标题:Short-term and long-term high-fat diet promote metabolic disorder through reprogramming mRNA m6A in white adipose tissue by gut microbiota 期刊:Microbiome 影响因子:2025年的影响因子为13.75 文献 …
阅读更多 »慢病毒倍比稀释测定活性的实验中,DAY2天时,把稀释好的病毒和细胞孵育过夜时,用把细胞原培养基吸取出去吗,还是直接把病毒液添加进去?
好问题!在进行 慢病毒倍比稀释测定病毒滴度(titer) 的时候,DAY2 加入病毒时是否更换培养基,确实是一个关键点,对感染效率有一定影响。下面是两种常见操作方式,以及推荐做法: 推荐操作:先吸掉培养基,再加病毒(常规做法) 流程简述(以DAY2为节点): DAY1:铺板细胞(如293T、HEK293,常用于测滴度); DAY2:感染操作 吸掉旧培养基; …
阅读更多 »体内转染与microRNA-155和对乙酰氨基酚诱导的肝脏炎症研究
人体肝脏承担着多种任务,包括解毒,代谢废物的排出、营养摄取和储存、总能量代谢和重要血清蛋白的分泌。其特殊功能使肝脏成为一个极易受到毒性损伤的器官,可能引发肝脏炎症和随后的纤维化和终末期组织损伤。在所有肝毒性化学损伤中,对乙酰氨基酚(APAP)过量被认为是西方国家急性肝衰竭的最常见原因。虽有报道称,美国50%以上的急性肝衰竭病例都与APAP中毒有关 …
阅读更多 »体内转染let-7d(Entranster)与肾细胞癌治疗研究
肾细胞癌(RCC)是成年人肾脏最常见的恶性肿瘤,占肾脏恶性肿瘤的90%以上,恶性程度高。其发病率约为成年人恶性肿瘤的3%,。肾细胞癌预后很差,对放疗、化疗均不敏感。目前,局部肾细胞癌的治疗取得了很大的进展,但是对于转移性肾细胞癌治疗的选择非常有限。因此,鉴定新的肾细胞癌生物标志物以及具有更好疗效的抗肿瘤药物仍亟待解决。mirRNA是内源性的非编 …
阅读更多 »体内转染与牛磺酸脱氧胆酸通过Akt通路激活减轻早期脑损伤研究
创伤性脑损伤(TBI)是创伤性死亡和致残的主要原因之一,新的研究表明内质网应激在TBI的病理生理过程中起着重要作用。牛磺脱氧胆酸(TUDCA)是一种亲水性胆汁酸,已被报道为ER应激抑制剂和化学伴侣,并具有抑制细胞凋亡和炎症的潜力。 现分享一篇体内转染(Entranster)与牛磺酸脱氧胆酸通过Akt通路激活减轻早期脑损伤研究的文献,以供参考。
阅读更多 »悬浮细胞的siRNA转染实验步骤
悬浮细胞的siRNA转染操作步骤,以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA,加入一定量无血清稀释液,充分混匀,制成RNA稀释液,终体积为25μ …
阅读更多 »如何快速实现蝗虫、七鳃鳗、猪等(非小鼠)动物的体内基因敲除/表达?
如何快速实现蝗虫、七鳃鳗、猪等动物的基因敲除呢? 如果实验室研究人体疾病基因,需要稳定表达时,我们可能会选择基因工程小鼠,但如果课题组研究的是其他哺乳动物,比如猪、蝗虫、鱼之类的,基因工程的工作就相对复杂了。首先要设计基因载体,然后打入靶细胞进行同源重组,再培养细胞、筛选……一套工夫下来,要不目的基因没重组,要不模型全死了。要不找公司做?老牌的公司构建基因工 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与髓源性抑制细胞的抑制潜能研究
髓系来源的抑制性细胞(MDSC)介导了广泛而深刻的免疫抑制,特别是对T细胞功能的影响。在小鼠中,MDSC的特征是细胞表面分子Gr1(包括巨噬细胞和中性粒细胞标志物Ly6C和Ly6G)和CD11b的表达;在人类中,MDSC通常是CD11b+CD33+HLA-DR2。小鼠CD11b+Gr1+细胞群由两个亚群组 …
阅读更多 »siRNA细胞转染实验效率低的原因
1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与Botch蛋白对实验性脑出血大鼠神经保护作用研究
Notch1蛋白的成熟参与脑出血(ICH)后的炎症反应和细胞凋亡。据报道,Botch蛋白可抑制Notch1蛋白的成熟。现分享一篇体内转染(Entranster)与Botch蛋白对实验性脑出血大鼠神经保护作用研究的文献,以供参考。
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