非洲绿猴(African Green Monkeys, AGM)是猿免疫缺陷病毒(SIV)的天然宿主,虽然SIV复制水平较高,但不会发展为艾滋病。在健康成年AGM中观察到CD4(+)T细胞的降低和CD8(dim) T细胞升高,这可能部分解释了SIV诱导的疾病进展的缺失。阐明使这种天然宿主与SIV共存而无进展性疾病发生的机制可能有助于了解艾滋病的 …
阅读更多 »悬浮细胞的siRNA转染步骤
悬浮细胞的siRNA转染操作步骤,以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA,加入一定量无血清稀释液,充分混匀,制成RNA稀释液,终体积为25μ …
阅读更多 »siRNA转染(Entranster)与成纤维细胞瘤细胞l929-a研究
L929成纤维细胞瘤细胞(l929-a)和L929纤维肉瘤细胞(l929-n)是不同的细胞系,常用于肿瘤坏死的细胞毒性因子α(TNFα)的研究,TNFa已被报道可诱导两种细胞系的坏死。然而,当比较TNFα诱导的在这两个细胞系的细胞死亡时,l929-n表现出典型的RIP3依赖性细胞坏死,在l929-a中却不是。现分享一篇运用siRNA转染(Entr …
阅读更多 »如何优化RNA转染条件?
可从以下几方面进行优化: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与树突状细胞介导的抗肿瘤免疫研究
黑色素瘤是增长最快的恶性肿瘤,因此是一种最危险的皮肤癌类型。MiRNA(miR)‑128,这是一个公认的抑制肿瘤生长的因子,可参与树突状细胞抗肿瘤作用,然而,mir-128与树突状细胞介导的抗肿瘤免疫功能仍待澄清。现分享一篇mirRNA转染(Entranster)与树突状细胞介导的抗肿瘤免疫研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与启动子相关的小双链RNA激活研究
最近的一些报道表明,与启动子区互补的小激活dsRNA [双链RNA;SaRNA(小激活dsRNA)]可以上调哺乳动物细胞中的基因表达,这种现象被称为RNAa(RNA激活)。然而,关于什么是启动子靶向SARNA的靶分子,以及参与该过程的蛋白质是什么等RNAa的分子机制并不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster)与启动子相关的小双链RNA激活研究的文献 …
阅读更多 »RNA转染(entranster)与Stat3抑制可增强cdn诱导的sting信号和抗肿瘤免疫研究
环GMP-AMP合成酶(cgas)-干扰素基因刺激剂(sting)通路是先天免疫的关键调节因子,在肿瘤治疗中已成为一个有前途的药物靶点,但由于其在肿瘤发展和免疫中的二分法作用,使得该通路在肿瘤治疗中的应用变得更加复杂。白细胞介素-6/Stat3通路的反馈激活可减弱Sting通路的激活和诱导的抗肿瘤免疫。现分享一篇RNA转染(entranster)与Stat3 …
阅读更多 »如果细胞密度低,铺板48h可以转染吗?
如果细胞密度较低,一般来说,细胞在转染前的培养时间是很关键的。48小时的培养时间通常是足够的,但是否适合转染还要考虑几个因素: 1. 细胞的生长状态 细胞在转染时最好处于对数生长期,也就是细胞在活跃分裂和增殖中。若细胞密度过低,可能会处于生长迟缓或衰退状态,这会影响转染效率。 细胞密度太低(<30%):如果细胞太少,可能会影响转染试剂的吸附和细胞的转染 …
阅读更多 »siRNA转染与成纤维细胞瘤细胞l929-a研究
L929成纤维细胞瘤细胞(l929-a)和L929纤维肉瘤细胞(l929-n)是不同的细胞系,常用于肿瘤坏死的细胞毒性因子α(TNFα)的研究,TNFa已被报道可诱导两种细胞系的坏死。然而,当比较TNFα诱导的在这两个细胞系的细胞死亡时,l929-n表现出典型的RIP3依赖性细胞坏死,在l929-a中却不是 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与整合素αvβ3和微重力相关骨丢失研究
机械刺激和生物因素协同调节骨的发育和再生,但其基础机制却知之甚少。微重力诱导骨丢失,这可能地与抗局部细胞因子的发展有关,包括胰岛素样生长因子1(IGF-1)。现分享一篇RNA转染(Entranster)与整合素αvβ3和微重力相关骨丢失研究的文献,以供参考。
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