2025年 12 月 14日, 星期日
新闻

病毒感染增强

慢病毒感染,胶体金测出来很高,可感染效果很差的原因

慢病毒感染效率低,尽管用胶体金测试显示滴度很高,可能有以下几个原因: 病毒颗粒质量:虽然胶体金检测显示病毒滴度很高,但这并不意味着所有的病毒颗粒都是功能性的。有可能病毒颗粒已经失活或者结构受损,无法有效感染目标细胞。 病毒浓度与效价的差异:胶体金检测主要测量病毒颗粒的数量,但这些颗粒不一定都具有感染性。有效感染的病毒颗粒(感染性单位)可能比实际检测的数量要低 …

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是否有嘌呤霉素筛选标记的病毒的病毒滴定protocol,看了好多好多不一样的?这个有比较权威又大众的滴度操作流程吗?

关于使用嘌呤霉素筛选标记(puromycin resistance marker)的慢病毒(lentivirus)或逆转录病毒(retrovirus)进行病毒滴定(virus titration)的 protocol,确实有不少不同的做法,这是因为不同实验室根据自己的系统和需求进行了优化。但是,有一些权威且广泛应用的标准流程可以作为通用参考,下面是整理的一个 …

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怎么根据病毒的TCID50计算给毒的MOI值

根据病毒的TCID50值计算给毒的MOI(Multiplicity of Infection,感染倍数)通常需要几个步骤。MOI 是指每个宿主细胞上平均感染的病毒颗粒数。 步骤概述: 知道病毒的TCID50值:TCID50 是一种病毒活性的度量,表示每单位体积(通常为每毫升)病毒悬液中,能在 50% 的细胞文化中引起感染的病毒数量。单位通常是病毒颗粒数/毫升 …

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慢病毒载体

慢病毒属于反转录病毒科,与该科其他病毒一样,病毒粒子携带ssRNA, 必须反转录并整合至宿主细胞基因组(原病毒)产生有效感染。慢病毒的显著特点是其基因组复杂、圆柱形或圆锥形的核衣壳携带病毒基因组。核衣壳被携带包膜糖蛋白的双层膜包裹,包膜糖蛋白负责与细胞表面受体进行相互作用及进入宿主细胞。反转录病毒是几乎所有脊椎动物的主要病原体。人类免疫缺陷病毒l 型(HIV …

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Stem Cells International | 南京大学口腔医学院:与众不同的牙周膜细胞促生机制

    研究团队通过病毒感染增强实验(EnvirusTM ,Engreen )发现通过细胞内琥珀酸盐诱导的 HIF-1α 稳定和细胞外琥珀酸盐引起的 GPR91 激活能促进牙周膜细胞增殖、迁移和成骨分化。这项成果发表在了《Stem Cells International》期刊上(“Succinate Supplement Elicited “Pseudohy …

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293T分别包装两种病毒,浓缩后混合感染鼠CD8+ T细胞可以吗?

原则上可以,具体要看以下几个条件: 步骤可行性: 分别包装:在293T细胞中分别转染两种构建(比如psPAX2 + pMD2.G + 各自的载体),收集病毒上清; 浓缩:超速离心或PEG浓缩,两种病毒分别处理; 混合感染:感染前混合两种浓缩后的病毒,用于感染小鼠CD8+ T细胞。 技术要点: T细胞激活:CD8+ T细胞对逆转录病毒天然不易感染,通常需要先用 …

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为什么选择AAV作为基因治疗的病毒载体?

AAV,即腺相关病毒载体,属于细小病毒科依赖病毒属。野生型AAV感染人宿主细胞后,可以整合到人类19号染色体的AAVS1位点,但AAV不会引起人类疾病。实际上,我们市面常见的AAV并不是野生型AAV,而是重组AAV(rAAV)。 AAV和AAV载体的基因组结构(图片来源:Semantic Scholar)     目前来看,rAAV相比较其他病毒载体,未发现 …

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有了它,就能不断发射争对各种病毒的疫苗

2021年2月25日,陈薇团队研发的重组新冠病毒疫苗(腺病毒载体)获批上市。她说:“这个平台好比火箭发射平台,有了它,就能不断「发射」争对各种病毒的疫苗。” 过去的几十年间,复制缺陷的人类重组腺病毒V5(HadV5)已经成为一种广泛应用在真核基因表达分析、疫苗研究等领域的模式系统。这种经修饰后的腺病毒,其E1和E3基因已被移除,依然具备细胞感染的能力,但产生 …

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慢病毒感染后,细胞不生长怎么办

慢病毒感染后,细胞不生长可能有多种原因。以下是一些常见的原因和解决方法: 病毒滴度过高: 原因:高滴度的慢病毒可能导致细胞毒性,使细胞无法正常生长。 解决方法:降低病毒的滴度,进行一系列稀释实验,找到一个既能有效转染又不影响细胞生长的滴度。 细胞状态不佳: 原因:感染前细胞的健康状态可能影响感染后的生长。 解决方法:确保细胞在最佳状态下进行感染,例如在感染前 …

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慢病毒载体构建原理

       慢病毒载体的包装系统一般由两部分组成,即包装成分和载体成分。包装成分由HIV-1基因组去除了包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列而构建,能够反式提供产生病毒颗粒所必需的蛋白;载体成分则与包装成分互补,即含有包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列,同时具有异源启动子控制下的多克隆位点及在此位点插入的目的基因。将包装成分与载体成分的多个质粒共转染包装 …

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