英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
缺血性中风仍然是全世界致残和死亡的主要原因。长链非编码RNA（lncRNA）心脏肥大相关因子（chrf）被认为是心脏损伤和各种人类癌症的重要调节因子。然而，其对缺血性中风的作用和机制尚不清楚。现分享一篇体内转染（entranster）与LncRNA CHRF调节大脑缺血/再灌注损伤研究的文献，以供参考。 文献地址：https://sci-hub.shop/h …
阅读更多 »siRNA转染效率不理想的原因
siRNA转染效率不理想，常见的原因有： 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率 …
阅读更多 »细胞DNA转染实验步骤
下面以Entranster-H4000，DNA转染试剂为例，简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞密度在60％左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释，充分混匀，制成DNA稀释液。 注意：无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与冠状动脉微栓塞问题研究
冠状动脉微栓塞（CME）是一种常见的和重要的临床现象，急性冠状综合征（ACS），和那些接受溶栓治疗、经皮冠状动脉介入治疗（PCI）的患者都会出现冠状动脉微栓塞现象。现分享一篇运用体内转染（Entranster）方法研究细胞死亡因子4/NF-κB在猪冠状动脉微栓塞引起的心脏功能障碍中的发生机制的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与人类胚胎干细胞转染研究
如今，人类胚胎干细胞中小干扰RNA（siRNA）或质粒DNA（pDNA）低转染效率已经成为遗传操作的关键问题。对于高效转染siRNA和质粒进入胚胎干细胞的方法的发展需求变得越来越迫切。现分享一篇RNA转染（Entranster）与人类胚胎干细胞转染的文献，以供参考。
阅读更多 »巨噬细胞促进肺癌转化机制研究
文献概要 标题：Macrophages promote benzopyrene-induced tumor transformation of human bronchial epithelial cells by activation of NF-κB and STAT3 signaling in a bionic airway chip culture …
阅读更多 »siRNA转染实验需要知道的关键点
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮 …
阅读更多 »应用多种神经损伤模型探究PRMT6在背根神经节中的作用研究
文章标题：Protein arginine methyltransferase-6 regulates heterogeneous nuclear ribonucleoprotein-F expression and is a potential target for the treatment of neuropathic pain* 《蛋白质精氨酸甲基转 …
阅读更多 »ECL发光液（Enlight）与咪康唑对早产大鼠脑白质损伤的髓鞘保护作用研究
少突胶质细胞（ODNs）是中枢神经系统（CNS）的主要细胞，对神经元功能至关重要。中枢神经系统髓鞘异常是多种神经系统疾病的特征，包括白质损伤、多发性硬化和视神经脊髓炎。脱髓鞘的原因通常包括免疫损伤、兴奋毒性、病毒感染、肌营养不良和氧化应激。现分享一篇ECL发光液（Enlight）与咪康唑对早产大鼠脑白质损伤的髓鞘保护作用研究的文献，以供参考。
阅读更多 »细胞转染siRNA后，目标基因的表达反而升高的原因是什么？
siRNA转染后目标基因不降反升的现象可能由多种原因引起，常见的因素包括： siRNA设计不合理： siRNA的靶点选择不佳，未能有效靶向目标基因的mRNA，导致抑制效果差或反而激活了基因表达。可以尝试设计不同的siRNA靶点或使用更为优化的siRNA工具进行设计。 转染效率问题： 低转染效率可能导致siRNA无法进入足够多的细胞，从而未能有效抑制目标基因。 …
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