2025年 12 月 5日, 星期五
新闻

病毒感染增强

慢病毒感染后,细胞不生长原因?

慢病毒感染后,细胞不生长可能有多种原因。 以下是一些常见的原因和解决方法: 1) 病毒滴度过高: 原因:高滴度的慢病毒可能导致细胞毒性,使细胞无法正常生长。 解决方法:降低病毒的滴度,进行一系列稀释实验,找到一个既能有效转染又不影响细胞生长的滴度。 2) 细胞状态不佳: 原因:感染前细胞的健康状态可能影响感染后的生长。 解决方法:确保细胞在最佳状态下进行感染 …

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慢病毒、腺病毒、AAV 的检测周期分别是多长?

  慢病毒 腺病毒 腺相关病毒 外源基因表达时间 2-4天开始表达长时间稳定表达 1-2天开始表达 持续7-14天 7-14开始表达 细胞分裂不旺盛部位可长时间表达 AAV一般注射动物后,会在1周左右开始表达,体内实验一般建议感染后3-4周看第一批结果。持续时间可以长达两年以上。在体内,细胞的生存周期会很长,特别是一些神经元细胞。所以只要细胞不死,AAV基本 …

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慢病毒载体

慢病毒属于反转录病毒科,与该科其他病毒一样,病毒粒子携带ssRNA, 必须反转录并整合至宿主细胞基因组(原病毒)产生有效感染。慢病毒的显著特点是其基因组复杂、圆柱形或圆锥形的核衣壳携带病毒基因组。核衣壳被携带包膜糖蛋白的双层膜包裹,包膜糖蛋白负责与细胞表面受体进行相互作用及进入宿主细胞。反转录病毒是几乎所有脊椎动物的主要病原体。人类免疫缺陷病毒l 型(HIV …

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使用带有GFP荧光标记的慢病毒感染细胞,想要检测GFP阳性率,通常用什么方法?

如果您使用的是带有GFP荧光标记的慢病毒感染细胞,想要检测GFP阳性率,通常情况下可以通过流式细胞仪来实现,步骤如下: 收集细胞:首先收集感染后的细胞,并用适当的缓冲液进行重悬。 去除死细胞:可以通过加PI(碘化丙啶)或7-AAD等染料来排除死细胞,这样有助于提高检测的准确性。 流式检测:使用流式细胞仪时,选择FITC通道(通常是FL1通道),因为GFP的荧 …

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有了它,就能不断发射争对各种病毒的疫苗

2021年2月25日,陈薇团队研发的重组新冠病毒疫苗(腺病毒载体)获批上市。她说:“这个平台好比火箭发射平台,有了它,就能不断「发射」争对各种病毒的疫苗。” 过去的几十年间,复制缺陷的人类重组腺病毒V5(HadV5)已经成为一种广泛应用在真核基因表达分析、疫苗研究等领域的模式系统。这种经修饰后的腺病毒,其E1和E3基因已被移除,依然具备细胞感染的能力,但产生 …

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慢病毒感染细胞常见问题分析

1.用于慢病毒感染的细胞接种量是多少? 根据细胞增殖的速度调整细胞接种量,以保证在感染后4天左右细胞刚好快长满培养皿底部为宜。 针对大部分细胞系:传代周期在2-3天,感染时细胞铺板的密度保持在20-30%左右,则72h后细胞增殖后铺板密度约在90%左右; 针对某些原代细胞: 由于细胞增长缓慢,可以在接种时提高汇合度到50%~60%,但要确保在感染后4天时细胞 …

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如何利用好慢病毒感染的原理和特点?

一、原理 慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体,与化学合成的siRNA 和基于瞬时表达载体构建的普通 siRNA 载体相比,一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用,另一方面,Lentivirus-siRNA 克隆经过慢病毒包装系统包装后,可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非 …

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提高慢病毒感染细胞效率的方法

可使用病毒感染增强剂envirus提高病毒的感染效率,下面以慢病毒为例,说一下实验过程。 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 2.感染 ⑴将2ul的Envirus-LV用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成Envirus-LV稀释液。4℃静置5分钟。 …

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