英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
角膜移植术是治疗致盲性角膜疾病的唯一方法。虽然角膜移植被认为是最常见和最成功的移植手术，但角膜移植的成功率低于一般预期。根据临床统计，88%的角膜移植片在移植后能存活1年，但只有55%的角膜移植片能存活5年。三分之一的角膜损伤是由免疫移植反应引起的。此外，高危受者角膜移植的成功率在35%以下，抑制角膜移植排斥反应是提高移植成功率的主要挑战。现分享 …
阅读更多 »电转染后细胞孵育时间是多少？
每种细胞类型电转染后有最佳孵育时间。对于质粒的电转染，最佳孵育时间一般为12-48小时，具体最佳时间需根据实验目的、质粒性质和表达蛋白的半衰期进行调整。 如需了解更多关于电转染试剂的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/efficient-electroporation
阅读更多 »体内转染（Entranster）与小鼠急性肝衰竭研究
过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARα）被激活以改善急性肝衰竭患者肝损伤（ALF）。然而，其内在的保护分子机制在很大程度上尚未确定。C/EBP同源蛋白（CHOP）是脂多糖（LPS）的重要介质引起的炎症。现分享一篇体内转染（Entranster-in vivo）与小鼠急性肝衰竭研究的文献，以供参考。
阅读更多 »质粒DNA转染注意事项
1.启动子的选择启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响，但是对转染结果却有着微妙的影响。2.质粒的大小和质量线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒 …
阅读更多 »直接克隆法构建重组腺病毒基因组
pShuttle 质粒被用来将携带的目的基因转移到腺病毒载体骨架中。步骤1 ~9 阐述了将目的基因克隆到有双筛选系统的pSh-pkGFP 质粒中。目前在使用的pShuttle 或pSh-pkGFP 中包含一个CMV 启动子驱动的表达盒，，可以用来克隆外源基因或替换启动子。1. 在无菌的05mL 离心管中将外源基因载体和pSh-pkGFP 载体分别用以下条件消 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与二氢杨梅素抑制NLRP3炎性体依赖的细胞焦亡研究
越来越多的证据表明，细胞焦亡和炎性细胞程序性死亡与动脉粥样硬化有关；然而，其潜在的机制仍有待澄清。二氢杨梅素（Dihydromyricetin，DHM），一种天然的黄酮类化合物，据报道有抗氧化和抗炎的生物活性。然而，DHM对于动脉粥样硬化相关细胞焦亡的影响尚不清楚。现分享一篇RNA转染（Entranster）与二氢杨梅素抑制 NLRP3炎性体依赖的细胞焦亡研 …
阅读更多 »DNA转染（entranster）与基因载体的膜亲和力研究
在基因治疗中，核酸的有效转染依赖于基因载体的作用。这些载体保护核酸免受人体循环系统中核酸酶的降解，并将遗传物质作为治疗疾病的基因药物导入靶细胞。 一个有效的基因载体应该能够压缩目标基因，将其导入所需的宿主细胞，释放遗传物质，并使其与基因组结合。在基因转染过程中，基因载体对细胞膜的亲和力是与其转染效率密切相关的一个关键参数。 现分享一篇DNA转 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与脓毒症相关急性肺损伤研究
脓毒症是一种危及生命的疾病，其特征是器官功能不全。脓毒症被广泛认为是由于感染引起的代偿性抗炎反应和全身炎症反应之间的平衡不稳定。在严重的情况下，炎症、脓毒症可导致急性肺损伤（ALI），更严重地可能会发生急性呼吸窘迫综合征（ARDS）。现分享一篇体内转染（Entranster-in vivo）与丹酚酸B和脓毒症相关急性肺损伤研究的研究，以供参考。
阅读更多 »病毒感染细胞实验整体流程
目的基因不能直接整合到大多数真核细胞，常用的手段是将目的基因包装成病毒来感染细胞，从而得到表达满足实验需求。病毒有很多种，常见的有慢病毒和腺病毒。关于慢病毒和腺病毒的原理以及特别前面的文章中都有介绍过，可以搜索关键字查看。今天主要介绍病毒感染细胞的实验流程。 1.构建目的基因到载体 构建手段 一般是根据原始质粒信息确定克隆方案，有以下两种手段。 1）如果原始 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与小胶质细胞M2极化和脑炎性保护作用
小胶质细胞介导的炎症会导致脑出血（ICH）继发性损伤。活化的小胶质细胞在脑损伤和修复中具有促炎症（M1）和抗炎（M2）的双重功能。miR－124是一种有效的在脑损伤后抗小胶质细胞的抗炎药。然而，ICH后小胶质细胞的M1/M2极化的调节作用还未见报道。现分享一篇体内转染（Entranster）与小胶质细胞M2 …
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