英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的，而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染，因RNA与DNA大小不同，转染条件不同，所需的试剂也应不同，所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R4000. RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明，因为RNA …
阅读更多 »The British Pharmacological Society | 同济大学医学院郭传勇教授团队报道：非酒精脂肪肝新疗法
郭传勇教授团队在《The British Pharmacological Society》期刊发表了题为“Astaxanthin attenuates hepatic damage and mitochondrial dysfunction in non-alcoholic fatty liver disease by upregulating …
阅读更多 »ECL发光液与traf1在幽门螺杆菌相关细胞凋亡和胃癌发生中的作用研究
肿瘤坏死因子受体相关因子1（traf1）是traf1家族成员，在动脉粥样硬化、淋巴瘤和实体瘤等疾病中失调，但traf1在胃癌中的作用尚不清楚。现分享一篇ECL发光液（enlight）与traf1在幽门螺杆菌相关细胞凋亡和胃癌发生中的作用研究的文献，以供参考。 文献地址：https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs …
阅读更多 »细胞电转染实验的几点建议
1. 电场强度要合适 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 细胞状态要好 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞（15代以内，传代后2 …
阅读更多 »动物体内转染实验，局部注射，应如何取样观察结果？
由于局部注射容易造成药液分布不均，在注射的近端，药液浓度高，效果明细；远端，药液浓度低，效果低一些。所以，一方面，需要尽量将药液均匀覆盖全部靶组织，另一方面，后续实验取样时，在保证实验的情况下，尽量取注射区域附近的组织，不取或者少取药液覆盖差的组织，以增加实验效果。 如需了解更多关于动物体内转染试剂的信息，请点击https://www.engr …
阅读更多 »Inflammation | 西安交通大学附属医院：促进心肌损伤的杀手
《Inflammation》期刊报道了MiR-23a通过直接靶向CX43和调节有丝分裂吞噬作用参与心肌缺血/再灌注损伤。题为“MiR-23a Is Involved in Myocardial Ischemia/Reperfusion Injury by Directly Targeting CX43 and Regulating Mi …
阅读更多 »siRNA转染效率不佳的原因
1. siRNA与转染试剂比例不佳 由于siRNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了siRNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率和总的细胞数量就很重要，一般细 …
阅读更多 »ECL发光液与猪繁殖与呼吸综合征病毒与胆固醇-25-羟化酶研究
猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）是一种免疫调节性病原体，已被公认为调节宿主干扰素（IFN）系统。胆固醇-25-羟化酶（CH25H）是一种重要的干扰素刺激基因（ISG）编码多面体膜蛋白，显著抑制许多病毒的复制。最新研究表明，CH25H抑制PRRSV的复制，同时PRRSV的感染可显著下调CH25H的表达，但涉及CH25H下调的病毒蛋白尚不清楚。现分享一篇EC …
阅读更多 »RNA转染（entranster）与Stat3抑制可增强cdn诱导的sting信号和抗肿瘤免疫研究
环GMP-AMP合成酶（cgas）-干扰素基因刺激剂（sting）通路是先天免疫的关键调节因子，在肿瘤治疗中已成为一个有前途的药物靶点，但由于其在肿瘤发展和免疫中的二分法作用，使得该通路在肿瘤治疗中的应用变得更加复杂。白细胞介素-6/Stat3通路的反馈激活可减弱Sting通路的激活和诱导的抗肿瘤免疫。现分享一篇RNA转染（entranster）与Stat3 …
阅读更多 »如何优化RNA转染条件？
可从以下几方面进行优化： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如 …
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