英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
蛋白质-蛋白质相互作用的合理设计是创造新型蛋白质药物、诊断探针或调节细胞信号通路的有力工具。SH3和PDZ结构域等小型模块化支架在调节蛋白质相互作用中起着重要作用，因此这些结构域在蛋白质设计中的应用已被广泛研究。De novo蛋白质设计为工程定制蛋白质功能提供模板，为合成生物学研究提供正交蛋白质相互作用网络。已经开发出各种计算方法来引入已知蛋白 …
阅读更多 »如何通过电穿孔转染DNA？
试剂 运载 DNA l0mg/mL 细胞生长培养基 电穿孔缓冲液 指数生长的培养细胞 线性化或环状质粒DNA ( 1 ~ 5μg/μL , 溶于无菌去离子水） 磷酸盐缓冲液( PBS ) 胰岛素 设备 电穿孔杯 电穿孔仪器 血细胞计数器 组织培养皿或多孔培养板 组织培养瓶（75cm2） 方法 准备电穿孔用细胞。 对于贴壁细胞 电穿孔前一天，通过胰酶消化释放贴 …
阅读更多 »如何得到更高的DNA细胞转染效率？
我认为，要想更高的细胞DNA转染效率，应注意以下几点： 1， 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大，又没有经验，选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功几率 …
阅读更多 »DNA转染与干细胞自我更新和多能性维持的研究
干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的原始细胞，包括胚胎干细胞、成体干细胞和诱导多能干细胞（IPS）。干细胞具有非常重要的理论研究意义和临床应用价值。利用胚胎干细胞建立多种细胞类型的体外分化系统，使人们能够在细胞和分子水平上研究哺乳动物的发育过程；不同发育阶段的细胞可确定胚胎发育和细胞分化的分子机制 …
阅读更多 »细胞DNA转染注意事项
1）优化条件：质粒不同，所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外，可选用更合适的转染试剂，如Entranster试剂。 2）抑制剂：不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素，EDTA，柠檬酸盐，磷酸盐，RPMI，硫酸软骨素，透明质酸，硫酸葡聚糖或其他硫酸 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与血管生成素-2和肺癌转移研究
肺癌是最常见的恶性肿瘤，血管生成-2（Ang-2）升高，具有高转移率。然而，关于Ang-2促进肺癌细胞增殖和转移的机制仍不清楚。现分享一篇DNA转染（Entranster）与血管生成素-2和肺癌转移研究的文献，以供参考。
阅读更多 »质粒DNA转染注意事项
质粒的构建：启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响，但是对转染结果却有着微妙的影响。 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如 …
阅读更多 »DNA转染与菱形蛋白酶RHBDD1诱导蛋白水解靶点研究
在过去的几十年中，研究发现，调节性膜内蛋白水解（RIP）在各种细胞过程中起着重要的作用，包括细胞信号转导、基因转录和凋亡。调节性膜内蛋白水解是蛋白酶在其跨膜区域内切割底物的过程。已鉴定出三种主要的膜内蛋白酶家族，包括金属蛋白酶型S2P家族、C-分泌酶和信号肽肽酶家族和菱形蛋白酶。现分享一篇DNA转染（En …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与微管蛋白多翻译后修饰的蛋白质组学分析和功能表征研究
微管蛋白已知会有独特的翻译后修饰（PTMS），如脱酪氨酸和聚谷氨酰化，特别是在非结构化羧基末端尾（CTTS）中。然而，更多传统的微管蛋白的PTMS及其在微管性质和功能的调节中的作用仍然不明确。现分享一篇DNA转染（Entranster）与微管蛋白多翻译后修饰的蛋白质组学分析和功能表征研究的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染与促红细胞生成素在软刺裸鲤适应低氧中的作用研究
促红细胞生成素（Erythropoietin，EPO）是一种糖蛋白激素，在红细胞生成中起着重要的调节作用，并启动应对环境挑战的细胞稳态反应。青藏高原是缺氧适应的天然实验室。软刺裸鲤（Gymnocypris dobula）是一种高度专业化的高原裂胸鱼，隶属于青藏高原海拔大于4500米的高海拔淡水河和池塘。但EPO在裂腹鱼适应低氧中的作用尚不清楚。现分享一篇DN …
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