生物标志物最基本的性质是变化。但是血浆中的变化是难以维持的,因为它是由机体的稳态机制严格控制的。尿液没有稳态机制。此外,尿液部分是血液过滤,系统信息可以反映在尿液中。我们假设血液的变化可以更灵敏地反映在尿液中。现分享一篇ECL发光液(enlight)与尿液中抗凝剂导致的蛋白变化研究的文献,以供参考。 文献地 …
阅读更多 »体内外RNA转染(Entranster)与sirtuin3和肾缺血再灌注损伤研究
缺血再灌注(I/R)可引起急性肾损伤,其特征是增加活性氧(ROS)和线粒体损伤,并破坏肾小管上皮细胞的细胞极性、细胞骨架完整性和细胞基质和细胞-细胞相互作用。线粒体蛋白sirtuin 3(SIRT3)可能有助于减轻或预防I/R损伤。SIRT3过表达有助于恢复急性肾损伤模型中线粒体的动态变化。但关于SIRT3是否能够及如何减轻I/R引起的急性肾 …
阅读更多 »体内转染与小鼠基因表达光调控研究
小干扰RNA(siRNA)在基因功能研究和药物开发方面扮演着重要的角色。最近,通过化学修饰作用设计出对光不稳定的siRNA,从时间和空间上来阐明基因额沉默过程。现分享一篇体内转染(Entranster)与小鼠基因表达光调控研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染与环状非编码RNA减少基因脱靶效应研究
环状RNA在许多生物系统中被发现。它们大多被认为是microRNA的分子“海绵”,具有许多未知的生物学活性。小干扰RNA作为许多非编码RNA之一,已成为基因表达调控和药物治疗的重要工具。虽然由siRNA介导的靶mRNA裂解具有高度的序列特异性,意外“脱靶”沉默内源基因在细胞中也观察到,这限制了siRNA的进一步应用。脱靶效应的siRNA也能诱导多种细胞凋亡。 …
阅读更多 »问:现在是将构建好的质粒电转入到自制的感受态细胞里,质粒有10000bp,是90μL感受态细胞中加3.5μ质粒。我之前有电转过6000多bp的质粒,过夜培养可以长菌的。但是这个10000bp的质粒过夜培养没有单菌落,延长培养时间后有个别单菌落,但是挑单菌落到LB中并不浑浊。这种情况我是应该调整一下电转程序还是改一下加入质粒的量呢?
以下是详细的优化建议: 优化质粒用量(首要调整): 问题: 你目前使用的是3.5µL质粒加入90µL感受态细胞。关键在于质粒的浓度(ng/µL),而不是体积。 3.5µL 对于90µL感受态细胞来说体积不小,如果质粒浓度较高,实际DNA量可能大大超过电转最优范围。 原理: 过量的DNA会导致电击时产生过多的热量和离子效应,严重降低转化效率,尤其对大质粒(&g …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与CREB1基因沉默对血管性痴呆小鼠认知功能障碍的影响研究
血管性痴呆(VD)是老年痴呆的第二大病因,仅次于阿尔茨海默病(AD),在西方国家占所有痴呆病例的17.6%,研究表明在世界东部地区,包括中国和日本人口中,认知功能障碍的人数要更多。认知功能障碍广泛被认为是痴呆患者的经典特征。VD,以各种脑血管疾病为特征的损伤综合征主要与缺血性脑血管疾病相关。目前,VD的确切发病机制仍不清楚。因此,有必要更详细 …
阅读更多 »体内转染siRNA (Entranster)与肺微血管内皮功能研究
小GTP酶Rab5可以控制囊泡接到的质膜蛋白运输,其在血管内皮(VE)-钙黏蛋白的内化作用功能仍然未知,血管内皮(VE)-钙黏蛋白是一种内皮特异性跨膜元件,可以调节内皮细胞的极性和屏障功能。现分享一篇应用体内转染siRNA (Entranster-in vivo)的方法研究肺微血管内皮功能的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染与bom-mir-2805在上调家蚕纤维蛋白轻链基因的表达研究
家蚕是世界上最重要的经济昆虫,也是鳞翅目重要的模式生物。家蚕丝腺是一种高度特异性,具有高效合成丝蛋白能力的特殊器官。丝蛋白主要由丝素和丝氨酸组成。丝素基因的表达主要在转录水平上受到时间和空间调控,表现为表达抑制模式。研究表明家蚕miRNAs参与丝蛋白基因的表达调控。另外,家蚕丝腺特异性转录因子(Tfs)如丝腺因子(SGF,包括SGF-1、SGF- …
阅读更多 »如何利用好腺病毒感染的原理和特点?
一、原理 腺病毒(Adenovirus,Ad)是一种无包膜的线状双链DNA病毒,其复制不依赖于宿主细胞的分裂。有近50个血清型,大多数Ad载体都是基于血清型2和5,通过转基因的方式取代E1和E3基因,降低病毒的复制能力。这些重组病毒仅在高水平表达E1和E3基因的细胞中复制,因此是一种适用于治疗的高效控制系统。 二、特点 1) 几乎可以感染所有类型的细胞 2) …
阅读更多 »体内转染(entranster)与大鼠早期脑损伤诱导的神经元凋亡研究
早期脑损伤(EBI)诱导的神经元凋亡是导致动脉瘤性蛛网膜下腔出血(ASAH)并发症的主要诱因,并可能会增加ASAH患者的死亡率。c-jun N-末端激酶(JNK)已被证实是EBI诱导的细胞凋亡的启动子,然而其机制尚未完全阐明。现分享一篇体内转染(entranster)与大鼠早期脑损伤诱导的神经元凋亡研究的文献,以供参考。
阅读更多 »
英格恩生物技术博客 生物实验干货分享