2025年 12 月 5日, 星期五
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英格恩技术资料

RNA转染注意事项

为保证RNA转染的高效率,在转染过程中应注意: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境 …

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siRNA转染效率不理想的原因

siRNA转染效率不理想,常见的原因有: 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率 …

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在共转染中,怎么看质粒的表达能力?通过什么方式呢?

共转染实验中,判断质粒的表达能力通常有几种常见的方式,具体方法取决于你的实验设计和质粒中所包含的标记。以下是几种常用的检测方式: 1. 荧光标记 如果质粒中包含了荧光标记基因(如GFP、RFP等),通过显微镜直接观察荧光信号是最直观的方式。这种方法不仅可以评估质粒的转染效率,还可以间接反映出质粒的表达能力。 优势:快速、简便,能够同时评估转染效率和蛋白表达。 …

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CCK8实验中,细胞已经死亡,但是脱氢酶的活性还在,是否能计算细胞数量?

       不能。由于CCK8是通过和细胞内的脱氢酶进行反应间接反映活细胞数量,如果细胞已经死亡,但脱氢酶的活性还在,则试剂测定的细胞数量将会比真实值高,不能真实反映活细胞数量,建议采用别的方法测定。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/ …

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DNA转染(Entranster)与三疣梭子蟹CacyBP基因的克隆研究

三疣梭子蟹是一种重要的商业蟹类,广泛分布于韩国、日本、中国、南洋和印度洋。虽然这种海蟹能够在不同的盐度条件下生存,但不同的盐度条件可能影响其分布和迁移途径。盐度也是影响梭子蟹人工繁殖的一个重要因素,特别是在幼虫发育和蜕皮阶段。因此,研究三疣梭子蟹耐受环境盐度变化的遗传机制,有利于蟹类的人工繁殖。现分享一篇DNA转染(Entranster)与三疣梭子蟹钙中周期 …

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如何通过电穿孔转染DNA?

试剂 运载 DNA l0mg/mL 细胞生长培养基 电穿孔缓冲液 指数生长的培养细胞 线性化或环状质粒DNA ( 1 ~ 5μg/μL , 溶于无菌去离子水) 磷酸盐缓冲液( PBS ) 胰岛素 设备 电穿孔杯 电穿孔仪器 血细胞计数器 组织培养皿或多孔培养板 组织培养瓶(75cm2) 方法 准备电穿孔用细胞。 对于贴壁细胞 电穿孔前一天,通过胰酶消化释放贴 …

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体内转染(Entranster)与膜联蛋白A7和大鼠继发性脑损伤研究

谷氨酸兴奋性中毒参与了脑出血(ICH)引起的继发性脑损伤(SBI)。突触体相关蛋白23(SNAP23)和SNAP25分别参与突触前谷氨酸的释放和突触后谷氨酸受体(NMDA受体)运输,这两者对于谷氨酸介导的兴奋性毒性都是必不可少的。SNAP23和SNAP25具有较高的同源性,SNAP23被证明可与膜联蛋白A7(ANXA7)相互作用。现分享一篇体内转染(Entr …

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