英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
ECL发光灵敏度越高越好吗？ A: 不是。大多数实验的蛋白浓度在pg-ng级别，用增强型的发光液就可以。比如英格恩的Enlight发光液。 2.ECL发光液为什么需要避光保存？ A:因为ECL发光液里的鲁米那等发光成分很容易因为光而失活，所以需要避光保存。 3.ECL发光液多长时间容易失效，用一瓶ECL试剂，结果有差异，是否是失效了？ A：早期的ECL发光也 …
阅读更多 »质粒被酶切过还可以电转吗？
可以，但得分情况来看： 如果质粒是线性化了（即被酶切成线状DNA）： 可以电转，但是效率明显低于超级螺旋质粒（超螺旋 plasmid，通常是未切割、天然状态下的质粒结构）。 线性质粒在细胞内容易被核酸酶降解，稳定性和转化成功率比超螺旋质粒低很多。 有些时候，比如做基因组编辑（CRISPR knock-in）、整合型表达载体（需要基因组插入时），反而故意使用线 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与冠状动脉微栓塞相关的心功能不全研究
冠状动脉微栓塞（CME）是一种常见的临床事件，可自发或由程序相关的动脉粥样硬化斑块破裂急性冠状动脉综合征患者，特别是在经皮冠状动脉介入治疗（PCI）导致。大隐静脉移植物经皮介入治疗的发生率高达45%。由CME引起的短暂“无血流”或“慢血流”是急性心肌梗死患者长期预后不良的独立预测因素。此外，CME还可导致渐进性心肌功能异常，包括显性心肌梗死、收缩功能障碍、心 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与膜联蛋白A7和大鼠继发性脑损伤研究
谷氨酸兴奋性中毒参与了脑出血（ICH）引起的继发性脑损伤（SBI）。突触体相关蛋白23（SNAP23）和SNAP25分别参与突触前谷氨酸的释放和突触后谷氨酸受体（NMDA受体）运输，这两者对于谷氨酸介导的兴奋性毒性都是必不可少的。SNAP23和SNAP25具有较高的同源性，SNAP23被证明可与膜联蛋白A7（ANXA7）相互作用。现分享一篇体内转染（Entr …
阅读更多 »AAV载体中启动子和特殊原件的含义是什么？
hsyn：神经元特异启动子； GFAP：星形胶质细胞特异启动子； Ubiquitin：一种常用的组成型启动子。 IRES：内部核酶进入位点，起到连接两个基因，在一个启动子驱动下转录的作用。IRES连接的两个基因不会融合表达，IRES的RNA可以招募核糖体，翻译下游基因，但是IRES是一种再招募的过程，其后基因的mRNA的翻译量低于自身mRNA的数量，所以表达 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与糖尿病心血管自主神经病变研究
糖尿病是一种以高血糖为主要症状的慢性流行病，其并发症多样，严重影响着全球人类的健康。糖尿病心血管自主神经病变（DCAN）是1型糖尿病和2型糖尿病的常见并发症，发病率和死亡率都很高。然而，DCAN的潜在机制尚不清楚。现分享一篇体内转染（Entranster）与糖尿病心血管自主神经病变研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染与TAR DNA结合蛋白功能丧失和继发性脑损伤研究
TAR DNA结合蛋白-43（TDP-43）是一种多功能的DNA和RNA结合蛋白，参与RNA转录、选择性剪接，并可调节细胞中mRNA的稳定性。TDP-43已被证明是患有肌萎缩侧索硬化症（ALS）和额颞叶变性（FTLD）患者中神经元和胶质细胞包涵体病理学培养基的关键组分。最近的报告表明，TDP-43蛋白是一种 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与RIP3的缺失和非酒精性脂肪性肝病研究
非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是一种常见且复杂的疾病，具有严重肝脏疾病的高风险。尽管具有如此公众和临床健康的重要性，目前很少有有效的治疗方法可用于NAFLD。现分享一篇体内转染（entranster）与RIP3的缺失和非酒精性脂肪性肝病研究的文献，以供参考。
阅读更多 »siRNA转染实验注意事项
为了达到高的转染效率，在转染实验过程中，需要注意以下几点： 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »动物体内转染，局部注射后应如何取样？
使用动物体内转染试剂Entranster-in vivo进行体内转染实验时，由于局部注射容易造成药液分布不均，在注射的近端，药液浓度高，效果明细；远端，药液浓度低，效果低一些。所以，一方面，需要尽量将药液均匀覆盖全部靶组织，另一方面，后续实验取样时，在保证实验的 …
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