2025年 12 月 5日, 星期五
新闻

病毒感染增强

在慢病毒滴度测定的倍比稀释实验中,为什么计算滴度时好像没用上复孔?

通常,在计算滴度时,我们会选取某个稀释度的特定数据(如阳性细胞数),但这个数据往往是复孔的平均值,或者用于确认某个稀释度的数据是否可靠。因此,虽然计算公式中可能未直接体现复孔的作用,但复孔实际上已经在前期数据处理中起到了关键作用。 总结:复孔的作用是提高数据的稳定性和准确性,即使计算滴度时没有直接体现,实际上已经通过平均值计算、异常值排除等方式间接影响了最终 …

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慢病毒滴度测定的倍比稀释实验中,设置复孔的作用?

在慢病毒滴度测定的倍比稀释实验中,设置复孔主要有以下几个作用: 提高实验数据的可靠性由于生物实验存在一定的随机误差,复孔可以减少实验数据的偶然性,提高测量的准确性和重复性。 计算平均值,减少误差即使计算滴度时可能未直接用到每个复孔的数据,而是取某个稀释度下的阳性孔(如GFP阳性细胞数或抗生素筛选存活细胞数),但通常会计算复孔的平均值,以降低误差。 观察实验一 …

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在比较慢病毒和正常病毒(阳性对照)时,如何合理调整 MOI 值,使其具有可比性?

慢病毒滴度较低,通常需要较高的 MOI(如 20)才能有效感染,而正常病毒滴度较高,合适的 MOI 可能为 0.1。要将两者放在一起进行比较,可能需要考虑以下因素: 实验目的: 如果关注的是相同数量的感染细胞,可以根据感染效率调整 MOI,以保证相似的感染率。 如果关注的是病毒自身的感染特性,可能需要分别选择最佳 MOI 进行单独实验,再综合分析。 病毒载量 …

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同样是慢病毒感染,为什么你的感染效率那么低?

在慢病毒感染细胞过程中,会遇到哪些问题呢? 1.在细胞感染时, MOI是一个非常重要的指标,如何确定MOI值呢? MOI:复感染指数,是指病毒对细胞的感染能力,MOI越高,细胞越难被感染。通常把某株细胞有80%被感染时所用的病毒颗粒数和细胞数目的比值作为该株细胞的MOI。 MOI=(病毒滴度×病毒体积)/细胞数目 感染条件及MOI的选择原则: 1. 在细胞形 …

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嘌呤霉素筛选标记的病毒滴定 Protocol

关于使用嘌呤霉素筛选标记的慢病毒或逆转录病毒进行病毒滴定的 protocol,整理了一个常用且较为权威适用于慢病毒系统: 【嘌呤霉素筛选法的病毒滴定 Protocol】 原理简述: 将病毒感染宿主细胞,使用嘌呤霉素筛选,仅有成功整合了抗性基因的细胞能存活。最后通过计数存活细胞(克隆或整体密度)来估算病毒滴度。 实验材料: 病毒上清; HEK293T 或其他易 …

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用AAV进行大脑转染的需要知道的问题

使用腺相关病毒(AAV)进行大脑转染是一种常用的基因传递方法,具有较高的特异性和安全性,但在实际操作中也会面临一些问题。以下是一些常见的问题及其解决方案: 转染效率问题: 选择合适的AAV血清型:不同的AAV血清型对不同类型的神经元和大脑区域具有不同的亲和力。选择合适的血清型可以显著提高转染效率。 病毒滴度:确保使用足够高滴度的AAV病毒,但要避免过高的滴度 …

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