中WISP-1调控机制研究

      随着生活、工作方式的改变及社会人口的老龄化,骨关节退行性病变已成为高发疾病,其中代表性疾病之一为骨性关节炎(osteoarthritis, OA)。最近研究表明:WISP-1 具有促进关节软骨破坏的作用 。WISP-1 在正常软骨和滑膜中几乎不表达,而在退变的软骨及滑膜(如OA)中WISP-1异常增高,通过诱导MMPs及aggrecanases的 …

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Cancer Gene Therapy | 郑州大学附属医院:卵巢癌患者或将迎来新的希望

研究团队通过RNA体内转染实验(EntransterTM-in vivo, Engreen)发现沉默MAFG-AS1的表达可以减缓EMT的进程,转移,并且通过抑制NFKB1介导的细胞凋亡可减少卵巢癌细胞IGF1表达。这项成果发表在了《Cancer Gene Therapy》期刊上(“LncRNA MAFG-AS1 promotes the malignant …

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