英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
尾静脉注射时请掌握注射技巧，一般选用远端1/3 处静脉注射，如感觉到阻力和轻微隆起，请停止注射，重新寻找静脉进行操作，不要强力推注，否则容易将药液注射在尾部，导致尾部溃烂。注射完成后移去针头，按压针孔10 秒以上，防止药液流出。局部注射，尽可能多注射药液，有利于提高转染效果 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与P2Y12 shRNA减轻2型糖尿病大鼠神经病理性疼痛研究
糖尿病性神经病理性疼痛是2型糖尿病（DM）的常见并发症。背根神经节（DRG）中星形胶质细胞（SGCs）的激活通过释放促炎细胞因子在神经病理性疼痛中发挥重要作用。P2Y12受体在DRG的SGCS中表达。现分享一篇体内转染（Entranster）与P2Y12 shRNA减轻2型糖尿病大鼠神经病理性疼痛研究的文献，以供参考。
阅读更多 »嘌呤霉素筛选标记的病毒滴定 Protocol
关于使用嘌呤霉素筛选标记的慢病毒或逆转录病毒进行病毒滴定的 protocol，整理了一个常用且较为权威适用于慢病毒系统： 【嘌呤霉素筛选法的病毒滴定 Protocol】 原理简述： 将病毒感染宿主细胞，使用嘌呤霉素筛选，仅有成功整合了抗性基因的细胞能存活。最后通过计数存活细胞（克隆或整体密度）来估算病毒滴度。 实验材料： 病毒上清； HEK293T 或其他易 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与树突状细胞介导的抗肿瘤免疫研究
黑色素瘤是增长最快的恶性肿瘤，因此是一种最危险的皮肤癌类型。MiRNA（miR）‑128，这是一个公认的抑制肿瘤生长的因子，可参与树突状细胞抗肿瘤作用，然而，mir-128与树突状细胞介导的抗肿瘤免疫功能仍待澄清。现分享一篇mirRNA转染（Entranster）与树突状细胞介导的抗肿瘤免疫研究的文献，以供参考。
阅读更多 »什么是腺病毒载体？
腺病毒属于腺病毒科，分为两个属：禽腺病毒属（鸟腺病毒）和哺乳动物腺病毒属（人、猴、牛、马、猪、羊、犬和负鼠腺病毒）。这些病毒均携带一个线性双链DNA 基因组，由直径为70~100mm 的二十面体衣壳蛋白包裹。约36kb 的基因组包括4 个提供调控和复制功能的早期转录单位(El 、E2 、E3 、E4) 、2 个延迟早期单位(IX 和IVa2)和1 个指导包括 …
阅读更多 »提高RNA转染效率的几点建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与甜菊渣提取物改善D-半乳糖诱导衰老小鼠的氧化应激研究
衰老被定义为是机体内部环境的稳定，生理功能和代谢过程不可避免的退化的一个过程。许多疾病与衰老有关，如帕金森病、糖尿病、动脉粥样硬化、阿尔茨海默病、骨质疏松症、骨关节炎和多种癌症。随着老龄化社会的到来，健康越来越受到重视。氧化应激是由活性氧自由基和抗氧化剂不平衡引起的生物过程，可能导致脂质、蛋白质和DNA的氧化损伤，最终导致死亡。科学证据表明，氧化应激在衰老过 …
阅读更多 »电转染实验时，细胞密度是多少合适？
进行电穿孔实验时.，需确定每种细胞类型的最佳细胞密度，以使电穿孔效率最大化。对于Entranster-E电转染试剂来说，在含电转试剂的终体系中，电穿孔时的细胞密度一般在1-10×106细胞/ml范围内。对于悬浮细胞，最好是接近10×106细胞/ml的高细胞密度。对于贴壁细胞，建议的细胞密度为1-5×106 …
阅读更多 »多组学检测NEB基因CirlRNA促进牛的骨骼肌成研究
标题：”A Circular RNA Generated from Nebulin (NEB) Gene Splicing Promotes Skeletal Muscle Myogenesis in Cattle as Detected by a Multi-Omics Approach” 期刊：Advanced Science 影 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与Clock基因突变体通过抑制NFKB的乙酰化来促进骨关节炎研究
地球上生物的生理活动维持着大约24小时的昼夜节律，这是由核心昼夜节律基因家族调控的。核心昼夜节律钟由许多调节因子组成，如时钟和bmal1，它们形成一个异二聚体，并有助于下游基因的激活。或者，一些调节因子（如per/cry）通过抑制时钟/bmal1活性来调节昼夜节律。这种转录翻译反馈是由核心昼夜节律分子介导的，并产生昼夜节律。现分享一篇体内转染（entrans …
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