英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
为了做好RNA转染实验，提出几点关于细胞RNA转染实验的建议，供大家参考： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »请问一下，转染带荧光标记的NC，转染后需要拍照看转染效率，在转染后4-6小时换液吗？
一般原则： 1.转染试剂对细胞有毒性。因此通常会建议在 4–6小时后更换新鲜培养基，以减轻毒性，保证细胞状态。 2.换液是否影响转染效率？ 针对你要拍荧光观察转染效率的情况： 如果只是想观察转染效率，一般建议 不要太早换液，至少等到荧光信号开始显现（通常24–48小时）再拍照。 如果细胞状态不好（明显发黄、漂浮、死亡增加），建议在 4–6小时换液，以保证细胞 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与髓源性抑制细胞的抑制潜能研究
髓系来源的抑制性细胞（MDSC）介导了广泛而深刻的免疫抑制，特别是对T细胞功能的影响。在小鼠中，MDSC的特征是细胞表面分子Gr1(包括巨噬细胞和中性粒细胞标志物Ly6C和Ly6G)和CD11b的表达；在人类中，MDSC通常是CD11b+CD33+HLA-DR2。小鼠CD11b+Gr1+细胞群由两个亚群组 …
阅读更多 »体内转染与cflar调节炎症和内质网应激和脑缺血再灌注损伤研究
中风是全球导致死亡和残疾的主要原因。脑缺血再灌注（I/R）损伤以显著炎症和广泛的细胞死亡为特征。多个信号通路在这一过程中发挥着重要作用，识别这些通路中不明确的关键调节因子可能为治疗提供有前景的靶点。casp8和fadd样凋亡调节因子（cflar）在多个器官中表达，可调节炎症。现分享一篇 …
阅读更多 »ECL发光液与存活素抑制对食管癌细胞放射增敏作用研究
食管癌在中国是一种常见的癌症。手术是食管癌的主要治疗手段，但放疗和化疗在临床分期上也有广泛的应用。放射治疗通常与化疗和靶向治疗相结合。然而，放射治疗效果仍然令人不满意，放射抗性在临床治疗中非常普遍，导致可能的治疗失败。因此，迫切需要提高放射敏感性的策略。现分享一篇ECL发光液（enlight）与存活素抑制对食管癌细胞放射增敏作用的研究的文献，以 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与丙戊酸钠增强肝细胞脂肪变性研究
丙戊酸钠（Valproate，VPA）是一种广谱抗癫痫药物，已广泛应用于各种抽搐，双极性，或分裂情感障碍等癫痫的治疗。据报道，VPA治疗是一个长期的过程，甚至需要终身服药。然而，在整个VPA抗癫痫治疗过程中会发生药物不良反应（ADR），如肝毒性、肥胖、出血性胰腺炎、骨髓抑制和血氨过多性脑病。其中肝毒性是限制丙戊酸持续使用的最常见、最严重的不良反应 …
阅读更多 »老年小鼠术后认知障碍机制研究：一种新的机制和治疗靶点
英文标题： CircITSN1/EIF4A3/Itsn1 axis mediates postoperative cognitive dysfunction in aged mice: A novel mechanism and therapeutic target 影响因子 该文章发表于 《Molecular Therapy: Nucleic Acids》 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与骨髓细胞分化研究
免疫细胞系的规范和功能受祖细胞起源和环境因素的影响。免疫细胞如中性粒细胞、单核细胞和髓系抑制因子，其在炎症环境中的分化机制尚未完全阐明。现分享一篇RNA转染miRNA（Entranster）与骨髓细胞分化研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染（Entranster）与DNMT1过表达和废用性骨质疏松研究
废用性骨质疏松（DOP）属于继发性骨质疏松症的一种，是由于骨骼的机械张力刺激减少而引起的局部或全身性骨量减少。可以出现于运动能力受限或功能障碍，也可能发生于创伤或者术后制动。有关DOP的确切机制尚不清楚，尽管表观遗传修饰可能是主要原因。最近，有研究表明DNA甲基转移酶（DNMT）蛋白可将胞嘧啶催化为5-甲基胞嘧啶（5mC），改变DNA的表观遗传状态。现分享一 …
阅读更多 »细胞DNA转染实验影响因素
1.细胞密度 一般来说，当细胞密度达到60%～80%时进行转染可以取得较高的转染效率，过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态 这点非常关键，很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此，为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性，应尽量使用适度传代的细胞系，并在不同次实验时保持细胞传代次数的一致性。 还有，尽量选择无 …
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