回答:“无抗的都长满”,说明细胞活性和数量没问题,基本排除培养条件问题。那么核心矛盾集中在质粒是否成功进入细胞并表达抗性基因。这里有几个关键排查点:质粒浓度是否足够(建议>100ng/μL)、抗性基因是否匹配(如氨苄不能用于表达AmpR的质粒)、抗性板浓度是否正确(过高会杀死阳性克隆)。 特别注意的是检查质粒纯度。实验室常用乙醇沉淀法提质粒,但残留的盐 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与脓毒症相关急性肺损伤研究
脓毒症是一种危及生命的疾病,其特征是器官功能不全。脓毒症被广泛认为是由于感染引起的代偿性抗炎反应和全身炎症反应之间的平衡不稳定。在严重的情况下,炎症、脓毒症可导致急性肺损伤(ALI),更严重地可能会发生急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。现分享一篇体内转染(Entranster-in vivo)与丹酚酸B和脓毒症相关急性肺损伤研究的研究,以供参考。
阅读更多 »体内转染(Entranster)与缺氧诱导因子和肾再生研究
虽然哺乳动物的肾再生发生在在整个生命期中,但哺乳动物的成熟的肾脏并不能充分再生,尤其是肾小球。以往的研究表明,肾部分切除术后的脱细胞肾支架可增强肾的再生。现分享一篇体内转染(Entranster)与缺氧诱导因子和肾再生研究的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与人结直肠癌细胞通路研究
瓜蒌提取物具有多种药用功能。最近,有报道称从瓜蒌中分离的一种丝氨酸蛋白酶TKP可以通过诱导细胞凋亡从而抑制人结直肠癌细胞的增殖。现分享一篇DNA转染(Entranster)与人结直肠癌细胞通路研究的文献,文献中研究了TKP对于大肠腺癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响。
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与血管生成素-2和肺癌转移研究
肺癌是最常见的恶性肿瘤,血管生成-2(Ang-2)升高,具有高转移率。然而,关于Ang-2促进肺癌细胞增殖和转移的机制仍不清楚。现分享一篇DNA转染(Entranster)与血管生成素-2和肺癌转移研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染与MDSC细胞和原发性干燥综合征研究
原发性干燥综合征(PSS)是一种全身性自身免疫性疾病。以外分泌腺的淋巴细胞浸润为特征的,主要是唾液腺和泪腺,导致分泌功能的丧失。虽然PSS的病因仍不清楚,但许多研究已经证实树突状细胞(DCS)、NK细胞、B细胞和T细胞参与了SS的发病机制。最近的研究发现,Th1和Th17免疫应答在PSS的发展中起着关键性的作用。髓系来源的抑制性细胞(MDSC)是具有免疫抑制 …
阅读更多 »shRNA转染后,什么时候做RT-PCR最好?
shRNA转染后,进行RT-PCR的最佳时间取决于多种因素,包括细胞类型、转染效率、shRNA的表达和目标基因的降解速度。一般来说,在转染后的24到72小时内进行RT-PCR是比较常见的时间点。具体来说: 24小时后:在这个时间点,可以开始检测到shRNA的表达以及目标基因的初步下调情况。对于一些高效的shRNA,这个时间点可能已经有显著的基因沉默效果。 4 …
阅读更多 »体内转染与牛磺酸脱氧胆酸通过Akt通路激活减轻早期脑损伤研究
创伤性脑损伤(TBI)是创伤性死亡和致残的主要原因之一,新的研究表明内质网应激在TBI的病理生理过程中起着重要作用。牛磺脱氧胆酸(TUDCA)是一种亲水性胆汁酸,已被报道为ER应激抑制剂和化学伴侣,并具有抑制细胞凋亡和炎症的潜力。 现分享一篇体内转染(Entranster)与牛磺酸脱氧胆酸通过Akt通路激活减轻早期脑损伤研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(Entranster)与小鼠肺部炎症和细胞凋亡研究
急性肺损伤(ALI)与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是非常严重的临床症状,具有很高的发病率和死亡率。虽然关于ALI和ARDS的治疗策略和相关的呼吸生理取得了重大进展,但是其年死亡率仍然达到了40%,导致巨额的医疗成本。现分享一篇体内转染(Entranster)与小鼠肺部炎症和细胞凋亡研究的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染与Cep70与γ-微管蛋白和有丝分裂纺锤体组装研究
有丝分裂纺锤体的解除与基因组不稳定性有关,这是肿瘤发生和恶性转化的一个重要方面。为了保证染色体传递的准确性,有丝分裂纺锤体由精细的机制组装,并由动物细胞中的着丝粒组织配制。尤其是,中心体蛋白被认为协同作用以确保准确的纺锤体形成,但分子细节仍有待研究。现分享一篇DNA转染(Entranster)与Cep70与γ-微管蛋白相互作用在有丝分裂纺锤体组装中作用的研究 …
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