siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素:细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术(Entranster)是最为常用的方法,而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好 …
阅读更多 »ECL发光液与AMPA受体在巨噬细胞中TNF-α表达和释放中作用研究
谷氨酸(Glu)是中枢神经系统中一种兴奋性神经递质,并根据其特定的谷氨酸受体发挥多种功能。谷氨酸也是一种营养氨基酸,存在于血液中。谷氨酸受体有两组,它们是离子型受体(IGLURs)和代谢型受体(MGLURs)。IGLURS是根据其对激动剂的选择性分为三个亚型:N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NMDA),A-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体(AMPA …
阅读更多 »European Journal of Pharmacology | 复旦大学医学院:发现乳腺癌发展的新秘密
《European Journal of Pharmacology》期刊上最新发表的乳腺癌相关文章“SPTBN1 inhibits growth and epithelial-mesenchymal transition in breast cancer by downregulating miR-21“表明低水平的SPTBN1与乳腺癌的肿瘤生长 …
阅读更多 »siRNA转染效率不理想怎么办?
siRNA转染效率不理想,常见的原因有: 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率 …
阅读更多 »Cell Death & Disease | 西北农林科技大学报道:如何有效增肌?
该团队在《Cell Death & Disease》期刊上发表了题为“CircRILPL1 promotes muscle proliferation and differentiation via binding miR-145 to activate IGF1R/PI3K/AKT pathway”的论文。研究人员利用体内转染试剂(En …
阅读更多 »基于DNA适配体的PROTAC治疗癌症研究(IF18.8)
标题:An engineered DNA aptamer-based PROTAC for precise therapy of p53-R175H hotspot mutant-driven cancer 期刊:Science Bulletin 影响因子:18.8 文献概要 该研究开发了一种基于工程DNA适配体的PROTAC(蛋白降解靶向嵌合体)——dp5 …
阅读更多 »miRNA转染(Entranster)与白细胞介素IL-23受体和甲状腺炎研究
Hashimoto甲状腺炎(HT)是一种典型的器官特异性自身免疫性疾病,其特征是自身对甲状腺抗原的耐受性降低。白细胞介素IL-23受体(IL-23R)越来越被认为是自身免疫性疾病的一个关键点,包括Hashimoto甲状腺炎(HT)。然而,调节IL-23R表达的分子机制尚不清楚。现分享一篇miRNA转染(Entranster-R4000)与白细胞介 …
阅读更多 »如何利用好慢病毒感染的原理和特点?
一、原理 慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体,与化学合成的siRNA 和基于瞬时表达载体构建的普通 siRNA 载体相比,一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用,另一方面,Lentivirus-siRNA 克隆经过慢病毒包装系统包装后,可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非 …
阅读更多 »siRNA细胞转染实验效率低的原因
1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这 …
阅读更多 »Frontiers in Neuroscience | 海军医科大学王文忠教授团队报道:改善高血压氧化应激的新策略
王文忠教授团队在《Frontiers in Neuroscience》期刊上发表了“β-Arrestin1 Reduces Oxidative Stress via Nrf2 Activation in the Rostral Ventrolateral Medulla in Hypertension”论文,研究结果证实b-arrestin1 的过表 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享