英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
做过核酸电泳的应该都知道核酸染料。每次电泳前将核酸染料与融化的琼脂糖凝胶混合制板，凝胶凝固后即可进行电泳，前染有利于节约时间。现在实验室用的核酸染料大部分应该都是安全的了，EB的替代品都纷纷登场了。 EB，即溴化乙锭。EB属于核酸分子嵌入剂，早年间常用于琼脂糖凝胶电泳的核酸染料。EB本身在紫外下不发光，能与单链、双链甚至三链DNA高效结合并发出明亮的橙色荧光 …
阅读更多 »qPCR试剂对比2
上图为engreen的qPCR试剂，通过对比，可以发现engreen的qPCR试剂不会出现NTC扩增产物，特异性更高。
阅读更多 »siRNA转染时细胞铺板密度为什么很重要？
RNA转染试剂Entranster-R4000成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率和总的细胞数量就很重要，一般细胞数量较少时转染效率高，一些试剂由于本身毒性的影响，太低的细胞数量时毒性明显，所以会要求较高的细胞密度（汇合度），顺便说一句，看一个转染试剂的 …
阅读更多 »细胞转染效率影响因素
转染效率受多种因素影响，主要因素有下面几个： 1．转染试剂 不同细胞系转染效率通常不同，但细胞系的选择通常是根据实验的需要，因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献，通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然，最适合的是高效、低 …
阅读更多 »RNA转染效率低的原因
RNA转染效率低，可能的原因： · 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂，如Entranster试剂。 · 转染试剂和RNA的量不够，或者比例不对。优化实验条件，调整试剂和RNA用量，优化二者比例。 · 检测时间有问题。适当调整检测时间。 · RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 · 细胞状态不佳。调整细胞状态，调整细胞融合度。
阅读更多 »如何提高病毒感染实验效率？
可使用病毒感染增强剂envirus提高病毒的感染效率，下面以慢病毒为例，说一下实验过程。 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中，以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整，不要采用过高的细胞密度)。 2.感染 ⑴将2ul的Envirus-LV用25μl无血清稀释液稀释，充分混匀，制成Envirus-LV稀释液。4℃静置5分钟。 …
阅读更多 »手势与手语的神经处理
一项研究提示，手语和手势可能是被人类大脑的不同神经系统处理的。尽管手语和手势都传达了符号含义，但它们被认为在根本上是有区别的。 为了比较参与处理手语和手势的神经系统，Aaron Newman及其同事在一项测试中招募了19名先天性耳聋的美国手语（ASL）母语使用者与19名有听力的非手语英语母语使用者，这项测试的目的是在受试者观看非语言手势、美国手语（ASL）关 …
阅读更多 »蛋白质印迹实验过程注意事项
· 滤纸、胶、膜之间的大小，一般是滤纸>=膜>=胶。 · 滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡，气泡会造成短路。 · 因为DEPF膜的疏水性，膜必须首先在甲醇中完全浸湿。而且在以后的操作中，膜也必须随时保持湿润（干膜法除外）。 · 滤纸可以重复利用，上层滤纸（靠膜）内吸附有很多转移透过的蛋白质，所以上下滤纸一定不能弄混，在不能分辨的情况下，可以将靠胶滤 …
阅读更多 »western-blot化学发光（ECL）出现非特异性条带，怎么办？
出现杂带或非特异条带的原因可能有以下几个方面： 1. 蛋白上样量过大。可降低蛋白上样量。 2. 一抗是多克隆抗体，或一抗、二抗浓度太高。可更换成单克隆抗体，或降低抗体浓度，缩短抗体孵育时间，优化一抗和二抗的使用浓度。 3. 洗膜不充分。可增加洗膜次数和Buffer用量，延长洗膜时间，或在Wash Buffer中添加终浓度0.05%的Tween-20。 4. …
阅读更多 »多个小核酸混合转染之支链氨基酸靶向miR-203a促进鲤鱼骨骼肌生长
标题 (Title) 中文: 支链氨基酸靶向miR-203a促进鲤鱼骨骼肌生长 英文: Branched-Chain Amino Acids Target miR-203a/fosb Axis to Promote Skeletal Muscle Growth in Common Carp (Cyprinus carpio) 概要 (Summary) 本研究 …
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