喉癌是头颈部第二常见的恶性肿瘤,最常见的表现为鳞状细胞癌。这种疾病的发病率正在增加,然而,其发展的机制尚不完全清楚。因此,寻找新的喉鳞状细胞癌(LSCC)的诊断和治疗方法变得尤为重要。 现分享一篇RNA转染(Entranster)与siRNA靶向骨膜蛋白对人喉鳞状细胞癌抑制作用研究的文献,以供参考。 文献地址:http://europepmc.o …
阅读更多 »RNA转染与丹参酮IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用研究
丹参酮 IIA(Tanshinone IIA,Tan IIA)是一种从丹参干根中提取的生物活性物质,具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。然而,Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制仍有待进一步阐明。现分享一篇运用RNA转染(Entranster)的方法的文献,通过阐明Tan IIA在p53基因缺陷的H1299细胞中的抗肿瘤作用机制,以确定丹参酮IIA …
阅读更多 »ECL发光液与蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中线粒体依赖性凋亡研究
据报道,早期脑损伤(EBI)是蛛网膜下腔出血(SAH)患者高死亡率和不良预后的主要原因,细胞凋亡是EBI中最重要的生理病理机制。最近,有研究发现硫氧还蛋白相互作用蛋白(txnip)将内质网应激(ER应激)与神经元凋亡联系起来,并加重EBI。然而,其他潜在的机制仍然未知。现分享一篇ECL发光液(enlight)与硫氧还蛋白相互作用蛋白和蛛网膜下腔出血后早期脑损 …
阅读更多 »ECL发光液与S-periaxin二聚反应中的分子间二硫键研究
Periaxin最初是从哺乳动物周围神经系统(PNS)的髓鞘化施万细胞中鉴定出来的,它通过膜-蛋白相互作用在稳定施万细胞-轴突单元中起着重要作用。Periaxin蛋白占PNS蛋白含量的16%。Periaxin基因缺失或突变导致脱髓鞘周围神经病变,如Charcot–Marie–Tooth病4F、腓骨肌萎缩、遗传性运动和感觉神经病变以及隐性Dej …
阅读更多 »如何提高siRNA细胞转染效率
为了达到高的siRNA转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RN …
阅读更多 »体内转染(entranster)与MST1介导的大鼠脑出血继发性脑损伤研究
脑出血(ICH)是一个严重的公共卫生问题,可导致成人的高致残率和死亡率。细胞凋亡是ICH后继发性脑损伤(SBI)的标志。哺乳动物不育系20样激酶-1(MST1)是一种细胞凋亡促进激酶,是Hippo信号通路的一部分,参与细胞死亡、氧化应激和炎症反应。然而,MST1在ICH诱导的SBI中的作用和潜在机制尚未完全清楚。现分享一篇体内转染(entranster)与M …
阅读更多 »mRNA细胞转染实验步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例,说一下mRNA转染步骤(24孔板) 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞汇合度(Confluence)在30%左右为宜,转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那么 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与BMP9通过下调PI3K/Akt信号通路抑制乳腺癌细胞生长研究
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,起源于乳腺上皮组织。近年来,乳腺癌的发病率逐年增加,已成为世界第二大常见癌症。骨形态发生蛋白9(BMP9)是BMP家族成员,参与肿瘤发生、发展和转移的调控,为了探讨BMP9是否通过PI3K/Akt信号通路抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞的生长,现分享一篇ECL发光液(enlight)与BMP9通过下调PI3K/Akt信号通路抑 …
阅读更多 »SCI:调节心肌梗死的关键基因
心肌梗死是通过心肌细胞死亡诱导心脏衰竭一个重要原因。然而,唾液酸在心肌细胞凋亡中的作用机制尚不清楚。最近,大连医科大学的研究人员在关于心肌梗死的研究中发现,唾液酸转移酶siat7a是心肌梗死的重要影响因素。这项研究结果发表在最近的《Basic Research in Cardiology》杂志,可以帮助揭示心肌梗死治疗的潜在靶标。 心肌梗死(myocardi …
阅读更多 »siRNA转染效率不理想怎么办?
siRNA转染效率不理想,常见的原因有: 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率 …
阅读更多 »
英格恩生物技术博客 生物实验干货分享