2026年 4 月 29日, 星期三
新闻

病毒感染

逆转录病毒可以共感染吗?

可以。逆转录病毒(如MLV、lentivirus等)可以共感染同一细胞,尤其是不同病毒包装不同的转基因载体时,可以实现共转导(co-transduction),从而使同一细胞获得多个基因。 但要注意: 病毒滴度足够高:每个病毒的MOI(Multiplicity of Infection)需要合适,才有可能让同一细胞被两种病毒都感染。 标记或选择机制清晰:常用 …

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慢病毒滴度测定的倍比稀释实验中,设置复孔的作用?

在慢病毒滴度测定的倍比稀释实验中,设置复孔主要有以下几个作用: 提高实验数据的可靠性由于生物实验存在一定的随机误差,复孔可以减少实验数据的偶然性,提高测量的准确性和重复性。 计算平均值,减少误差即使计算滴度时可能未直接用到每个复孔的数据,而是取某个稀释度下的阳性孔(如GFP阳性细胞数或抗生素筛选存活细胞数),但通常会计算复孔的平均值,以降低误差。 观察实验一 …

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是否有嘌呤霉素筛选标记的病毒的病毒滴定protocol,看了好多好多不一样的?这个有比较权威又大众的滴度操作流程吗?

关于使用嘌呤霉素筛选标记(puromycin resistance marker)的慢病毒(lentivirus)或逆转录病毒(retrovirus)进行病毒滴定(virus titration)的 protocol,确实有不少不同的做法,这是因为不同实验室根据自己的系统和需求进行了优化。但是,有一些权威且广泛应用的标准流程可以作为通用参考,下面是整理的一个 …

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怎么根据病毒的TCID50计算给毒的MOI值

根据病毒的TCID50值计算给毒的MOI(Multiplicity of Infection,感染倍数)通常需要几个步骤。MOI 是指每个宿主细胞上平均感染的病毒颗粒数。 步骤概述: 知道病毒的TCID50值:TCID50 是一种病毒活性的度量,表示每单位体积(通常为每毫升)病毒悬液中,能在 50% 的细胞文化中引起感染的病毒数量。单位通常是病毒颗粒数/毫升 …

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如何解决病毒感染细胞效率低的难题?

       病毒感染细胞本来效率就较低,一定要注意以下几点:1.感染时的培养基尽量少些;2. 使用Envirus-LV,可以提高效率约20-50倍。      病毒感染细胞本来效率就较低,整个过程相对复杂难操作,一般一次花费周期至少两三个月,多则几个月到十几个月不等,经费也是几万到十几万。万一实验失败需要重复操作会花费更多的时间和开支。所以有效提高病毒转染 …

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慢病毒转染贴壁细胞实验方法

1.提前一天细胞铺板 提前一天种植细胞,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 感染实验 ⑴将EnvirusTM-LV用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成增强剂稀释液。 ⑵将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成病毒稀释液。 注:由于病毒浓度情况不同,具体病毒浓缩液用量酌情依据 …

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慢病毒转染贴壁细胞实验方法

1.提前一天细胞铺板 提前一天种植细胞,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 感染实验 ⑴将EnvirusTM-LV用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成增强剂稀释液。 ⑵将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成病毒稀释液。 注:由于病毒浓度情况不同,具体病毒浓缩液用量酌情依据 …

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测定病毒滴度,是否可直接使用 293 细胞?

测定病毒滴度时,是否可以直接使用 HEK293 细胞,取决于你使用的病毒类型和实验目的。 一般来说: 如果是腺病毒或慢病毒,HEK293 细胞(特别是 HEK293T 细胞)通常是不错的选择,因为它们表达病毒包装过程中需要的辅助因子(如腺病毒的 E1A/E1B 或慢病毒的 VSV-G),可以有效地被感染并产生明显的病毒效应。因此,很多实验室会用 293 细胞 …

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在慢病毒滴度测定的倍比稀释实验中,为什么计算滴度时好像没用上复孔?

通常,在计算滴度时,我们会选取某个稀释度的特定数据(如阳性细胞数),但这个数据往往是复孔的平均值,或者用于确认某个稀释度的数据是否可靠。因此,虽然计算公式中可能未直接体现复孔的作用,但复孔实际上已经在前期数据处理中起到了关键作用。 总结:复孔的作用是提高数据的稳定性和准确性,即使计算滴度时没有直接体现,实际上已经通过平均值计算、异常值排除等方式间接影响了最终 …

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