英格恩技术资料

1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …

       肥胖疾病的流行引起了全球的关注。环境污染物是导致肥胖的主要原因之一。许多研究表明，膳食纤维可以减少高脂肪饮食引起的肥胖，但环境污染引起的肥胖能否逆转还不得而知。现分享一篇ECL发光液（enlight）与果胶通过调节肠道微生物群减少环境污染物引起的小鼠肥胖研究的文献，以供参考。文献地址：https://www.sciencedirect.com/ …

质粒的构建：启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响，但是对转染结果却有着微妙的影响。 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如 …

          在自然界中，微生物镰刀菌病原体普遍侵入宿主植物、动物和人类，并且共生次生代谢物真菌毒素。除农业经济损失外，以脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）为例，这些物质通常是对食品安全、动物和人类健康带来严重威胁。虽然全世界对食品中DON阈值的许多规定都是严格立法的，但DON对婴儿、青年和老年人群的毒性和安全限度仍存在相当大的争议，这实际上是由于对DON毒 …

        长链非编码RNA在人肝癌（HCC）中异常表达，并与HCC的进展有关。lncRNA linc0511（linc0511）已被证实在一些肿瘤中作为肿瘤启动子。然而，作为一中新颖的LncRNA，linc00511的具体功能仍然不是很清楚。现分享一篇RNA转染（engreen）与LncRNA LINC00511和肝癌细胞增殖和转移研究的文献，旨在评估 …

1. siRNA与转染试剂比例不佳 由于siRNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了siRNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率和总的细胞数量就很重要，一般细 …

用siRNA进行transient transfection不稳定，几代细胞以后，症状就会消失，所以在转染几天（1-3）后要立刻抽提蛋白，进行分析。 用质粒中的shRNA进行转染，如果质粒含有抗生素位点，可以进行筛选，获得较稳定的细胞株系，但需要时间较长 用病毒中的shRNA进行感染（infection），抗生素筛选后，可以获得很稳定细胞株系。 瞬时RNAi …

      蓝光（420～490 nm）是可见光的主要成分，具有较高的到达视网膜的能量。一些流行病学研究表明，暴露在阳光中，即使在普通的日常强度下，也有助于老年性黄斑变性和视力丧失的进展。大量的研究明确地表明蓝光可以导致视网膜细胞感光细胞和视网膜色素上皮细胞（RPE）的损伤。此外，视网膜神经节细胞（RGCs）的丢失被发 …

       肝肺综合征（HPS）是肝病，肺内血管扩张（IPVD）和低氧血症的三联征，动脉低氧血症可引起肺血管重构（PVR）。在最近的研究中，与HPS有关的PVR中肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用已确定；细胞骨架蛋白的变化在细胞增殖中起着重要的作用。但与HPS有关的PVR中细胞骨架蛋白表达与分子机制相关性知之甚少。现分享一篇siRNA转染（Entranster- …

TAR DNA结合蛋白-43（TDP-43）是一种多功能的DNA和RNA结合蛋白，参与RNA转录、选择性剪接，并可调节细胞中mRNA的稳定性。TDP-43已被证明是患有肌萎缩侧索硬化症（ALS）和额颞叶变性（FTLD）患者中神经元和胶质细胞包涵体病理学培养基的关键组分。最近的报告表明，TDP-43蛋白是一种核蛋白，可从细胞核到细胞质中形成泛素阳性包涵体（UP …