英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
中国冠鸭（凤头鸭）最近又出现在中国。除了白色的羽毛和黑色的嘴和脚之外，凤头鸭还有很高的羽毛冠。该品种可用于观赏或作为模式生物；然而，对其独特形态特征的遗传基础和发育知之甚少。现分享一篇DNA转染（entranster）与中国冠鸭冠垫胚胎形态观察及hoxc8基因表达研究的文献，以供参考 …
阅读更多 »体内转染与单cRGD修饰笼状siRNA的光调节研究
小干扰RNA（siRNA）是通过RNA干扰（RNAi）在体外和体内抑制特定蛋白质合成的有力工具，由于RNAi利用天然途径，即在蛋白质翻译发生之前，在转录后水平上关闭基因表达，因此，siRNA诱导下调基因表达对基础研究和应用研究有着巨大的影响。siRNA及其递送系统的化学修饰已被建议用于改善细胞内siRNA …
阅读更多 »siRNA转染实验注意事项
为了达到高的转染效率，在转染实验过程中，需要注意以下几点： 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »ECL发光液与蛋白激酶Nemo样激酶基因重组腺病毒载体的构建与鉴定研究
Ｎｅｍｏ样激酶（ｎｅｍｏ-ｌｉｋｅｋｉｎａｓｅ，ＮＬＫ）属于丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶。在果蝇、线虫、爪蟾等多种生物中都存在ＮＬＫ的同源蛋白，其结构存在高度的相似性，显示ＮＬＫ在进化过程中十分保守。研究显示，ＮＬＫ能够结合并磷酸化一系列转录因子，参与多个信号通路的调节，其中包括与发育过程密切相关的信号途径Ｗｎｔ和Ｎｏｔｃｈ等。Ｋｏｒｔｅｎｊａｎｎ等研究发现，ＮＬ …
阅读更多 »体内转染与PTEN和冠状动脉微栓塞炎性反应研究
越来越多的证据表明，第十染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白（phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten，PTEN）基因参与了不同病理条件下的炎症调节。但是，PTEN与猪冠状动脉微栓塞（CME）后心脏功能的损害的关系尚不清楚。现分享一篇体内转染（Entranster）与PTEN和 …
阅读更多 »体内转染siRNA （Entranster）的方法研究肺微血管内皮功能
小GTP酶Rab5可以控制囊泡接到的质膜蛋白运输，其在血管内皮（VE）-钙黏蛋白的内化作用功能仍然未知，血管内皮（VE）-钙黏蛋白是一种内皮特异性跨膜元件，可以调节内皮细胞的极性和屏障功能。现分享一篇应用体内转染siRNA （Entranster）的方法研究肺微血管内皮功能的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染与GATA-4调节脑出血后神经元凋亡研究
GATA结合蛋白4（GATA-4）是GATA转录因子家族的成员，在正常大脑中表达，参与神经炎症反应和衰老。然而，关于GATA-4是否与脑出血（ICH）引起的脑损伤有关的研究很少。现分享一篇体内转染（entranster）与GATA-4调节脑出血后神经元凋亡研究的文献，以供参考。其研究的目的是在体内和体外探讨GATA-4在ICH诱导的继发性脑损伤 …
阅读更多 »siRNA转染答疑专题总结（下）
Q9: 刚开始做实验，准备把RNAi的片段转入染色体内稳定表达，不知道是shRNA还是siRNA哪个比较好而且效率比较高？另外，一个载体里同时放两个针对不同基因的shRNA会不会相互影响？ A9: 稳定转染当然是shRNA。关于一个载体2个shRNA，涉及到2个shRNA的表达和加工的问题，关键还是2个shRNA都需要顺利表达的问题，这就和你的载体，以及2个 …
阅读更多 »Journal of Cellular Physiology | 西北工业大学生命科学院报道：治疗骨质疏松症新机制
该团队在《Journal of Cellular Physiology 》期刊上发表了题为“A novel long noncoding RNA AK016739 inhibits osteoblast differentiation and bone formation”论文。文章通过RNA体内转染（EntransterTM-in vivo, …
阅读更多 »siRNA细胞转染效率低下的原因
1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这 …
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