英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
如今，人类胚胎干细胞中小干扰RNA（siRNA）或质粒DNA（pDNA）低转染效率已经成为遗传操作的关键问题。对于高效转染siRNA和质粒进入胚胎干细胞的方法的发展需求变得越来越迫切。现分享一篇RNA转染（Entranster）与人类胚胎干细胞转染的文献，以供参考。
阅读更多 »细胞RNA转染的建议
为了做好RNA转染实验，提出几点关于细胞RNA转染实验的建议，供大家参考： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与骨桥蛋白对肝脏毒性代谢调节作用研究
骨桥蛋白（OPN）是一种众所周知的促炎症分子，在对乙酰氨基酚（APAP）引起的肝毒性中已被观察到。然而，OPN诱导的精确细胞来源及其在APAP诱导的肝毒性中的作用还尚不清楚。现分享一篇体内转染（Entranster）与骨桥蛋白对肝脏毒性代谢调节作用研究的文献，以供参考。
阅读更多 »ECL发光液常见问题及解答2
4：Western Blot化学发光(ECL)时，胶片上条带很浓怎么办？ 对ECL发光来说，可以减少发光时间和显影时间。对英格恩Enlight发光液来说，可以将压过的膜重新用TBST洗涤10min×3次后重新曝光操作。 5：Western blot化学发光(ECL)时，胶片上条带很弱怎么办？ 对ECL发光来说，可适当延长曝光时间。如果还是不行，增加蛋白的上样 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与PPARα调节肿瘤细胞的增殖和衰老研究
肉碱棕榈酰转移酶（Carnitine palmitoyltransferase 1c，cpt1c），位于线粒体膜外，在脂肪酸的转运和氧化中起着关键的作用。它也参与细胞增殖，是癌细胞衰老的潜在驱动力。然而，其上游调控机制是未知的。过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARαα）是一个配体激活转录因子，可调节脂质代谢和肿瘤进展。现分享一篇ECL发光液（enlight） …
阅读更多 »体内转染与GATA-4调节脑出血后神经元凋亡研究
GATA结合蛋白4（GATA-4）是GATA转录因子家族的成员，在正常大脑中表达，参与神经炎症反应和衰老。然而，关于GATA-4是否与脑出血（ICH）引起的脑损伤有关的研究很少。现分享一篇体内转染（entranster）与GATA-4调节脑出血后神经元凋亡研究的文献，以供参考。其研究的目的是在体内和体外探讨GATA-4在ICH诱导的继发性脑损伤 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与膜联蛋白A7和大鼠继发性脑损伤研究
谷氨酸兴奋性中毒参与了脑出血（ICH）引起的继发性脑损伤（SBI）。突触体相关蛋白23（SNAP23）和SNAP25分别参与突触前谷氨酸的释放和突触后谷氨酸受体（NMDA受体）运输，这两者对于谷氨酸介导的兴奋性毒性都是必不可少的。SNAP23和SNAP25具有较高的同源性，SNAP23被证明可与膜联蛋白A7（ANXA7）相互作用。现分享一篇体内 …
阅读更多 »ECL发光液的选择
做western-blot实验时，选择一款好的发光液对实验的成功很重要，否则很容易发生各种问题，如淬灭，背景高，不灵敏，发光时间短等。比如淬灭，我觉得Western Blot“淬灭”的原因主要在两方面：含HRP的抗体和发光试剂。由于长期应用某种发光试剂，人们多注意了抗体，不知道发光试剂其实也会对实验结果造成 …
阅读更多 »体内转染（engreen）与去甲异波尔定和结肠炎研究
去甲异波尔定（Norisoboldine，NOR）是一种天然的芳香烃受体（AhR）激动剂，已被证明可减轻溃疡性结肠炎（UC）并诱导Treg细胞的产生。在UC状态下，低氧广泛存在于结肠粘膜中，microRNAs（miRs）表达和糖酵解的次级变化有助于Treg分化。现分享一篇体内转染（Entranster）与去甲异波尔定和结肠炎研究的文献，以供参考。
阅读更多 »细胞电转染实验注意事项
选择合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 细胞的选择 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞（15代以内，传代后2d）。因为处于对数生长期的细胞分裂旺盛，表面结构致密比稳定 …
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