1.RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率和总的细胞数量就很重要,一般细胞数量较少时转 …
阅读更多 »siRNA转染实验的关键点
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
阅读更多 »siRNA转染与卫星胶质细胞中P2X7受体研究
嘌呤信号能够引起炎症和免疫反应。卫星胶纸细胞(SGCs)中的P2X嘌呤受体7(P2X7)的激活可能是促进炎症和神经性疼痛中一个必不可少的组成部分。长链非编码RNAs(lncRNAs)参与多种生理和病理过程。现分享一篇针对lncRNA BC168687的小干扰RNA(Entranster)对高糖和高游离脂肪酸环境下卫星胶纸细胞P2X7受体表达的影响的文献,以供 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与人类胚胎干细胞转染研究
如今,人类胚胎干细胞中小干扰RNA(siRNA)或质粒DNA(pDNA)低转染效率已经成为遗传操作的关键问题。对于高效转染siRNA和质粒进入胚胎干细胞的方法的发展需求变得越来越迫切。现分享一篇RNA转染(Entranster)与人类胚胎干细胞转染的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染与桥本甲状腺炎患者T辅助细胞1型细胞研究
桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis ,HT),又称慢性淋巴细胞性甲状腺炎,是一种器官特异性自身免疫性疾病,特点是甲状腺实质淋巴细胞浸润,弥漫性甲状腺肿大和自身抗体升高的升高,主要包括抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)和甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)。HT现在被认为是最常见的自身免疫性疾病,常与其他自身免疫性疾病相关,如G …
阅读更多 »细胞RNA转染注意事项
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …
阅读更多 »RNA转染(entranster)与il-17下调小鼠胶原性关节炎嗅间充质干细胞的免疫抑制能力研究
嗅间充质干细胞(oe-mscs)是嗅觉固有层中一种新的常驻干细胞类型。oe-mscs通过调节t细胞的反应,包括调节性t细胞(treg)的上调和th1/th17细胞的下调而发挥其免疫抑制能力。作为炎性细胞因子,il-17在胶原诱导性关节炎(cia)的发展过程中起着关键的作用。然而,目前尚不清楚il-17水平的升高是否会影响oe-mscs在炎症状态下的免疫抑制功 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与IL-17下调小鼠胶原性关节炎嗅间充质干细胞的免疫抑制能力研究
嗅间充质干细胞(OE-MSCs)是嗅觉固有层中一种新的常驻干细胞类型。OE-MSCs通过调节T细胞的反应,包括调节性T细胞(Treg)的上调和Th1/Th17细胞的下调而发挥其免疫抑制能力。作为炎性细胞因子,IL-17在胶原诱导性关节炎(CIA)的发展过程中起着关键的作用。然而,目前尚不清楚IL-17水平的升高是否会影响OE-MSCs在炎症状态下的免疫抑制功 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与雷公藤红素增强肿瘤细胞中缺氧诱导因子-1活性研究
雷公藤红素,是从传统中药雷公藤中提取的一种三萜类化合物,具有抗炎、抑制肿瘤血管生成、抑制肿瘤生长、诱导细胞凋亡以及对人类神经退行性疾病的细胞保护作用等多种作用。然而,这些功能的基础机制并不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster)与雷公藤红素增强肿瘤细胞中缺氧诱导因子-1活性研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与整合素αvβ3和微重力相关骨丢失研究
机械刺激和生物因素协同调节骨的发育和再生,但其基础机制却知之甚少。微重力诱导骨丢失,这可能地与抗局部细胞因子的发展有关,包括胰岛素样生长因子1(IGF-1)。现分享一篇RNA转染(Entranster)与整合素αvβ3和微重力相关骨丢失研究的文献,以供参考。
阅读更多 »
英格恩生物技术博客 生物实验干货分享